Activités de piégeage des radicaux libres de Cnidium officinale Makino et Ligusticum chuanxiong Hort. extraits méthanoliques | Jiotower

RÉSULTATS ET DISCUSSION

Plusieurs événements pathologiques, tels que le processus d’inflammation, la maladie coronarienne et les phénomènes de vieillissement, sont associés à la génération de ROS. Ainsi, dans cette étude, nous avons démontré que les extraits de C. officinale et de L. chuanxiong possèdent également des propriétés antioxydantes, car ils ont pu protéger les cellules des dommages oxydatifs et inhiber également la génération de ROS.

Pour le dosage du TEAC, le tableau 1 montre la capacité antiradicalaire de C. officinale et de L. chuanxiong dans un système aqueux, mesurée par dosage des radicaux ABTS. Le test ABTS a été utilisé pour mesurer l’activité antioxydante totale dans les matières végétales. Tel qu’utilisé par Rice-Evans et Miller, le TEAC reflète la capacité relative des antioxydants donnant de l’hydrogène ou des électrons à piéger le cation radicalaire ABTS par rapport à celui du Trolox. Dans cette étude, C. officinale et L. chuanxiong dans la gamme de 0-150 µg / ml a montré une activité antiradicalaire, et l’activité antiradicalaire de ces échantillons a augmenté avec l’augmentation de la concentration des extraits, indiquant que C. officinale et L. chuanxiong ont montré une activité antiradicalaire des radicaux libres. Comme on peut le voir dans le tableau 1, la capacité de piégeage de C. officinale et de L. chuanxiong sur le cation radicalaire ABTS a été comparée à celle de l’acide ascorbique. De plus, C. officinale a montré un effet charognard marqué sur les radicaux cationiques ABTS par rapport à celui de l’acide ascorbique standard, déterminé par TEAC.

De plus, le tableau 1 montre l’ORAC des échantillons. La protéine hautement fluorescente, la bêta-phycoérythrine (PE), dérivée de nombreuses espèces d’algues rouges, a été utilisée comme cible des dommages causés par les radicaux libres. Les radicaux peroxyles générés par la décomposition thermique de l’AAPH éteignent la fluorescence de la phycoérythrine, tandis que l’ajout d’un antioxydant qui réagit rapidement avec les radicaux peroxyles inhibe la perte d’intensité de fluorescence et cette inhibition est proportionnelle à l’activité antioxydante. Les résultats finaux peuvent être calculés en utilisant les différences d’aires sous les courbes de désintégration de la phycoérythrine entre l’ébauche et un échantillon et sont exprimés en équivalents Trolox. Dans cette étude, les résultats ont montré que C. officinale et L. chuanxiong présentent une capacité antioxydante avec un profil similaire. De plus, le test ORAC a démontré une nette amélioration de la teneur en antioxydants de l’extrait de C. officinale par rapport à l’acide ascorbique, en standard.

Le modèle de radical stable DPPH est une méthode largement utilisée et relativement rapide pour l’évaluation de l’activité de piégeage des radicaux libres. On pense que l’effet des antioxydants végétaux sur le piégeage des radicaux DPPH est dû à leur capacité à donner de l’hydrogène. La diminution de l’absorbance du radical DPPH provoquée par les antioxydants en raison de la réaction entre les molécules antioxydantes et le radical, progresse, ce qui entraîne le piégeage du radical par don d’hydrogène. Le tableau 1 illustre une diminution significative de la concentration en radicaux DPPH due à la capacité de piégeage des extraits et étalon de C. officinale et de L. chuanxiong. L’activité de piégeage des radicaux libres augmentait également avec l’augmentation de la concentration. Ces résultats indiquent que les deux extraits ont un effet notable sur le piégeage des radicaux libres. L’extrait méthanol de L. chuanxiong a montré une activité de piégeage de la DPPH plus forte que l’extrait de méthanol de C. officinale par rapport à la norme. Nous avons utilisé de l’acide ascorbique en standard.

