내분비학

소개

생식 연령의 여성 중 무배란 및 불임의 주요 원인 인 다낭성 난소 증후군은 여성의 5-10%에 영향을 미치는 가장 흔한 내분비 장애입니다.전세계(1). 다낭성 난소 증후군 여성의 지방 분해 촉진 및 후속 이상 지질 혈증은 비만,인슐린 저항성 및 제 2 형 당뇨병을 포함한 대사 이상과 관련이 있습니다. 지배적 인 여포(3,4)의 여포 액의 반영된 변화는 난 모세포의 질과 신진 대사에 직접적인 영향을 줄 수 있습니다. 저 등급 만성 염증은 일반적으로 불임의 병인 발생 메커니즘으로 비난됩니다. 염증성 사이토 카인은 설명 할 수없는 불임을 가진 여성들 사이에서 유의하게 높습니다(5). 프로-염증 요인 특히 이식 단계에서 설명 되지 않는 불 임(6)와 여성 중 체 외 수정(체외 수정)의 높은 실패 율과 관련 된 것으로 나타났습니다. 연구 결과 인터페론 감마(인터루킨-2)및 인터루킨-2(일-2)수준이 상승하고 중요한 내인성 항 염증 매개체 인 변형 성장 인자 베타(7)가 감소한 것으로 나타났습니다 설명 할 수없는 불임을 가진 여성의 혈장에서 이식 창(황체기)동안 비옥 한 대조군에 비해(8). 또한,설명 할 수없는 불임 환자는 비옥 한 여성(5)과 비교하여 혈청 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),종양 괴사 인자 알파(2),

다낭성 난소 증후군으로 고통받는 여성들의 대사 이상에 크롬 보충제의 유익한 효과가 이미보고되었습니다. 파젤리안 등에 의해 수행 된 메타 분석에서. (9),크롬 보충제는 혈청 인슐린 및 유리 테스토스테론을 감소시키고 다낭성 난소 증후군 환자의 체중을 개선했습니다. 우리는 이미 체외 수정(10)에 대한 후보자였던 다낭성 난소 증후군을 가진 불임 여성의 혈당 조절,심장 대사 위험 매개 변수 및 산화 스트레스에 대해 8 주 동안 크롬 보충제를 복용하는 이점을 발표했습니다. 또한,당뇨병 쥐의 크롬 보충은 항 당뇨병 활성을 보여 주었고,이는 퍼 옥시 좀 증식 제 활성화 수용체 감마(파-파-1),인슐린 수용체 기질 1(국세청-1)및 핵 인자 단백질(11)의 조절에 대한 크롬 영향을 통해 설명 될 수있다. 마찬가지로,왕 등. (12)비만 컨트롤 쥐에 비해 크롬으로 보충 그 상당한 개선 했다 그들의 포도 당 처리 속도 인슐린 자극된 국세청-1 및 포스파티딜 이노시톨-3 키나 제 활동 골격 근육에 있는 고도 발견. 다른 동물 실험에서,당뇨병 쥐에 의해 7 주 동안 크롬을 섭취하면 염증 마커가 유의하게 감소했다.

크롬(11,14)의 항 당뇨병 및 지질 저하 효과를 고려할 때,우리는 크롬 보충이 다낭성 난소 증후군이있는 여성과 다른 대사 이상을 앓고있는 체외 수정 후보자에게 유익 할 수 있다고 가정했습니다. 우리의 최선의 지식에 따르면,아무것도 인슐린의 유전자 발현에 크롬 보충의 효과에 대해 발표되지 않았습니다,지질,체외 수정을위한 후보자 다낭성 난소 증후군 불임 여성의 염증 마커. 이 재판 인슐린,지질,및 다낭성 난소 증후군에서 고통 하 고 체외 수정에 대 한 후보 했다 불 임 여성에서 염증 성 마커의 유전자 발현에 크롬 보충의 효과 확인 하기 위해 겨냥 했다.

재료 및 방법

시험 설계 및 참가자의 특성

이 무작위,이중 맹검,위약 대조 시험은이란 웹 사이트에서 임상 시험 등록을 위해 등록되었습니다(http://www.irct.ir:IRCT20170513033941N32). 이전의 체외 수정 병력이없는 체외 수정 후보자 인 18-40 세의 다낭성 난소 증후군이있는 40 명의 불임 여성이 포함되었습니다. 이 연구는 2018 년 2 월에서 5 월 사이이란의 테헤란 탈 레가니 병원에서 수행되었습니다. 로테르담 기준은 다낭성 난소 증후군(15)의 진단을 확인하는 데 사용되었습니다. 갑상선 기능 장애,당뇨병 또는 포도당 내성 장애를 포함한 대사 이상이있는 참가자는 연구에서 제외되었습니다. 이 조사는 헬싱키 선언과 좋은 임상 실습 지침에 따라 수행되었으며,이란 테헤란의 샤 히드 베헤스티 의학 대학(합계)의 연구 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 서면 동의서는 모든 개인이 서명했습니다.1804>

