Substrats de Luciférine et de Coélentérazine | Base de connaissances sur le Support d’application | Produits et services de laboratoire / PerkinElmer
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Aperçu
PerkinElmer propose deux substrats de luciférase pour l’imagerie bioluminescente in vitro, in vivo et ex vivo: la D-luciférine et la coélentérazine H. La D-luciférine est un substrat pour la luciférase de luciole (telle que la Red-FLuc) et est utilisée en conjonction avec nos lignées cellulaires d’oncologie Bioware Ultra bioluminescentes ou des cellules transfectées avec nos particules lentivirales Red-FLuc et Red-FLuc-GFP de Redrect ™ pour l’imagerie in vitro, in vivo ou ex vivo. La coélentérazine H est un substrat pour la Renilla et la Gaussia luciférase, et peut être utilisée pour l’imagerie in vivo avec des cellules transfectées avec nos particules lentivirales Renluc vertes, ou lorsque l’une de ces luciférases est utilisée comme rapporteuse. Le substrat respectif est nécessaire à la visualisation bioluminescente in vitro, in vivo ou ex vivo.
Après l’établissement de la lignée cellulaire bioluminescente exprimant la luciférase de luciole, la Renilla luciférase ou la Gaussia luciférase chez une souris ou un autre modèle animal de petite taille, le substrat de luciférine ou de coélentérazine est injecté. Le substrat est ensuite utilisé par le rapporteur bioluminescent pour produire de la lumière dans la lignée cellulaire, ce qui permet de visualiser les cellules bioluminescentes dans le modèle de souris (ou autre). Cette luminescence peut être visualisée et mesurée à l’aide d’un imageur 2D ou 3D approprié.
Produits et numéros de catalogue
Produit | Numéro de catalogue | Spécificité du substrat | Quantité | Formule | Traceur fluorescent* |
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Substrat Bioluminescent de D-Luciférine-Sel K+ | 122799 | Substrat de luciférase de luciole | 1g (~200 (30g) souris) | Poudre | N |
Substrat Bioluminescent RediJect D-Luciférine | 770504 | Luciférase luciole substrat | 10 flacons (5 (30g) souris / flacon) | Solution de RediJect | N |
RediJect D – Substrat Ultra Bioluminescent à la Luciférine | 770505 | Substrat luciférase Luciole | 10 flacons (5 (30g) souris / flacon) Solution de RediJect |
Et |
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Substrat Bioluminescent de la Coélentérazine H de RediJect | 760506 | Substrat de Renilla ou de Gaussia luciférase | 10 flacons (5 (30g) souris / flacon) | Solution de RediJect | N |
* Pré-formulé avec un colorant fluorescent à élimination rapide pour valider l’intégrité de votre injection de substrat, donc avec une image fluorescente rapide sur votre système d’imagerie, vous savez immédiatement si une injection a échoué et vous pouvez normaliser vos résultats de bioluminescence
** Les produits RediJect sont fournis dans un format injectable prêt à l’emploi
Protocoles
- Préparation de la luciférine pour des dosages in vitro ou in vivo (peut être utilisé pour le Chat. Aucun. 122796)
- Détermination de la courbe cinétique de la luciférine pour votre modèle
- En utilisant la Coelentérazine H pour l’imagerie in vivo
Faq
Q. Comment puis-je savoir s’il faut utiliser le protocole d’injection de luciférine intrapéritonéale (i.p.) ou le protocole d’injection intraveineuse (i.v.) lors de l’injection de luciférine pour l’imagerie bioluminescente in vivo?
A. La plupart des scientifiques utilisent des injections i.p. Des injections sous-cutanées sont parfois également effectuées. Si le signal est faible, vous pouvez faire une i.v. injection, mais vous aurez besoin d’image dès que vous injectez (ce qui peut être très lourd).
Q. Que se passe-t-il si j’utilisais le numéro de produit 122796, 119222 ou XR-1001 auparavant?
A. Ces produits ont été remplacés par le numéro de produit 122799. Ce sont toutes des formulations de D-luciférine de luciole, de sel de potassium.