Évaluation in Vitro de l’Argent colloïdal sur la fonction immunitaire: Activité antilymphoproliférative

Résumé

L’argent colloïdal (AgC) est actuellement utilisé par l’homme et peut être intériorisé par inhalation, injection, ingestion et contact cutané. Cependant, les informations sur l’activité immunologique sont limitées; d’autres recherches utilisant de l’argent colloïdal sont nécessaires. Dans la présente étude, les effets de l’AgC (17.5 ng/mL) sur les paramètres immunologiques (prolifération et immunophénotypage) en utilisant des cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) et des macrophages (phagocytose) et la cytotoxicité sur les lignées cellulaires cancéreuses de leucémie et de lymphome (1,75 à 17,5 ng/mL) ont été étudiées. On a observé une diminution significative () de la production et de la prolifération d’interleukine-2 (IL-2) induite par la phytohémagglutinine ou la concanavaline A dans le PBMC sans affecter sa viabilité cellulaire mais avec un effet cytotoxique sur les cellules cancéreuses. La production de cytokines IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, INF-γ et IL-17A et les phénotypes CD3+, CD3−CD19+, CD3+ CD4+, CD3+ CD8+ et CD16+CD56+ PBMC n’ont pas été affectés par l’AgC. La présente étude démontre que l’argent colloïdal est inoffensif et non toxique pour les cellules du système immunitaire et que sa capacité à interférer avec la réponse immunitaire en diminuant la prolifération cellulaire lorsqu’il est stimulé par des mitogènes a démontré le potentiel antilymphoprolifératif de l’AgC.

1. Introduction

La bioactivité des substances a été examinée pour identifier les propriétés liées à l’action antitumorale ou antiproliférative. Les produits ayant cette activité ont été utilisés en pratique clinique pour le traitement du cancer ou de maladies liées à l’inflammation telles que l’auto-immunité. Les produits en argent sont utilisés depuis des milliers d’années pour l’hygiène et comme agents antimicrobiens. Depuis 1964, l’argent colloïdal (AgC) est enregistré comme matériau biocide aux États-Unis; au Mexique, l’AgC est couramment utilisé comme désinfectant de l’eau et des aliments pour la consommation humaine. Généralement, ces produits sont un mélange de nanoparticules métalliques à l’état d’oxydation nul (Ag+0) et de sels d’argent à l’état d’oxydation Ag+1, +2 ou +3. Des études indiquent que les propriétés antibactériennes et antitumorales dépendent des états d’oxydation de l’argent. Les nanoparticules d’argent (AgNPs) et les ions d’argent (Ag+) ont des niveaux de toxicité différents en raison de leurs interactions de charge superficielles. Les ions d’argent sont plus toxiques car ils peuvent interagir avec des groupes négatifs de protéines, produisant des changements structurels sur la membrane cellulaire et les protéines cytoplasmiques, tandis que les AGNP peuvent interagir avec l’ADN, provoquant des dommages et un blocage structurel; certaines études ont proposé que ces nanostructures peuvent produire une toxicité accrue lors de longues périodes d’exposition en raison du fait que les AGNP dans les solutions aqueuses peuvent oxyder et libérer des ions d’argent; l’utilisation réussie des solutions d’argent colloïdal peut s’expliquer par ce mécanisme d’action. L’activité anticancéreuse de l’AgC sur les cellules cancéreuses MCF-7 est probablement due à l’apoptose induite par la diminution de la lactate déshydrogénase et l’augmentation des activités de la superoxyde dismutase; en revanche, dans la PBMC, l’activité de la lactate déshydrogénase a diminué avec l’AgC, mais elle n’a pas été corrélée à la mort cellulaire. Il existe peu d’informations scientifiques sur les paramètres immunologiques et cancéreux chez l’homme concernant les effets de l’argent colloïdal, en tant que mélange de nanoparticules et d’ions, par rapport à la recherche sur les nanoparticules d’argent. La présente étude a été conçue pour explorer les propriétés antiprolifératives de l’argent colloïdal et son effet sur l’immunophénotypage cellulaire, la production de cytokines et la phagocytose sur les PBMC.

