Effet d'un traitement prolongé par l'Azithromycine, la Clarithromycine ou la Lévofloxacine sur la Chlamydia pneumoniae dans un Modèle d'infection continue | Jiotower
DISCUSSION
Les méthodes actuellement utilisées pour la culture de C. pneumoniae et dans les études de susceptibilité in vitro ne sont pas analogues à l’infection car elle se produit in vivo. Nous avons établi un modèle in vitro d’infection continue de C. pneumoniae avec des cellules HEp-2 qui étaient restées infectées de manière persistante pendant plus de 4 ans sans ajout de chlamydia fraîche ou de cellules hôtes, ajout de cycloheximide ou centrifugation (23). Des études ultrastructurales des cellules infectées en continu ont révélé la présence d’une sous-population d’inclusions anormales, très similaires en apparence aux formes persistantes induites après traitement par interféron gamma (22). Par conséquent, ce modèle peut refléter plus précisément les interactions entre la chlamydia et les cellules hôtes et, par conséquent, être un meilleur modèle pour les études de susceptibilité in vitro de C. pneumoniae.
Les résultats de cette étude ont démontré qu’un traitement prolongé par l’azithromycine, la clarithromycine et la lévofloxacine aux concentrations atteintes dans le liquide de revêtement épithélial réduisait mais n’éliminait pas C. pneumoniae des cellules hôtes infectées en permanence.
Galasso et Manire (7) ont été les premiers chercheurs à utiliser un modèle d’infection continue pour tester l’activité antibiotique. Ils ont utilisé des cellules HeLa infectées en permanence par Chlamydia psittaci pour déterminer l’effet de la pénicilline, de la tétracycline et du chloramphénicol. Ils ont constaté que 500 U de pénicilline / ml supprimaient la croissance de la chlamydia, mais même un traitement prolongé pendant 100 jours n’a pas réussi à éliminer l’organisme. Plus de 14 jours de traitement avec 10 µg de tétracycline / ml ou 21 jours avec 25 et 100 µg de chloramphénicol / ml ont été nécessaires pour supprimer la croissance de la chlamydia à des niveaux indétectables. Dreses-Werringloer et al. (6) ont récemment rapporté des observations similaires sur l’effet de la ciprofloxacine et de l’ofloxacine sur une infection à C. trachomatis établie (2 à 3 jours après l’inoculation). Ils ont constaté que les deux médicaments, à des concentrations supérieures à la concentration bactéricide minimale (0,5 µg de ciprofloxacine / ml, 1,0 et 2,0 µg d’ofloxacine / ml), n’ont pas réussi à éradiquer C. trachomatis des cellules infectées de l’HEp-2 et ont également induit une infection persistante caractérisée par un faible nombre de petites inclusions aberrantes présentes pendant 20 jours de culture. Après l’élimination de la ciprofloxacine du milieu 10 ou 14 jours après l’infection, la chlamydia persistante est revenue à une croissance manifeste.