De plus, la capacité de piéger des radicaux spécifiques peut être ciblée. Étant donné que les différents ROS ont des mécanismes de réaction différents, pour déterminer complètement l’activité antioxydante contre une large gamme de ROS, un ensemble plus complet de tests doit être effectué. Le radical anion superoxyde (O2 ·–) est un facteur important dans les systèmes biologiques. Afin de déterminer si l’inhibition de la réduction du NBT était due à une activité de piégeur de superoxyde, un système non enzymatique de génération de superoxyde a été utilisé. Dans le système PMS-NADH-NBT, l’anion superoxyde, dérivé de l’oxygène dissous issu de la réaction de couplage du PMS-NADH, réduit le NBT. La diminution de l’absorbance à 560 nm avec les antioxydants indique la consommation d’anion superoxyde dans le mélange réactionnel. Le tableau 2 montre le pourcentage d’inhibition de la génération de radicaux superoxyde par 0-150 µg /ml d’extraits de méthanol de C. officinale et de L. chuanxiong par rapport à celui montré par l’acide ascorbique. C. les extraits de méthanol d’officinale et de L. chuanxiong ont montré une inhibition dose-dépendante des radicaux superoxydes. Les extraits de C. officinale et de L. chuanxiong ont tous deux une forte activité de piégeage des radicaux superoxydes (CI50 = 96,30 et 93,85 µg/ml). Compte tenu des résultats obtenus, on peut s’attendre à ce que les extraits méthanol de C. officinale et de L. chuanxiong présentent une activité antioxydante, démontrée ici par le piégeage du radical superoxyde. Les valeurs d’IC50 de tous ces extraits étaient supérieures à celles de l’acide ascorbique dans lequel l’IC50 était atteinte à une concentration de 8,76 µg.

Le piégeage de H2O2 par les deux extraits peut être attribué à leurs composés phénoliques, qui peuvent donner des électrons à H2O2, le neutralisant ainsi en eau. Les capacités de piégeage du H2O2 entre les deux extraits peuvent être attribuées à leurs capacités de don d’électrons. La capacité des deux extraits à piéger efficacement H2O2 est affichée dans le tableau 2, dans lequel elle est comparée à celle de l’acide ascorbique en standard. Les extraits étaient capables de piéger H2O2 de manière dépendante de la concentration. C. officinale et L. les extraits de chuanxiong (0-150 µg / ml) présentaient une CI50 de 136,28 et 136,32 µg / ml, respectivement, tandis que l’acide ascorbique présentait une CI50 de 8,05 µg/ml. La corrélation entre les valeurs de C. officinale et de L. chuanxiong était statistiquement non significative. Bien que H2O2 lui-même ne soit pas très réactif, il peut parfois provoquer une cytotoxicité en provoquant des radicaux hydroxyles dans la cellule. Ainsi, l’élimination du H2O2 est très importante dans tous les systèmes alimentaires.

Le C. officinale et L. les extraits de méthanol de chuanxiong ont également été évalués pour leur capacité à piéger les radicaux hydroxyles à l’aide du test de dégradation du désoxyribose. Dans cette étude, les résultats ont montré que tous les échantillons étaient capables d’inhiber la dégradation du désoxyribose (0-150 µg / ml), avec un profil similaire. Les études biochimiques ont révélé que C. officinale et L. chuanxiong provoquaient une inhibition de la dégradation du désoxyribose dépendante de la concentration. Au niveau de la CI50, C. officinale (119,44 µg/ml) et L. chuanxiong (113,11 µg/ml) présentaient la même puissance. Les capacités radicalaires totales OH de chaque extrait ont été comparées à celles de l’acide ascorbique.