2. Matériaux et méthodes

2.1. Argent colloïdal (AgC)

L’argent colloïdal stabilisé à la grenétine a été acheté à MICRODYN (Mexique) sous forme de solution mère à 0,35%. Il a été stérilisé par filtration (filtre 0,2 µm, Millipore, USA) et dilué à une concentration de 10,5 µg / mL avec du RPMI-1640, complété par du FBS à 10% pour des dosages in vitro.

2.2. Les réactifs

Phytohémagglutinine (utilisée à des doses de 5 µg / mL) et concanavaline A (utilisée à des doses de 5 µg / mL) ont été achetés auprès de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). La Doxorubicine (LEMERY S.A. de C.V., México) a été stockée sous forme de solution mère de 3,4 mM dans le RPMI 1640 à température ambiante et du LPS (E. coli 0111:B4, Sigma-Aldrich) a été préparé à 10 ng/mL pour traiter les cellules mononucléées du sang périphérique humain.

2.3. Caractérisation AgC

La morphologie de l’argent colloïdal a été étudiée au microscope électronique à balayage par émission de champ (MEB) (Nova NanoSEM200 FEI). Une solution colloïdale (50 µL) a été placée sur un ruban de carbone et séchée à température ambiante. Les mesures de la taille et de la distribution des nanoparticules ont été déterminées à l’aide d’une diffusion dynamique de la lumière (DLS) effectuée par un nanosizer NS 90 Malvern Instruments (Malvern Instruments, Royaume-Uni); les distributions de taille données par DLS ont été rapportées en pourcentage de l’intensité, et les résultats ont été présentés comme la valeur moyenne d’au moins trois mesures. Le plasmon de résonance mesuré par UV-vis a été observé dans une plage comprise entre 300 et 600 nm à l’aide du Spectrophotomètre NanoDrop 2000 (Thermo Fisher Scientific).

2.4. Isolement des Cellules Mononucléées du sang périphérique (PBMC)

Du sang provenant de volontaires humains sains a été obtenu avec des seringues héparinées et placé dans des tubes stériles en polypropylène. Les PBMC ont ensuite été isolés par centrifugation à gradient de densité Histopaque de 1,077 à 400 g pendant 30 min à 25°C (Sigma-Aldrich). Les PBMC ont été lavés deux fois avec du milieu RPMI 1640 additionné de sérum foetal bovin (FBS) à 10% et d’une solution antibiotique-antimycotique à 1% (dit milieu RPMI complet) à 250 g pendant 10 min à 25°C

2,5. La viabilité cellulaire

Des PBMC ont été ajustées à 1 × 106 cellules/mL en milieu RPMI complet, et 17,5 ng/mL d’argent colloïdal ont été ajoutés et incubés pendant 72 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. Ensuite, le surnageant a été éliminé par centrifugation à 250 g. Les cellules ont ensuite été lavées deux fois avec du milieu RPMI complet. La viabilité cellulaire a été déterminée par le test colorimétrique de réduction MTT, et les densités optiques résultant de la production de formazan ont été lues à 570 nm. La viabilité cellulaire a été exprimée en pourcentage de viabilité par rapport au témoin non traité. Les résultats ont été donnés comme la moyenne ± ET de trois expériences indépendantes.

Les lignées de cellules cancéreuses K562 (leucémie myéloïde chronique), MOLT-4 (leucémie lymphoblastique aiguë), Ramos (lymphome de Burkitt) et L5178Y (lymphome) ont été achetées auprès de American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) et maintenues dans un milieu RPMI complet. Les cellules ont été cultivées à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. Des lignées de cellules cancéreuses (5 × 103 cellules/puits) ont été plaquées sur des plaques à 96 puits et incubées pendant 24 h à 37°C dans une atmosphère de CO2 à 5%.

