837. Kolonstyret levering af virale vektorer ved hjælp af Virus-Mikrobeadkonjugater til genterapi af inflammatorisk tarmsygdom

i løbet af de sidste par år har vi udviklet en ny genoverførselsteknologi, der muliggør sikker og effektiv levering af rekombinante virale vektorer til målsteder til genterapiapplikationer. I denne teknologi fastgøres virale partikler stabilt til overfladerne af mikroperler og leveres derefter til målsteder i form af virus-mikrobeadkonjugater. Sådanne konjugater kan inficere celler med effektivitet svarende til eller endda større end frie virale vektorer. Især kan transduktionen af målceller, som er dårligt tilladte for infektion med frie virale vektorer, forbedres betydeligt, hvilket giver de vedhæftede virale vektorer bredere tropisme. Denne genoverførselsteknologi bruges i øjeblikket til at udvikle en genoverførselsstrategi for inflammatorisk tarmsygdom (IBD). Ved at bruge en adenoviral vektor, der bærer genet for en potent antiinflammatorisk faktor, interleukin-10 (IL-10), spørger vi, om den adenovirale vektor kunne leveres til betændte læsioner i tyktarmen ved intra-kolonisk administration af virus-mikrobead-konjugater ved lavement, og om dette kunne hæve lokale IL-10-niveauer i tyktarmen til forbedring af colitis. Vi har demonstreret ved hjælp af musekolitismodeller, at intra-kolonisk administration af adenovirale vektorer, der bærer mus IL-10-genet i form af virus-mikrobead-konjugater, tilvejebragte forbedret forbedring af colitis over de samme adenovirale vektorer, der blev administreret i fri form. Denne større effektivitet til forbedring af colitis stammer primært fra forbedret transduktion af kolonvæv og efterfølgende produktion på højt niveau af IL – 10 lokalt i det betændte tyktarm. Vi har også indledt en undersøgelse for at teste, om adeno-associerede virale vektorer (AAV) kunne bruges i form af virus-mikrobead-konjugater til deres fokuserede levering til betændte læsioner i tyktarmen. Eksperimenter, der bruger AAV, der bærer et markørgen, antyder, at brugen af virus-mikrobead-konjugater kan forbedre transduktionen af kolonvæv af AAV i en musekolitismodel. Vi spørger nu, om intra-kolonisk administration af AAV, der bærer musen IL-10-genet i form af virus-mikrobead-konjugater, kunne hæve lokale IL-10-niveauer til forbedring af colitis ved effektiv transduktion af det betændte tyktarm. Disse resultater antyder potentialet for denne genoverførselsteknologi til at tjene som en effektiv genterapistrategi for IBD. En klar fordel ved denne teknologi i forhold til andre virusmedierede genoverførselsstrategier til behandling af IBD, herunder dem, der involverer systemisk levering af virale vektorer, er, at leveringen af virale vektorer og efterfølgende produktion af IL-10 (eller andre terapeutiske proteiner) er fokuseret på betændte læsioner. Da alle virale partikler desuden er forankret stabilt til mikroperler, bør ukontrolleret levering af virale vektorer til og efterfølgende transduktion af andre organer minimeres. Disse egenskaber bør ikke kun maksimere den terapeutiske effektivitet, men også forbedre sikkerheden ved brugen af virale vektorer.