in Vitro evaluering af kolloidalt sølv på immunfunktion: Antilymfoproliferativ aktivitet

abstrakt

kolloidalt sølv (AgC) bruges i øjeblikket af mennesker, og det kan internaliseres gennem indånding, injektion, indtagelse og dermal kontakt. Der er dog begrænset information om immunologisk aktivitet; flere undersøgelser ved hjælp af kolloid sølv er nødvendige. I denne undersøgelse er virkningerne af AgC (17.5 ng/mL) på immunologiske parametre (proliferation og immunophenotyping) ved anvendelse af humane perifere blodmononukleære celler (PBMC) og makrofager (fagocytose) og cytotoksicitet på leukæmi og lymfomcancercellelinjer (1,75 til 17,5 ng/mL) blev undersøgt. AgC blev observeret at signifikant () reducere interleukin-2 (IL-2) produktion og proliferation induceret af phytohemagglutinin eller concanavalin A i PBMC uden at påvirke dets cellelevedygtighed, men med cytotoksisk virkning på kræftceller. IL-2 -, IL-4 -, IL-6 -, IL−10 -, INF-karrus-og IL-17A-cytokinerproduktion og CD3+, CD3-CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ og CD16+CD56+ PBMC-fænotyper blev ikke påvirket af AgC. Den foreliggende undersøgelse viser, at kolloidalt sølv er harmløst og ikke-toksisk for immunsystemets celler, og dets evne til at interferere med immunresponset ved faldende celleproliferation, når det stimuleres med mitogener, demonstrerede AgC ‘ s antilymfoproliferative potentiale.

1. Introduktion

bioaktivitet af stoffer er blevet screenet for at identificere egenskaber relateret til den antitumorale eller antiproliferative virkning . Produkter med denne aktivitet er blevet anvendt i klinisk praksis til behandling af kræft eller sygdomme relateret til inflammation, såsom autoimmunitet. Sølvprodukter er blevet brugt i tusinder af år til hygiejne og som antimikrobielle midler. Siden 1964 er kolloid sølv (AgC) blevet registreret som et biocidholdigt materiale i USA ; AgC er almindeligt anvendt som desinfektionsmiddel af vand og fødevarer til konsum . Generelt er disse produkter en blanding af metalliske nanopartikler med iltningstilstand på nul (Ag+0) og sølvsalte med iltningstilstande på Ag+1, +2 eller +3 . Der er undersøgelser, der tyder på, at antibakterielle og antitumoregenskaber afhænger af iltningstilstandene af sølv . Sølv nanopartikler (AGNP ‘ er) og sølvioner (Ag+) har forskellige niveauer af toksicitet på grund af deres overfladiske ladningsinteraktioner. Sølvioner er mere giftige, fordi de kan interagere med negative grupper af proteiner og producere strukturelle ændringer på den cellulære membran og cytoplasmatiske proteiner, mens AGNP ‘er kan interagere med DNA og forårsage skade og strukturel blokering; nogle undersøgelser har foreslået, at disse nanostrukturer kan producere øget toksicitet ved lange eksponeringstider på grund af det faktum, at AGNP’ er i vandige opløsninger kan ilte og frigive sølvioner; den vellykkede anvendelse af kolloide sølvopløsninger kan forklares med denne handlingsmekanisme . Anticanceraktiviteten af AgC på MCF-7-kræftceller skyldes sandsynligvis induceret apoptose ved at nedsætte lactatdehydrogenase og øge superkildesimutaseaktiviteter; i modsætning hertil faldt lactatdehydrogenaseaktiviteten i Pbmc med AgC, men det korrelerede ikke med celledød . Der er knap videnskabelig information om immunologiske og kræftparametre hos mennesker med hensyn til virkningerne af kolloidalt sølv, som en blanding af nanopartikler og ioner, sammenlignet med sølv nanopartikler forskning. Denne undersøgelse blev designet til at undersøge de antiproliferative egenskaber af kolloidalt sølv og dets virkning på cellulær immunophenotyping, cytokinproduktion og fagocytose på PBMC.