Après incubation, le milieu de culture a été retiré et de l’argent colloïdal a été ajouté à des concentrations allant de 1,75 à 17,5 ng / mL. Les plaques ont ensuite été incubées pendant 5 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. Ensuite, le surnageant a été éliminé et les cellules ont été lavées deux fois avec du milieu RPMI 1640. La viabilité cellulaire a été déterminée par la méthode d’exclusion du bleu de trypan, et la cytotoxicité a été exprimée en inhibition de la croissance cellulaire de 50% (DL50) et de 100% (LD100), par rapport au contrôle non traité. Les résultats ont été donnés comme la moyenne ± ET de trois expériences indépendantes.

2.6. Dosage des cytokines

Les surnageants des PBMC traités par AgC ont été analysés pour déterminer les taux de cytokines. Les cytokines humaines IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF-α et IL-17A ont été déterminées par cytométrie en flux (Accuri C6, BD Bioscience, CA, USA), en utilisant le kit de cytokines CBA Th1/Th2/Th17 BD™ (BD Bioscience, Bedford, MA, USA), en suivant les instructions du fabricant. L’analyse des ensembles de flex CBA a été réalisée à l’aide du logiciel FCAP array v1.0 (Soft Flow Inc., USA). Les valeurs de protéines ont été converties en normes de protéines NIBSC/OMS pour d’autres comparaisons.

2.7. La prolifération et le dosage de l’IL-2

PBMC ont été isolés par centrifugation par gradient de densité histopaque, lavés trois fois avec du PBS et remis en suspension dans le Diluant C à 106 cellules/mL. La suspension cellulaire a ensuite été diluée avec le même volume de colorant PKH26 de 2,5 mM (Sigma, St. Louis, MO) préparé dans le Diluant C, incubée pendant 3 min à température ambiante, puis ajoutée à un volume égal de FBS, et incubée à température ambiante encore 2 min pour arrêter le marquage, selon ” Rimaniol et al., 2003 .” Par la suite, les PBMC ont été ajustés à des concentrations de 1 × 106 cellules/mL, traités avec de l’argent colloïdal à une concentration de 17,5 ng/mL, PHA ou Con A, et incubés pendant 72 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2 ; la prolifération cellulaire a été déterminée par cytométrie en flux. Les quantités de teneur en IL-2 dans les surnageants de PBMC ont été mesurées par le kit ELISA IL-2 Haute Sensibilité humaine (limite de détection 0,4 pg/mL) et utilisées selon les instructions du fabricant (eBiosciences, Vienne, Autriche).

2.8. Détermination de la production de Nitrites / nitrates

Les niveaux de nitrites et de nitrates ont été mesurés par la réaction colorimétrique de Griess à l’aide de la nitrate réductase (Kit de dosage colorimétrique Nitrate / Nitrite Cayman, États-Unis) conformément aux instructions du fabricant. Les concentrations sériques de nitrites/nitrates ont été exprimées en nM/200 µL.

2.9. L’analyse par cytométrie en flux des Antigènes de surface cellulaire

PBMC a été ajustée à des concentrations de 1 × 106 cellules/mL et traitée avec de l’argent colloïdal à la concentration de 17,5 ng/mL, et les plaques ont été incubées pendant 72 h à 37 °C et 5% d’atmosphère de CO2. Ensuite, des cellules ont été collectées par centrifugation à 600 g pendant 10 minutes et un ensemble d’anticorps CD3+ FITC / CD8+, PE/ CD45+ et PerCP/ CD4 APC ou un autre ensemble d’anticorps CD3 + FITC/ CD16+, CD56 PE/ CD45 et PerCP/ CD19 APC (Kit IMK BD Multitest) ont été ajoutés et incubés 15 minutes à température ambiante dans l’obscurité. Les érythrocytes ont ensuite été lysés en ajoutant 450 µL de solution de lyse 1x BD FACS™ et en incubant 15 minutes à température ambiante dans l’obscurité. Les échantillons étaient alors prêts à être analysés sur le cytomètre. L’acquisition a été réalisée sur l’instrument Accuri C6 BD à l’aide du logiciel BD Multiset avec le logiciel BD Worklist Manager. Une grille automatisée a été utilisée pour une analyse facile de chaque population de sous-ensemble.

