Embryo Projektu Encyklopedie

Golgiho barvení technika, také volal blackreaction po skvrna je barva, byl vyvinut v roce 1870 and1880s v Itálii, aby se mozkové buňky (neurony) viditelné pod themicroscope. Camillo Golgi vyvinul tuto techniku při práci snervová tkáň, která vyžadovala, aby Golgi zkoumal buněčnou strukturu pod mikroskopem.Golgiho zlepšit stávající metody barvení, enablingscientists zobrazit celý neurony poprvé andchanging způsob, jakým lidé o vývoji a složení z mozkových buněk. Do dvacátého století Golgiho barvenímetoda pokračovala v informování o výzkumu nervového systému, zejména pokud jde o embryonální vývoj.

Golgiho začal publikovat výzkum o nervový systém a jeho cellularstructure mezi 1870 a 1872, při práci v laboratoři Giulio Bizzozero na Ústavu Obecné Pathologyat University of Pavia v Pavia, Itálie. Poté se Golgi stal lékařem v nemocnici Pio Luogo degli Incurabili (nemocnice pro chronicky nemocné) v Abbiategrasso v Itálii. Vybudoval laboratoř v kuchyni nemocnice, kde vyvinul novou techniku k udržení nervových tkání. Barvící metody jeho timeinvolved barvení organické tkáně s červená karmín nebo blackhematoxylin a vystavovat to na činidla, jako je draslík dichromateor kyselina chromová, tvrzené jednotlivých neuronů. Vědcipak izoloval jednotlivé buňky tím, že je oddělil pod mikroskopems jehlami. Protože neurony mají jiný tvar než ostatníbuněk těla, vědci často přerušili projekce z buňky, když se je snažili oddělit. Tyto projekce includedweb-jako dendrity, které přijímají nervové impulsy a přenášet je do buňky těla, a dlouhý axon na druhé straně buňky těleto relé tyto impulsy.

Golgiho rané pokusy o zlepšení barvení podílí infuzí cellswith různých kovů zobrazit celý neurony a jiné druhy tkání ingreater detail. Po experimentování s vystavením buněk zlatu atuť, Golgi použil dusičnan stříbrný. Skvrna dusičnanu stříbrného mu umožnila vidět neurony v plném rozsahu a zčernala je proti bledě žlutému pozadí. Černá Barva obarvených neuronů vedlaho pojmenovat jeho techniku la reazione nera (the blackreaction). Proces barvení obarvil pět až deset procent vzorku buněk, což umožnilo Golgimu vidět jednotlivé buněčné struktury uprostřed rozmotané hmoty nervové tkáně.

mechanismy Golgiho barvicí techniky byly podobné těmjeho současníků. Za prvé, pro vytvrzení měkké nervové tkáně, Golgi ponořil vzorky po dobu až čtyřiceti pěti dnů v 2,5 procenturoztok dichromanu draselného. Dále namočil vzorky do 0.5DO 1% roztoku dusičnanu stříbrného pro různé časybarví některé buňky černě. Golgiho pak dehydrovaný sampleswith alkoholu a nakrájené je ve 100 micron intervalech, equivalentof tloušťka kus papíru, dostatečně široký, aby držet jeden neuronintact. Golgi pak opláchl tkáň v terpentýnu a připojilna sklíčko s čirým gumovým damarem, aby se zachovala. V tu chvíli zkoumal vzorek pod mikroskopem.

Golgiho zveřejnila výsledky jeho postup barvení v 1873paper názvem “Sulla Struttura della Sostanza Grigia del Cervello”(Na Strukturu Šedé Mozkové Hmoty). V Německu Franz Bollpublikoval poznámky o Golgiho práci v německých časopisech, které šířilyzprávy o Golgiho práci. Golgiho nadále používat jeho barvení techniqueto zkoumat nervové tkáně, a později nahromaděné jeho nalezení inSulla Fina Anatomia degli Organi Centrali del Sistema Nervoso(Na Jemné Anatomie Centrální Orgány Nervového Systému), zveřejněné v roce 1885. Ten rok Eugen Bleuler, psychiatršvýcarsko, použil Golgiho metodu barvení a představil vzorky mozkové kůry králíka lékařské společnosti v Curychu.

V 1880s, Albert von Kölliker, fyziolog ve Švýcarsku,studoval vývoj mozku, neuro-smyslové cesty, andinternal vývoj orgánů u savců pomocí Golgiho stainingtechnique. Naučil se techniku pod vedením Golgiin roce 1887, a publikoval “Über Golgiho to Untersuchungen, den FeinerenBau des Centralen Nervensystems Betreffend” (O Golgiho to StudiesConcerning Jemnější Struktury Centrálního Nervového Systému) laterthat rok. Kölliker ocenil Golgiho barvicí techniku, což vedlo k tomu, že ji přijali více vědců.

V roce 1887, Santiago Ramón y Cajal ve Španělsku změnila technika byintroducing dusičnanu stříbrného, aby se tkáň ve dvou kratších vsákne,spíše než jeden dlouhý máčet. Tato změna zlepšila barvu adetail skvrny. Badatelé jako Golgiho a Ramón y Cajal usedresults z těchto barvení studie pomáhají rozvíjet neurondoctrine, který uvedl, že neurony byly jednotlivé buňky thattransmitted elektrické impulsy do a od sebe navzájem. Tato teorietransformované teorie struktury nervového systému afunkčnost. Vědci potvrdiliteorie pomocí techniky barvení Golgiho k zobrazení mezer nebo synapsí mezi neurony. Golgi a Ramón y Cajal sdíleli thenobelovu cenu za fyziologii nebo medicínu v roce 1906.

V roce 1917, Pío del Río Hortega dále upraveny tak, Golgiho metodou byfixing tkání s formaldehydem, chloralhydrát, andpotassium chroman, který se snížil čas potřebný k dětí barvení. Do dvacátého prvního století vědci používali metodu delRío Hortegy k barvení neuronálních mozkových buněk, jako je neurogliaa buňky mozečku. Po klidu v popularitě mezisvětové války, Golgiho barvicí technika získala popularitu vpozdě 1930 se zavedením elektronového mikroskopu.

vědci použili Golgiho barvicí techniku, aby lépe vysvětlili formování neuronů, mozku a smyslových cest. Golgistaining také pomohl vědci klasifikovat organely uvnitř buněk,včetně svalových buněčných organel, které ukládat a transportovat vápník,tzv. sarkoplazmatického retikula, a protein-modifyingorganelles v buňkách, která se nazývají Golgiho aparátu. Technika barvení Golgiho zůstala primární metodou barvenído dvacátého prvního století.