2. Materialer og metoder

2.1. Kolloid sølv (AgC)

Grenetinstabiliseret kolloid sølv blev købt fra MICRODYN (m. Det blev steriliseret ved filtrering (0,2 liter filter, Millipore, USA) og fortyndet til en koncentration på 10,5 liter/mL med RPMI-1640 suppleret med 10% FBS til in vitro-analyser.

2.2. Reagenser

Phytohemagglutinin (anvendt i doser på 5 liter/mL) og concanavalin A (anvendt i doser på 5 liter/mL) blev købt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). 3,4 mM stamopløsning i RPMI 1640 ved stuetemperatur, og LPS (E. coli 0111:B4, Sigma-Aldrich) blev fremstillet ved 10 ng/mL til behandling af humane perifere blodmononukleære celler.

2.3. AgC karakterisering

morfologien af kolloidalt sølv blev undersøgt med feltemissionsscanningselektronmikroskop (sem) (Nova NanoSEM200 FEI). Kolloid opløsning (50 liter) blev anbragt på et carbonbånd og tørret ved stuetemperatur. Nanopartikelstørrelse og fordelingsmålinger blev bestemt ved hjælp af en dynamisk lysspredning (DLS) udført af en nanosator NS 90 Malvern instrumenter (Malvern Instruments, UK); størrelsesfordelinger givet af DLS blev rapporteret som procentdel af intensitet, og resultaterne blev præsenteret som middelværdien af mindst tre målinger. Resonansplasmon målt ved UV-vis blev observeret i et område mellem 300 og 600 nm ved anvendelse af NanoDrop Spektrofotometer 2000 (Thermo Fisher Scientific).

2.4. Isolering af perifere Blodmononukleære celler (PBMC)

blod fra raske humane frivillige blev opnået med hepariniserede sprøjter og anbragt i sterile polypropylenrør. PBMC blev yderligere isoleret med Histopak 1,077 densitetsgradientcentrifugering ved 400 g i 30 minutter ved 25 liter C (Sigma-Aldrich). PBMC blev vasket to gange med RPMI 1640-medium suppleret med 10% føtalt bovint serum (FBS) og 1% antibiotikum-antimykotisk opløsning (kaldet komplet RPMI-medium) ved 250 g i 10 minutter ved 25 liter C.

2,5. Cellelevedygtighed

PBMC blev justeret til 1 liter 106 celler/mL i komplet RPMI-medium, og 17,5 ng/mL kolloid sølv blev tilsat og inkuberet i 72 timer ved 37 liter C og 5% CO2-atmosfære. Derefter blev supernatanten fjernet ved centrifugering ved 250 g. celler blev derefter vasket to gange med komplet RPMI-medium. Cellelevedygtighed blev bestemt af det kolorimetriske MTT-reduktionsassay, og optiske densiteter som følge af formasanproduktion blev aflæst ved 570 nm. Cellelevedygtighed blev udtrykt som procentvis levedygtighed sammenlignet med den ubehandlede kontrol. Resultaterne blev givet som middelkurs for tre uafhængige eksperimenter.

K562 (kronisk myelogen leukæmi), MOLT-4 (akut lymfoblastisk leukæmi), Ramos (Burkitts lymfom) og l5178y (lymfom) kræftcellelinjer blev købt fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) og vedligeholdt i komplet RPMI-medium. Celler blev dyrket ved 37 liter C og 5% CO2 atmosfære. Cancercellelinjer (5 liter 103 celler / brønd) blev belagt på 96-brøndsplader og inkuberet i 24 timer ved 37 liter C i 5% CO2-atmosfære.

efter inkubation blev kulturmediet fjernet, og kolloid sølv blev tilsat i koncentrationer i området fra 1,75 til 17,5 ng/mL. Pladerne blev derefter inkuberet i 5 timer ved 37 liter C og 5% CO2-atmosfære. Derefter blev supernatanten fjernet, og cellerne blev vasket to gange med rpmi 1640 medium. Cellelevedygtighed blev bestemt ved trypan blue-udelukkelsesmetoden, og cytotoksicitet blev udtrykt som 50% (LD50) og 100% (LD100) cellevæksthæmning sammenlignet med ubehandlet kontrol. Resultaterne blev givet som middelkurs for tre uafhængige eksperimenter.