2.10. Des cellules dendritiques (DCS) du FITC-Dextrane

ont été générées à partir de PBMC et ont été autorisées à adhérer à des flacons de culture à couvercle filtrant de 0,22 µm (TPP, Allemagne). Après 2 h à 37°C, des cellules non adhérentes ont été enlevées et des monocytes adhérents ont ensuite été cultivés pendant 5 jours dans du RPMI-1640 additionné de 10% de FBS et de 800 U/mL de rhuGM-CSF (Peprotech, México) et de 50 ng/mL d’IL-4 (Peprotech, México). Ensuite, les cellules ont été traitées avec de l’argent colloïdal à des concentrations de 17,5 ng / mL et incubées pendant 72 h à 37 °C et 5% d’atmosphère de CO2. L’endocytose du DCs a été évaluée par incubation de 1 × 106 cellules avec 1 mg/mL de FITC-Dextrane (BD) pendant 30 min à 37°C. Après lavage, les cellules ont été analysées par cytométrie en flux. Les témoins comprenaient des tubes incubés avec du FITC-Dextrane à 4 ° C pour inhiber le processus endocytaire et une absorption basale effectuée au point 0-temps. L’absorption a été quantifiée par analyse FACS (10 000 cellules par point). La viabilité a été déterminée par la technique d’exclusion du bleu de trypan.

2.11. Analyse statistique

Les résultats ont été évalués par ANOVA et les niveaux médians de cytokines entre les traitements ont été comparés à l’aide du test de Mann–Whitney.

3. Résultats

3.1. Caractérisation de l’argent colloïdal

La caractérisation de l’argent colloïdal dissous dans l’eau et le milieu de culture cellulaire a été analysée par diffusion dynamique de la lumière (DLS); l’argent colloïdal dissous dans l’eau a montré une taille moyenne de 100 nm avec un indice de polydispersité de 0,2; l’argent colloïdal dissous dans le milieu de culture cellulaire a montré une taille moyenne de 155 nm et un indice de polydispersité de 0,23 (Figures 1 (a) et 1(b)). L’image SEM a montré une population de particules dissoutes dans l’eau avec une taille de particules comprise entre 50 et 190 nm (Figures 1 (c) et 1(d)); l’argent colloïdal dissous dans le milieu de culture cellulaire a montré une combinaison de nanoparticules et de certains sels d’argent (Figures 1(e) et 1(f)); cependant, la taille moyenne obtenue par DLS est corrélée avec l’histogramme des particules et la résonance plasmon caractéristique (Figures 1(g), 1(h) et 1(i)). L’analyse de l’argent colloïdal suggère que cette solution a une forme semi-sphérique et une population hétérogène, formée de nanoparticules et de grappes formées de sels d’argent. Une fois l’AgC caractérisé, nous avons procédé à l’évaluation des différents effets biologiques.

Figure 1

Distribution de taille de l’argent colloïdal. (a) Le DLS de l’argent colloïdal dissous dans l’eau a montré une taille moyenne de 100 nm avec un indice de polydispersité de 0,2. (b) Mesures DLS de l’argent colloïdal dissous dans un milieu de culture cellulaire avec une taille moyenne de 155 nm et un indice de polydispersité de 0,23. (c, d) Image SEM des populations de particules dissoutes dans l’eau. (e, f) Image MEB de l’argent colloïdal dissous dans un milieu de culture cellulaire. (g, h) Histogramme des particules dissoutes dans l’eau et le milieu de culture, respectivement. (i) Spectres UV-vis de l’argent colloïdal. (j) Sels d’argent formés dans des échantillons d’argent colloïdal dissous dans le milieu de culture. DLS, diffusion dynamique de la lumière; SEM, microscopie électronique à balayage; et a.u., unités arbitraires.