참가자들은 무작위로 개입 그룹으로 배정되어 200 그램/일 크롬 피 콜리 네이트(네이처 메이드,미국 캘리포니아)(엔=20)또는 위약(바리 에센스,카샨,이란)(엔=20)8 주 동안. 크롬 보충제와 플라시보는 모양,외관,냄새 및 포장 측면에서 일치했습니다. 무작위 화는 컴퓨터에서 생성 된 난수를 사용하여 수행되었습니다. 무작위 화 및 할당 과정은 최종 분석이 완료 될 때까지 연구자와 참가자 모두에게 숨겨졌습니다. 재판에 참여하지 않고 무작위 시퀀스를 알지 못하는 다른 사람은 피험자를 번호가 매겨진 정제 병에 할당했습니다. 시험 기간 동안 보충제와 플라시보 준수를 모니터링하여 개인에게 약물 용기를 다시 가져 오도록 요청했습니다. 준수율을 높이기 위해 모든 참가자는 보충제를 복용하기 위해 휴대 전화로 매일 짧은 알림 메시지를 받았습니다. 연구 참여자는 개입의 0,4 및 8 주에식이 기록을 완료했습니다.결과 평가

혈청 고감도 반응성 단백질 수준을 1 차 결과로 간주하고 대사 프로파일을 2 차 결과로 측정했습니다. 탈레하니 병원(이란 테헤란)에서 8 주간의 개입 시작과 끝에 공복 혈액 샘플을 수집했습니다. Hs-CRP 수준 측정을 사용하여 상업적인 엘리사이트 키트(LDN,노도느,Germany)with inter-and intra-assay 분산 계수(Cv)의 보다 낮은 7%입니다. 플라즈마 산화 질소(아니오)수준은<5%의 인트라 분석 이력서와 함께 그리 스 방법(16)을 사용하여 측정 하였다.

림프구 세포의 분리

혈액 샘플을 사용하여 림프구 세포를 추출했습니다. 세포 수 및 생존력 테스트는 트리 판 블루,아르 자형 유전자 및 디 유전자 추출(17)을 사용하여 수행되었습니다.이 연구에서는 혈액 샘플에서 추출 된 혈액 샘플의 양을 측정하기 위해 혈액 샘플의 양을 측정하기 위해 혈액 샘플의 양을 측정했습니다. RNA 의 현탁액을 냉동하였 -20°C 까지 cDNA 파생되었습니다. 각 샘플에서 총 연구소의 추출 후,연구소를 자외선 분광 광도계를 사용 하 여 정량화 했다. 1.7–2.1 의 각 샘플 외경 260/280 비율은 단백질 또는 유전자(17)에 대한 오염을 나타내지 않았다. 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스 역전사효소를 사용하여,격리된 리놀렌산을 역전사하여 리놀렌산 라이브러리. 2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 12 월 15 일,2015 년 글리 세르 알데히드-3-포스페이트 탈수소 효소 프라이머는 가사 유전자로 사용되었습니다. 프라이머는 프라이머 익스프레스 소프트웨어(미국 포스터 시티 응용 바이오 시스템)와 비콘 디자이너 소프트웨어(이란 테헤란 타카 포시 츠)를 사용하여 설계되었습니다. 상대 전사 수준을 사용하여 계산되었습니다.

표본의 크기와 통계적 방법

표본의 크기는 제 1 형(제 1 형)과 제 2 형 오류(제 1 형)를 0.05 와 0 으로 간주하여 확립된 공식을 사용하여 계산하였다.80%의 힘을 제공하는 20. 을 기반으로 이전의 출판 연구(18),의 평균 차이(d)1500.0ng/mL 및 standard deviation(SD)의 1496.1ng/mL hs-CRP 었을 계산하는 데 사용되는 샘플 크기입니다. 각 개입 그룹에서 4 명의 피험자의 가능한 중퇴를 고려할 때,최종 표본 크기는 그룹 당 20 명(16+4)피험자로 결정되었습니다.

콜 모고 로프-스 미르 노프 테스트를 사용하여 데이터의 정상 성을 평가했습니다. 분석을 사용 하 여 수행 했다 치료 의도(이티)접근. 인체 측정 측정 및 인슐린,지질 및 개입 그룹 간의 염증의 유전자 발현의 차이 확인 하기 위해 독립적인 샘플 티 테스트를 적용 했다. 염증 마커에 크롬 보충의 효과 반복 측정 분산 분석 테스트를 사용 하 여 평가 했다. 비율의 차이는 피셔의 정확한 테스트에 의해 평가되었습니다. 피<0.05 통계적으로 유의 한 것으로 간주 되었다. 통계 분석은 사회 과학 버전 18 에 대한 통계 패키지를 사용하여 수행되었습니다.,시카고,일리노이,미국).