2.6. Cytokinassay

supernatanter fra AgC-behandlet PBMC blev analyseret for cytokinniveauer. IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-Karr, TNF-Karr og IL-17A humane cytokiner blev bestemt ved strømningscytometri (Accuri C6, BD Bioscience, CA, USA) ved hjælp af CBA Th1/Th2/Th17 Cytokinsæt BD Karr (BD Bioscience, Bedford, MA, USA) efter producentens anvisninger. CBA Flekssæt analyse blev udført ved hjælp af fcap array v1.0 program (blød strøm Inc., USA). Proteinværdier blev konverteret til NIBSC/hvem proteinstandarder for yderligere sammenligninger.

2.7. Proliferation og IL-2-Analyse

PBMC blev isoleret ved histopak densitetsgradientcentrifugering, vasket tre gange med PBS og resuspenderet i fortyndingsmiddel C ved 106 celler/mL. Cellesuspensionen blev derefter fortyndet med det samme volumen på 2,5 mM pkh26 farvestof (Sigma, St. Louis, MO) fremstillet i fortyndingsmiddel C, inkuberet i 3 minutter ved stuetemperatur, derefter tilsat til et lige så stort volumen FBS og inkuberet ved stuetemperatur i yderligere 2 minutter for at stoppe mærkningen i henhold til “Rimaniol et al., 2003 .”Derefter blev PBMC justeret i koncentrationer på 1 liter 106 celler/mL, behandlet med kolloid sølv i en koncentration på 17,5 ng/mL, PHA eller Con A og inkuberet i 72 timer ved 37 liter C og 5% CO2-atmosfære; den cellulære proliferation blev bestemt ved strømningscytometri. Mængderne af IL – 2-Indhold i supernatanter af PBMC blev målt ved Human IL-2 High Sensitivity ELISA kit (detektionsgrænse 0,4 pg/mL) og anvendt i henhold til producentens anvisninger (eBiosciences, Vienna, Østrig).

2.8. Bestemmelse af nitrit / Nitratproduktion

nitrit-og nitratniveauer blev målt ved den kolorimetriske Griess-reaktion ved anvendelse af nitratreduktase (nitrat/Nitritkolorimetrisk Assay Kit Cayman, USA) i henhold til producentens anvisninger. Serumnitrit / nitratniveauer blev udtrykt som nM / 200 liter.

2.9. Strømningscytometrianalyse af Celleoverfladeantigener

PBMC blev justeret ved koncentrationer på 1 liter 106 celler/mL og behandlet med kolloid sølv i koncentrationen på 17,5 ng/mL, og pladerne blev inkuberet i 72 timer ved 37 liter C og 5% CO2-atmosfære. Derefter blev celler opsamlet ved centrifugering ved 600 g i 10 minutter, og et sæt antistoffer CD3+ FITC/CD8+, PE/CD45+ og PerCP/CD4 APC eller et andet sæt antistoffer CD3+ FITC/CD16+, CD56 PE/CD45 og PerCP/CD19 APC (BD Multitest IMK Kit) blev tilsat og inkuberet 15 minutter ved stuetemperatur i mørke. Erythrocytterne blev derefter lyseret ved tilsætning af 450 liter 1 gang BD FACS opløsning til oprensning og inkubation 15 minutter ved stuetemperatur i mørke. Prøver var derefter klar til at blive analyseret på cytometeret. Købet blev udført på Accuri C6 BD instrument ved hjælp af BD Multiset programmel med BD arbejdsliste Manager programmel. Automatiseret gating blev brugt til nem analyse af hver delmængde population.