3.2. Détermination de la prolifération cellulaire et de la production d’IL-2

Tout d’abord, nous avons déterminé si la dose cytotoxique précédemment utilisée dans les cellules cancéreuses du sein affecte les fonctions des lymphocytes ou des macrophages. Les résultats ont montré que le traitement à l’argent colloïdal n’affectait pas de manière significative () la prolifération cellulaire et le nombre de cellules de PBMC, et les traitements avec des mitogènes Con A ou PHA augmentaient significativement () la prolifération cellulaire et le nombre de cellules, par rapport au contrôle non traité; fait intéressant, les traitements combinés avec AgC / Con A ou AgC / PHA diminuaient significativement () la prolifération cellulaire et le nombre de cellules (figures 2 et 3) de PBMC. Des résultats similaires ont été observés par cytométrie en flux et microscopie à fluorescence en utilisant le colorant fluorescent PKH26 (témoin (94 %), Con A (165 %), PHA (156 %), AgC (91 %), AgC + Con A (80 %) et AgC + PHA (77 %)) (figures 3, 4 et 5). De plus, le traitement par AgC n’a pas affecté la production d’IL-2 par rapport au contrôle (15 pg / mL) (), mais une augmentation de la production d’IL-2 a été constatée lorsque les PBMC étaient stimulés par PHA (176 pg / mL) ou Con A (150 pg / mL), et les traitements par AgC + Con A (15 pg / mL) ou AgC + PHA (13 pg / mL) ont diminué la production d’IL-2 () (Figure 4).

Figure 2

Viabilité cellulaire du PBMC traité avec de l’argent colloïdal et des mitogènes. Les PBMC (1 × 106 cellules/mL) ont été traités avec Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17,5 ng/mL), AgC (17,5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) ou AgC (17,5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) et incubés pendant 72 h à 37 °C et 5% d’atmosphère de CO2. La viabilité cellulaire a été analysée par test MTT. Les données représentent la moyenne ± écart type de trois expériences indépendantes. . AgC, argent colloïdal; PHA, phytohémagglutinine; et Con A, concanavaline A.

Figure 3

Numération cellulaire des PBMC traités avec de l’argent colloïdal et des mitogènes. Les PBMC (1 × 106 cellules/mL) ont été traités avec Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17,5 ng/mL), AgC (17,5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) ou AgC (17,5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) et incubés pendant 72 h à 37 °C et 5% d’atmosphère de CO2. Le nombre de cellules a été analysé par cytométrie en flux. Les données représentent la moyenne ± écart type de trois expériences indépendantes. . AgC, argent colloïdal; PHA, phytohémagglutinine; et Con A, concanavaline A.

Figure 4

Prolifération cellulaire et production d’IL-2 de PBMC traités avec de l’argent colloïdal et des mitogènes. Les PBMC (1 × 106 cellules/mL) ont été traités par Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17,5 ng/mL), AgC (17,5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) ou AgC (17,5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) et incubés pendant 72 h à 37 °C et 5% d’atmosphère de CO2. La prolifération cellulaire basée sur l’expression de PKH26 a été analysée par cytométrie en flux. Les surnageants IL-2 ont été évalués par test ELISA. Les données représentent la moyenne ± écart type de trois expériences indépendantes. . AgC, argent colloïdal; PHA, phytohémagglutinine; et Con A, concanavaline A.

(a)

(d)

(c)

(d)

(e)

(f)

(d)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figure 5

Prolifération cellulaire de PBMC traitée avec argent colloïdal et mitogènes. PBMC (1 × 106 cellules/ mL) ont été traités avec (a) témoin négatif, (b) témoin, (c) PHA (5 µg/mL), (d) Con A (5 µg/mL), (e) AgC (17,5 ng/mL), (f) AgC (17,5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), ou (g) AgC (17,5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) et incubés pendant 72 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. La prolifération cellulaire a été analysée par fluorescence microscopique. AgC, argent colloïdal; PHA, phytohémagglutinine; et Con A, concanavaline A.

