補体依存性細胞毒性
治療用抗体編集
抗腫瘍治療用抗体の開発には、CDCをトリガーして標的細胞を殺す能力を含むエフェクター機能のin vitro分析が 古典的なアプローチは、標的細胞および補体（血清）の供給源と抗体をインキュベートすることである。 その後、細胞死は、いくつかのアプローチで決定されます:
- 放射性方法:標的細胞はCDCの試金の前の51Crと分類されます、クロムは細胞の換散の間に解放され、放射能の量は測定されます。
- 生細胞の代謝活性の測定（生細胞染色）：標的細胞を抗体および補体とインキュベートした後、原形質膜透過性色素（例えば、カルセイン-AMまたはレサズリン）を 生きている細胞は流れのcytometryによって検出することができる不浸透性の蛍光プロダクトにそれを新陳代謝させます。 この製品は、代謝的に不活性な死んだ細胞で形成することはできません。
- 放出された細胞内酵素の活性の測定：死細胞放出酵素（例えば、 LDHまたはGAPDH）およびその基質の添加は、色の変化をもたらし、それは通常、吸光度または発光の変化として定量化される。
- 死細胞染色：（蛍光）染料は、損傷した原形質膜を介して死細胞の内部に入ります。 例えば、ヨウ化プロピジウムは死んだ細胞のDNAに結合し、蛍光シグナルはフローサイトメトリーによって測定される。
HLA typing and crossmatch testEdit
CDCアッセイは、臓器または骨髄移植に適したドナー、すなわち組織適合性系HLAの表現型が一致するドナーを見つけるために使用されます。 最初に、hlaのタイピングは患者および提供者のためにHLAの表現型を定めるために行われます。 潜在的に適切なカップルが見つかった場合、患者が移植片拒絶を引き起こす可能性のあるドナー特異的抗HLA抗体を産生することを排除するために、crossmatchテストが行われる。
CDC型のhlaタイピング（言い換えれば血清学的タイピング）は、特徴づけられた同種抗血清またはモノクローナル抗体からの抗HLA抗体のバッチを使用する。 これらの抗体は、患者またはドナーのリンパ球および補体の供給源と一つずつインキュベートされる。 死細胞の量（したがって陽性結果）は、死細胞または生細胞の染色によって測定される。 今日では、CDCタイピングは、PCRを介してHLA分子のヌクレオチド配列を同定することができる分子タイピングに置き換えられています。
CDCアッセイは、通常、クロスマッチテストを実行するために使用されます。 基本的な版は提供者のリンパ球が付いている患者の血清の孵化およびウサギの補足物を加えた後第2孵化を含みます。 死細胞（陽性試験）の存在は、ドナーがこの特定の患者には適していないことを意味する。 最小限のインキュベーション時間の延長、抗ヒトグロブリン（AHG）の追加、補体の追加前の未結合抗体の除去、T細胞およびB細胞サブセットの分離など、テス CDCのcrossmatchのほかに利用できる流れcytometric crossmatchがありますそれはより敏感、補足物の非活動化の抗体を検出できます。