2.10. Optagelse af FITC-dekstran

dendritiske celler (DC ‘ er) blev genereret fra PBMC og fik lov til at klæbe til 0,22 filterdækkede kulturkolber (TPP, Tyskland). Efter 2 timer ved 37 blev ikke-adhærente celler fjernet, og adhærente monocytter blev efterfølgende dyrket i 5 dage i RPMI-1640 suppleret med 10% FBS og 800 U/mL rhuGM-CSF (Peprotech, m) og 50 ng/mL IL-4 (Peprotech, m). Derefter blev cellerne behandlet med kolloidalt sølv i koncentrationer på 17,5 ng/mL og inkuberet i 72 timer ved 37 kg C og 5% CO2-atmosfære. DCs-endocytose blev evalueret ved at inkubere 1 liter 106 celler med 1 mg/mL FITC-dekstran (BD) i 30 minutter ved 37 liter C. Efter vask blev celler analyseret ved strømningscytometri. Kontrollerne omfattede rør, der var inkuberet med FITC-dekstran ved 4 kg c for at hæmme den endocytiske proces og en basal optagelse udført på 0-tidspunktet. Optagelsen blev kvantificeret ved FACS-analyse (10.000 celler pr. Levedygtighed blev bestemt ved hjælp af trypan blue-udelukkelsesteknikken.

2.11. Statistisk analyse

resultaterne blev evalueret af ANOVA, og median cytokinniveauer mellem behandlingerne blev sammenlignet ved hjælp af Mann–Hvidney-testen.

3. Resultater

3.1. Kolloid Sølvkarakterisering

karakteriseringen af kolloidalt sølv opløst i vand og cellekulturmedium blev analyseret ved dynamisk lysspredning (DLS); kolloidalt sølv opløst i vand viste en gennemsnitlig størrelse på 100 nm med et polydispersitetsindeks på 0,2; kolloidalt sølv opløst i cellekulturmedium viste en gennemsnitlig størrelse på 155 nm og polydispersitetsindeks på 0,23 (Figur 1(A) og 1(b)). Sem billede viste partikler population opløst i vand med partikelstørrelse mellem 50 og 190 nm (Figur 1 (c) og 1(d)); kolloid sølv opløst i cellekulturmedium viste en kombination af nanopartikler og nogle sølvsalte (Figur 1(e) og 1(f)); den gennemsnitlige størrelse opnået ved DLS korrelerede imidlertid med histogram af partikler og karakteristisk plasmonresonans (Figur 1(g), 1(h) og 1(i)). Analysen af kolloid sølv antyder, at denne opløsning har semispherical form og heterogen population, dannet af nanopartikler og klynge dannet af sølvsalte. Når AgC var karakteriseret, fortsatte vi med at evaluere de forskellige biologiske effekter.

Figur 1

størrelsesfordeling af kolloid sølv. (a) DLS af kolloid sølv opløst i vand viste en gennemsnitlig størrelse på 100 nm med et polydispersitetsindeks på 0,2. (B) DLS-målinger af kolloid sølv opløst i cellekulturmedium med en gennemsnitlig størrelse på 155 nm og polydispersitetsindeks på 0,23. (c, d) sem billede af partikler populationer opløst i vand. (e, f) sem billede af kolloid sølv opløst i cellekulturmedium. (g, h) Histogram af partikler opløst i henholdsvis vand og dyrkningsmedium. (i) UV-vis spektre af kolloid sølv. (J) sølvsalte dannet i prøver af kolloid sølv opløst i dyrkningsmedium. DLS, dynamisk lysspredning; SEM, scanning elektronmikroskopi; og a.u., vilkårlige enheder.