3.3. Effet cytotoxique de l’AgC sur les Lignées de cellules cancéreuses Lymphoïdes et leucémiques

Nos résultats ont confirmé les propriétés antiprolifératives et cytotoxiques de l’AgC sur les lignées de cellules leucémiques (Molt-4 et K562) et lymphomatiques (Ramos et L5178Y) de manière dose-dépendante (1,75 à 17,5 ng / mL) () (Figure 6).

Figure 6

Cell viability of cancer cell lines treated with colloidal silver and mitogens. Les lignées de cellules cancéreuses K562, Molt-4, Ramos et L5178Y (5 × 103 cellules/puits) ont été traitées avec plusieurs doses d’AgC et incubées pendant 5 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. La viabilité cellulaire a été analysée par test MTT. Les données représentent la moyenne ± écart type de trois expériences indépendantes. . AgC, argent colloïdal.

3.4. La détermination des cytokines

Outre le traitement par CaG n’a pas affecté la production () d’IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-17A (0 pg / mL) ou de TNF-α (5,84 pg / mL), par rapport au contrôle non traité. Cependant, le traitement par LPS utilisé comme témoin positif a induit une production élevée de toutes les cytokines évaluées (tableau 1).

3.5. Phénotypage des marqueurs de surface cellulaire

Nos résultats ont démontré que le traitement par CaG n’affectait pas le pourcentage d’expression des populations cellulaires CD3+ (79,7 %), CD3−CD19+ (10,2 %), CD3+CD4+ (52,2 %), CD3+ CD8+ (33,9 %) et CD16+CD56+ (7,6 %), par rapport au témoin () (Tableau 2).

3.6. Peroxynitrites et absorption de déterminations FITC-Dextrane

Le traitement à l’argent colloïdal (99%) n’a pas affecté la viabilité des cellules dendritiques (Figure 7(a)) ni les taux de peroxynitrites évalués (Figure 7(b)) mais a augmenté le pourcentage de phagocytose (Figure 7(c)), par rapport au contrôle ().

(a)

(d)

(c)

(a)
(b)
(c)

Figure 7

Viabilité cellulaire des macrophages humains, phagocytose et production de peroxynitrites. Les macrophages humains (1 × 106 cellules) ont été traités par AgC et incubés pendant 5 h à 37°C et 5% d’atmosphère de CO2. (a) La viabilité cellulaire a été analysée par le test trypan blue. (b) phagocytose des macrophages du FITC-Dextrane évaluée par cytométrie en flux. c) Nitrate/nitrite déterminé par réaction de Griess (kit de dosage colorimétrique nitrate/nitrite); le LPS a été utilisé comme témoin positif. Les données représentent la moyenne ± écart type de trois expériences indépendantes. . AgC, argent colloïdal; FITC-Dextrane, isothiocyanate de fluorescéine -Dextrane; et LPS, lipopolysaccharide.