Les résultats de cette étude soulèvent des questions importantes concernant l’utilisation d’antibiotiques, dont l’azithromycine, pour la prévention secondaire de la morbidité cardiaque (1, 10, 13). Les doses d’azithromycine utilisées sont de 500 ou 600 mg / jour pendant 3 et 6 jours suivis de doses hebdomadaires de 500 à 600 mg pendant des périodes de 3 mois à 1 an. Sur la base des données présentées ici, il semble peu probable que ces schémas posologiques éliminent C. pneumoniae d’un foyer intravasculaire. La dose respiratoire standard de 1.5 g d’azithromycine sur 5 jours n’ont eu qu’une efficacité de 70 et 83% pour éradiquer C. pneumoniae du nasopharynx des adultes et des enfants positifs à la culture, respectivement, atteints de pneumonie acquise dans la communauté (28). Les données sont similaires pour d’autres antibiotiques. Block et coll. (3) a constaté qu’un traitement de 10 jours avec de l’érythromycine ou une suspension de clarithromycine a éradiqué C. pneumoniae du nasopharynx de 86 et 79% des enfants positifs à la culture atteints de pneumonie acquise dans la communauté, respectivement, malgré le fait que la clarithromycine était quatre fois plus active in vitro (15). Les résultats de deux études de traitement de la pneumonie chez l’adulte, qui évaluaient la lévofloxacine et la moxifloxacine, ont révélé des taux d’éradication de 70 à 80% (16, 17). Dessus-Babus et coll. récemment décrit l’induction d’une résistance à l’ofloxacine et à la sparfloxacine dans Chlamydia trachomatis après passage en série de l’organisme à des concentrations subinhibitoires de ces médicaments (5). La résistance aux antibiotiques n’a pas encore été décrite pour C. pneumoniae. Cependant, les micros de trois isolats de C. les pneumonies, obtenues chez deux patients atteints de pneumonie acquise dans la communauté et traités à l’azithromycine, ont été multipliées par quatre après le traitement, bien qu’elles se trouvaient toujours dans la plage considérée comme sensible au médicament (28). Il n’est pas clair s’il s’agissait d’un événement isolé ou suggérant un développement possible de la persistance. De plus, une administration hebdomadaire d’azithromycine peut entraîner une exposition prolongée à des niveaux de médicaments sous-inhibiteurs, entraînant le développement d’une résistance chez d’autres bactéries respiratoires, en particulier Streptococcus pneumoniae (24, 26).
L’existence de la persistance soulève également une question importante distincte pour le traitement des maladies associées à C. pneumoniae. Les formes persistantes ne se reproduisent généralement pas ou ont une activité réduite et peuvent donc ne pas être sensibles aux antibiotiques. Il est fort possible que le taux de 20 à 30% d’échecs microbiologiques dans les études de traitement de C. pneumoniae rapportées (3, 16, 17, 18) et la capacité de C. pneumoniae à survivre au traitement antibiotique dans nos expériences puissent être directement liés à l’état persistant.
C. les pneumonies peuvent stimuler la production de cytokines, de chimiokines et de molécules d’adhésion dans diverses lignées cellulaires endothéliales et épithéliales (8, 9, 20, 25, 27). Ces molécules immunologiquement actives sont capables d’induire et de soutenir un processus inflammatoire pouvant jouer un rôle essentiel dans la pathogenèse de l’athérosclérose (30). Les données préliminaires ont démontré une production plus élevée de certaines cytokines dans le modèle d’infection continue par rapport aux cultures primaires (27). Dans cette étude, C. pneumoniae a stimulé une production significative d’IL-6 et d’IL-8 dans les cellules HEp-2 infectées en continu. Ces cytokines ont été détectées dans des plaques fibreuses suggérant leur implication dans le développement de l’athérosclérose (31).
Il a été démontré que les macrolides et les tétracyclines possèdent des propriétés anti-inflammatoires indépendantes de leur activité antimicrobienne (19, 21, 32). Il a été démontré que l’azithromycine et la clarithromycine à des concentrations de 1, 5 et 10 µg/ml affectent à divers degrés la production d’IL-1α, d’IL-1β, d’IL-6, d’IL-10, de facteur stimulant les colonies de granulocytes-macrophages et de TNF-α par les monocytes humains (21). Plus remarquable encore, l’azithromycine a entraîné une diminution significative de l’IL-1a et du TNF-α chez 100% des individus et le traitement à la clarithromycine a entraîné une diminution significative de l’IL-6 et du TNF-α chez 60 et 86% des individus, respectivement. De même, une réduction des taux de 6-céto-prostaglandine F1a, NO2, TNF-α, IL-1β et IL-6 a été observée chez les macrophages murins traités avec 5 à 80 µM d’azithromycine, de clarithromycine, de roxithromycine et d’érythromycine (19). Bien que dans cette étude, le traitement par les trois antibiotiques ait diminué les niveaux d’IL-6 et d’IL-8 dans les cultures continues, cet effet semblait être principalement secondaire à l’activité antichlamydienne, car les niveaux de cytokines étaient corrélés aux titres de C. pneumoniae.