Des extraits de plantes ont été mesurés et comparés pour leurs activités de piégeage des radicaux libres par rapport aux radicaux d’oxyde nitrique. L’activité de piégeage du NO· des extraits de méthanol de C. officinale et de L. chuanxiong a été examinée en utilisant le SNP comme donneur de NO·. Le NO libéré par le SNP réagit avec l’oxygène pour produire du nitrite. Aucun charognard n’entre en compétition avec l’oxygène pour réagir avec le NO · libéré de la solution de SNP dans le PBS. Dans cette étude, des extraits de C. officinale et L. chuanxiong n’a montré AUCUNE capacité de piégeage, bien que certaines différences aient été notées. L’absence d’activité de piégeage de C. officinale était plus importante que celle de L. chuanxiong. Cette inhibition peut également résulter d’un balayage direct du NO· par des extraits. C. officinale avait la plus grande activité pour éteindre AUCUN radical. Les valeurs de la CI50 étaient respectivement de 57,25 et 76,50 µg/ml pour C. officinale et L. chuanxiong.

La chélation des ions ferreux par les extraits de C. officinale et de L. chuanxiong a été estimée, dans laquelle la ferrozine forme quantitativement des complexes avec Fe2+. En présence d’agents chélateurs, la formation de ce complexe est perturbée, ce qui empêche également la formation de la couleur rouge conférée par le complexe. La mesure de ce changement de couleur permet donc d’estimer l’activité chélatante du chélateur coexistant. Dans ce test, les extraits et le composé antioxydant standard ont interféré avec la formation du complexe ferreux–ferrozine, suggérant qu’ils ont une activité chélatante, capturant l’ion ferreux avant qu’il ne puisse former un complexe avec la ferrozine. Comme le montre le tableau 2, la formation du complexe Fe2+–ferrozine n’est pas complète en présence des extraits de méthanol de C. officinale et de L. chuanxiong, ce qui indique que les deux extraits chélatent le fer. L’absorbance du complexe Fe2+-ferrozine a diminué linéairement de manière dose-dépendante (0-150 µg/ml). La différence entre les extraits de C. officinale et de L. chuanxiong et le témoin était statistiquement significative. Les capacités de chélation des métaux des extraits méthanol de C. officinale et de L. chuanxiong, et de l’acide ascorbique (tous à IC50 µg/ml) étaient de 138,43, 17,45 et 43.24, respectivement, ce qui s’est avéré être une différence significative entre les extraits et les témoins.

Pour déterminer les effets de C. officinale et de L. chuanxiong sur la viabilité cellulaire, les cellules N2a ont été exposées à C. officinale et L. chuanxiong (50-500 µg/ml) pendant une durée d’incubation de 1 h. Sur la figure 1, le test MTT après 1 h d’incubation avec C. officinale n’indique aucune différence significative de viabilité dans les cultures de cellules N2a traitées par rapport au contrôle. Par test MTT après 1 h avec L. chuanxiong, une augmentation significative de la viabilité a été observée chez L. chuanxiong a traité 500 µg / ml de cellules N2a par rapport au contrôle. Comme le montre la figure 2, AUCUNE détermination n’a été effectuée après 1 h d’incubation en présence de C. officinale et de L. chuanxiong (50-500 µg/ml). Le traitement par L. chuanxiong n’a pas diminué la libération de NO de manière significative par rapport au contrôle, mais 500 µg / ml de C. officinale ont diminué de manière significative la libération de NO. De ce résultat, on peut conclure que les extraits méthanoliques de C. officinale et de L. chuanxiong, aux doses utilisées, n’ont aucun effet toxique.

Effect of C. officinale and L. chuanxiong methanolic extracts on cell viability in N2a cells. Les valeurs sont des moyennes ± SD de trois mesures. * P < 0,05 par rapport à la normale non traitée (ANOVA/Tukey)

Effet de C. officinale et L. extraits méthanoliques de chuanxiong sur la libération d’oxyde nitrique dans les cellules N2a. Les valeurs sont des moyennes ± SD de trois mesures. * P < 0,05 par rapport à la normale non traitée. (ANOVA / Tukey)