3.2. Bestemmelse af cellulær Proliferation og IL-2-produktion

først bestemte vi, om den cytotoksiske dosis, der tidligere blev anvendt i brystkræftceller, påvirker lymfocytter eller makrofagfunktioner. Resultaterne viste, at kolloid sølvbehandling ikke påvirkede signifikant () PBMC-celleproliferation og celletal, og behandlingerne med mitogener Con A eller PHA signifikant () øgede celleproliferationen og celletallet sammenlignet med den ubehandlede kontrol; interessant nok reducerede de kombinerede behandlinger med AgC/Con A eller AgC/PHA signifikant () celleproliferationen og celletallet (figur 2 og 3) af PBMC. Lignende resultater blev observeret ved strømningscytometri og fluorescensmikroskopi ved anvendelse af det fluorescerende farvestof PKH26 (kontrol (94%), Con A (165%), PHA (156%), AgC (91%), AgC + Con A (80%) og AgC + PHA (77%)) (figur 3, 4 og 5). Derudover påvirkede AgC-behandling ikke IL – 2-produktionen sammenlignet med kontrollen (15 pg/mL) (), men en stigning i IL-2-produktionen blev fundet, når PBMC blev stimuleret med PHA (176 pg/mL) eller Con a (150 pg/mL), og behandlinger med AgC + Con a (15 pg/mL) eller AgC + PHA (13 pg/mL) nedsatte IL-2-produktionen () (figur 4).

figur 2

celle levedygtighed af PBMC behandlet med kolloid sølv og mitogener. PBMC (1 x 106 celler/mL), der blev behandlet med Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) og inkuberes i 72 timer ved 37°C, 5% CO2-atmosfære. Cellelevedygtighed blev analyseret ved MTT-analyse. Dataene repræsenterer den gennemsnitlige standardafvigelse for tre uafhængige eksperimenter. . AgC, kolloid sølv; PHA, phytohemagglutinin; og Con a, concanavalin A.

figur 3

celletal af PBMC behandlet med kolloid sølv og mitogener. PBMC (1 x 106 celler/mL), der blev behandlet med Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) og inkuberes i 72 timer ved 37°C, 5% CO2-atmosfære. Celletal blev analyseret ved strømningscytometri. Dataene repræsenterer den gennemsnitlige standardafvigelse for tre uafhængige eksperimenter. . AgC, kolloid sølv; PHA, phytohemagglutinin; og Con a, concanavalin A.

figur 4

cellulær proliferation og IL-2 produktion af PBMC behandlet med kolloid sølv og mitogener. PBMC (1 x 106 celler/mL), der blev behandlet med Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) og inkuberes i 72 timer ved 37°C, 5% CO2-atmosfære. Cellulær proliferation baseret på ekspressionen af PKH26 blev analyseret ved strømningscytometri. IL – 2 supernatanterne blev evalueret ved ELISA-test. Dataene repræsenterer den gennemsnitlige standardafvigelse for tre uafhængige eksperimenter. . AgC, kolloid sølv; PHA, phytohemagglutinin; og Con a, concanavalin A.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

figur 5

cellulær proliferation af PBMC behandlet med kolloid sølv og mitogener. PBMC (1 x 106 celler/mL), der blev behandlet med (a) negativ kontrol, (b) kontrol, (c), PHA (5 µg/mL), (d) Con A (5 µg/mL), (e) AgC (17.5 ng/mL), (f) AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), eller (g) AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) og inkuberes i 72 timer ved 37°C, 5% CO2-atmosfære. Cellulær proliferation blev analyseret ved mikroskopi fluorescens. AgC, kolloid sølv; PHA, phytohemagglutinin; og Con a, concanavalin A.