4. Discussion

On sait que plusieurs agents chimiothérapeutiques utilisés dans le traitement du cancer (cyclophosphamide, vinblastine, vincristine, bléomycine et cisplatine) ont des effets antiprolifératifs et cytotoxiques; mais à faibles doses, ils peuvent stimuler la réponse immunitaire. L’effet sur le système immunitaire de toute substance doit être testé car tout dommage dans ce système pourrait affecter l’homéostasie du corps. Dans la présente étude, l’analyse de l’argent colloïdal suggère la présence d’une population hétérogène de nanoparticules et d’amas formés de sels d’argent, probablement issus d’interactions avec des protéines contenues dans un milieu de culture complet. L’effet d’agrégation des particules d’argent dans les fluides biologiques dû à la présence de protéines et de lipides a été rapporté. De plus, nos résultats ont montré que l’AgC (17,5 ng / mL) peut inhiber la production d’IL-2 induite par les mitogènes. Par conséquent, l’immunosuppression induite dans le PBMC pourrait être médiée par l’inhibition de la libération d’IL-2. L’activité immunosuppressive de certains médicaments tels que la cyclosporine et l’azathioprine a été corroborée par l’inhibition de la prolifération des lymphocytes et de la production de cytokines (INF-γ, IL-2, RANTES, TGF-β et TNF-α), lorsque les lymphocytes sont stimulés par des réactifs tels que PHA, Con A ou pokeweed mitogen. L’IL-2 est un facteur de croissance autocrine pour les cellules T et sa production a été inhibée sélectivement par le traitement avec les immunosuppresseurs tacrolimus (FK506) ou l’acide mycophénolique. Il est connu que les agents immunosuppresseurs (corticostéroïdes) sont utilisés pour le traitement des tumeurs malignes lymphoïdes car ils induisent l’apoptose des cellules lymphoïdes malignes. Nous avons démontré les propriétés antiprolifératives et cytotoxiques de l’AgC (155 nm) (doses allant de 1,75 à 17,5 ng / mL) sur des lignées cellulaires leucémiques et lymphomateuses malgré des rapports précédents qui mentionnaient que les particules d’argent de 10 à 100 nm de diamètre sont plus cytotoxiques que les particules de plus grande taille. Il est nécessaire de connaître le mécanisme de sélectivité entre les PBMC et les cellules cancéreuses d’origine myéloïde et lymphoïde et de futures études devraient être développées dans le domaine de l’apoptose médiée par les récepteurs, telles que discutées par “Vega et De Maio, 2005.”En raison de la résistance aux glucocorticoïdes dans le traitement du lymphome, les cellules tumorales continuent leur expansion en présence de glucocorticoïdes. Pour cette raison, l’AgC pourrait offrir une nouvelle option clinique à envisager, mais d’autres études connexes sont nécessaires. D’autre part, nos résultats indiquent que la production de cytokines et le pourcentage de marqueurs de surface exprimés par les cellules T, B et NK ne sont pas affectés en réponse à l’AgC (17,5 ng / mL), contrairement à d’autres immunosuppresseurs tels que la rapamycine ou le soraphène, pour lesquels l’effet immunosuppresseur est attribué à l’interférence d’une voie de signalisation et au métabolisme des acides gras. De plus, il existe des preuves que les cellules du système immunitaire peuvent être activées en réponse à des biomatériaux, bien que les voies de signalisation induites par le CMH / peptide / TCR ne soient pas attendues. Cependant, d’autres voies non reconnues peuvent conduire à une activation en réticulant des glycoprotéines à la surface de la membrane plasmique, telles que la prolifération des lymphocytes induite par le mitogène. En ce qui concerne les peroxynitrites, l’argent colloïdal (17,5 ng / mL) n’a pas induit leur production, mais l’activité de la phagocytose a augmenté probablement en raison de l’absorption de l’argent colloïdal d’une manière non spécifique. D’autres auteurs ont décrit que les nanoparticules d’argent dans une gamme de 5, 10, 15 et 100 nm augmentent les espèces réactives de l’oxygène affectant la fonction mitochondriale et que la phagocytose des particules d’argent bloque le cycle cellulaire en phase S et stimule la signalisation inflammatoire par la génération d’espèces réactives de l’oxygène, suivie de la sécrétion de TNF-α, ce qui diminue la viabilité des cellules du foie de rat.

En conclusion, la présente étude démontre la non-toxicité de l’argent colloïdal sur les cellules du système immunitaire et sa capacité à interférer avec la réponse immunitaire en diminuant la prolifération cellulaire lorsqu’il est stimulé par des mitogènes, suggérant que l’argent colloïdal peut être considéré comme un agent immunosuppresseur, mais d’autres études doivent être effectuées pour établir son efficacité et son mécanisme d’action.

Intérêts concurrents

Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts concernant la publication de cet article.

Remerciements

Cette étude est soutenue par le Laboratoire d’Immunologie et de Virologie, Faculté des Sciences Biologiques, Université Autonome de Nuevo Leon, San Nicolás de los Garza, NL, Mexique, en collaboration avec “Red Temática de Inmunología en Cáncer y Enfermedades Infecciosas” avec le numéro de registre 253053, CONACYT.