3.3. Cytotoksisk virkning af AgC på lymfoide og leukæmi Kræftcellelinjer

vores resultater bekræftede AGC ‘ s antiproliferative og cytotoksiske egenskaber på leukæmisk (Molt-4 og K562) og lymfomcellelinjer (Ramos og L5178Y) på en dosisafhængig måde (1,75 til 17,5 ng/mL) () (figur 6).

figur 6

cellelevedygtighed af kræftcellelinjer behandlet med kolloid sølv og mitogener. K562 -, Molt-4 -, Ramos-og L5178Y-cancercellelinjer (5-og 103-celler/brønd) blev behandlet med flere doser AgC og inkuberet i 5 timer ved 37-og 5 – % – CO2-atmosfære. Cellelevedygtighed blev analyseret ved MTT-analyse. Dataene repræsenterer den gennemsnitlige standardafvigelse for tre uafhængige eksperimenter. . AgC, kolloid sølv.

3.4. Cytokinbestemmelse

udover AgC-behandling påvirkede ikke produktionen () af IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-Karr, IL-17A (0 pg/mL) eller TNF-Karr (5,84 pg/mL) sammenlignet med ubehandlet kontrol. Imidlertid inducerede LPS-behandling anvendt som positiv kontrol en høj produktion af alle evaluerede cytokiner (tabel 1).

3.5. Fænotypebestemmelse af Celleoverflademarkører

vores resultater viste, at AgC−behandling ikke påvirkede procentdelen af ekspression af cellulære populationer CD3+ (79,7%), CD3-CD19+ (10,2%), CD3+CD4+ (52,2%), CD3+CD8+ (33,9%) og CD16+CD56+ (7,6%) sammenlignet med kontrollen () (tabel 2).

3.6. 2491>

den kolloide sølvbehandling (99%) påvirkede ikke levedygtigheden af dendritiske celler (Figur 7(A)) eller niveauerne af peroksynitritter evalueret (Figur 7(b)), men øgede fagocytoseprocenten (Figur 7(c)) sammenlignet med kontrollen ().

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)
(c)

Figur 7

Cellelevedygtighed af humane makrofager, fagocytose og peroksynitritproduktion. Humane makrofager (1 liter 106 celler) blev behandlet med AgC og inkuberet i 5 timer ved 37 liter C og 5% CO2-atmosfære. (a) cellelevedygtighed blev analyseret ved trypan blue assay. (B) makrofager fagocytose af FITC-dekstran evalueret ved strømningscytometri. C) nitrat/nitrit bestemt ved Griess-reaktion (nitrat/nitritkolorimetrisk analysesæt); LPS blev anvendt som positiv kontrol. Dataene repræsenterer den gennemsnitlige standardafvigelse for tre uafhængige eksperimenter. . AgC, kolloid sølv; FITC-dekstran, fluoresceinisothiocyanat-dekstran; og LPS, lipopolysaccharid.

4. Diskussion

det er kendt, at flere kemoterapeutiske midler anvendt til kræftbehandling (cyclophosphamid, vinblastin, vincristin, bleomycin og cisplatinum) har antiproliferative og cytotoksiske virkninger; men ved lave doser kan de stimulere immunresponset . Virkningen på immunsystemet af ethvert stof bør testes, fordi enhver skade i dette system kan påvirke kroppens homeostase. I den foreliggende undersøgelse antyder analysen af kolloidalt sølv tilstedeværelsen af en heterogen population af nanopartikler og klynger dannet af sølvsalte, der sandsynligvis stammer fra interaktioner med proteiner indeholdt i komplet dyrkningsmedium. Aggregeringseffekten af sølvpartiklerne i biologiske væsker på grund af tilstedeværelsen af proteiner og lipider er rapporteret . Derudover viste vores resultater, at AgC (17,5 ng/mL) kan hæmme produktionen af IL-2 induceret af mitogener. Derfor kunne den immunsuppression induceret i PBMC medieres ved inhiberingen af IL-2-frigivelse. Den immunsuppressive aktivitet af nogle lægemidler, såsom cyclosporin og asathioprin, er blevet bekræftet ved inhibering af proliferation af lymfocytter og produktion af cytokiner (INF-kurr, IL-2, RANTES, TGF-kurr og TNF-kurr), når lymfocytter stimuleres af reagenser, såsom PHA, Con A eller poke-mitogen . IL – 2 er en autokrin vækstfaktor for T-celler, og dets produktion er selektivt hæmmet ved behandling med immunsuppressiva tacrolimus (FK506) eller mycophenolsyre . Det er kendt, at immunsuppressive midler (kortikosteroider) anvendes til behandling af lymfoide maligniteter, fordi de inducerer apoptose af maligne lymfoide celler . Vi demonstrerede de antiproliferative og cytotoksiske egenskaber af AgC (155 nm) (doser fra 1,75 til 17,5 ng/mL) på leukæmiske og lymfomatøse cellelinjer på trods af tidligere rapporter, der nævnte, at sølvpartikler i området 10-100 nm diametre er mere cytotoksiske end partikler i større størrelse . Det er nødvendigt at kende mekanismen for selektivitet mellem PBMC og myeloid og lymfoid Oprindelse kræftceller, og fremtidige undersøgelser bør udvikles inden for receptormedieret apoptose, såsom diskuteret af “Vega og de Maio, 2005 .”På grund af glukokortikoidresistens i lymfombehandling fortsætter tumorcellerne deres udvidelser i nærvær af glukokortikoider . Af denne grund kan AgC tilbyde en ny klinisk mulighed, der skal overvejes, men flere undersøgelser relateret er nødvendige. På den anden side indikerer vores resultater, at cytokinproduktion og procentdelen af overflademarkører udtrykt af T -, B-og NK-celler ikke påvirkes som reaktion på AgC (17,5 ng/mL), modsat andre immunsuppressorer, såsom rapamycin eller soraphen, for hvilken immunsuppressoreffekten tilskrives interferensen af en signalvej og metabolismen af fedtsyrer . Desuden er der tegn på, at immunsystemceller kan aktiveres som reaktion på biomaterialer, selvom MHC/peptid/TCR-inducerede signalveje ikke forventes. Imidlertid kan alternative ikke-genkendte veje føre til aktivering ved tværbinding af glycoproteiner på plasmamembranoverfladen, såsom mitogeninduceret lymfocytproliferation . Kolloid sølv (17,5 ng/mL) inducerede ikke deres produktion, men fagocytoseaktiviteten steg sandsynligvis på grund af optagelsen af kolloidalt sølv på en uspecifik måde. Andre forfattere har beskrevet, at sølvnanopartikler i et område på 5, 10, 15 og 100 nm øger de reaktive iltarter, der påvirker mitokondriefunktionen, og at fagocytose af sølvpartikler blokerer cellecyklus i S-fasen og stimulerer inflammatorisk signalering gennem dannelse af reaktive iltarter, efterfulgt af sekretion af TNF-kar, hvilket nedsatte levedygtigheden af rotteleverceller .

afslutningsvis demonstrerer denne undersøgelse ikke-toksicitet af kolloidalt sølv over immunsystemceller og dets evne til at interferere med immunresponset ved faldende celleproliferation, når det stimuleres med mitogener, hvilket antyder, at kolloidalt sølv kan betragtes som et immunsuppressivt middel, men flere undersøgelser skal udføres for at fastslå dets effektivitet og virkningsmekanisme.

konkurrerende interesser

forfatterne erklærer, at der ikke er nogen interessekonflikt med hensyn til offentliggørelsen af dette papir.

anerkendelser

denne undersøgelse understøttes af laboratorie for Immunologi og virologi, Det Biologiske Fakultet, Det autonome universitet i Nuevo Leon, San Nicol, NL, NL, i samarbejde med “Red Temristica de Inmunologicurera en C Prisncer y Enfermedades Infecciosas” med Register nr. 253053, CONACYT.