결과

개인적인 이유로 인해 각 개입 그룹에서 3 건의 중퇴가보고되었습니다. 따라서 전체 34 명의 참가자가 연구를 완료했습니다(그림 1). 40 명의 참가자(각 그룹에서 20 명)가 최종 데이터 분석에 포함되었습니다. 이 연구의 준수율은 높았고,두 그룹의 개입 중에 90%이상의 정제가 소비되었습니다. 이 연구에서 다낭성 난소 증후군 여성에서 크롬을 섭취 한 후 부작용은보고되지 않았습니다.

인체 측정법은 개입 그룹간에 통계적으로 다르지 않았습니다(표 2). 또한,크롬 보충 후,자궁 내막 두께,검색된 난 모세포의 수,수정 된 난 모세포의 수,수정율,임신율 및 배아 수를 포함한 체외 수정 결과는 보충 된 그룹과 위약 그룹간에 크게 다르지 않았습니다.

매크로 및 마이크로 영양소 섭취의 평균은 또한 치료 전반에 걸쳐 두 개입 그룹간에 크게 다르지 않았습니다(데이터는 표시되지 않음).

크롬 보충제는 또한 위약(그림 3)과 비교하여 위약-1(피=0.004)의 유전자 발현을 하향 조절했다. 크롬 보충은 유전자 발현에 유의 한 영향을 미치지 않았다.

토론

우리는 시험관 수정을위한 후보자 다낭성 난소 증후군 불임 여성에서 8 주 동안 크롬 투여의 유익한 효과를 발견했다. 크롬 보충 낮추 및 염증을 개선의 유전자 발현 PPAR-γ,GLUT-1,LDLR,IL-1 지만,그것은 영향을 미치지 않았다의 유전자 발현 IL-8,TNF-α,TGF-β,VEGF. 우리의 최고의 지식을,이 인슐린,지질,관련 유전자 발현에 크롬 보충의 효과 보고 하는 첫 번째 재판 이며 염증 성 마커 불임 여성 다낭성 난소 증후군 및 체외 수정에 대 한 후보로 진단.

크롬이 인슐린 및 지질 대사의 유전자 발현에 미치는 영향

다낭성 난소 증후군 환자는 인슐린 저항성 증가,이상 지질 혈증 및 만성 염증과 같은 다양한 대사 이상에 취약합니다(19,20). 현재 연구는 체외 수정의 후보자였던 다낭성 난소 증후군을 가진 불임 여성에게 8 주 동안 크롬 보충을 한 것으로 나타났습니다. 우리의 연구 결과와 일치,당뇨병 쥐에 크롬 투여는 항 당뇨병 활동을 보여 주었다,아마의 변조에 크롬의 영향과 관련 파르-1 과 국세청-1 단백질(11). 왕 등. (12)는 또한 크롬으로 보충된 뚱뚱한 쥐가 두드러지게 그들의 포도당 처리 비율을 증가했다는 것을 것을을 발견했습니다. 또한,비만 컨트롤에 비해 이러한 쥐 골격근에서 인슐린 자극된 국세청-1 및 포스파티딜이노시톨-3 키나아제 활성의 상승을 보였다. 또 다른 연구에서,크롬,비오틴,또는 이들의 조합은 지방 조직에서 유의하게 상향 조절 된 파르-제 2 형 발현,이는 효과적인 인슐린 감작 영향을 미치고 당뇨병 쥐 모델에서 인슐린 저항성을 감소시킬 수있다(11). 크롬은 또한 과잉 4 인신 매매 및 인슐린 자극 포도당 수송을 촉진 할 수 있습니다(21). 마찬가지로 12 주 동안 크롬을 보충 한 당뇨병 성 망막증이있는 쥐는 과잉 -1,과잉 -3 및 인슐린(22)의 유전자 발현이 개선 된 것으로 나타났습니다. 지방 조직에서 널리 발현되는 인슐린,포도당 및 지질 대사의 중심 조절제입니다. 제 2 형 당뇨병 환자뿐만 아니라 당뇨병 설치류 모델(23)에서 인슐린 감수성 및 지질 프로파일을 향상시킬 수 있습니다. 현재의 증거는 저혈당 영향과는 독립적 인 메커니즘을 통해 신장 피질 지질 및 단백뇨를 감소시키는 데 도움이 될 수 있음을 시사한다(24,25).크롬이 염증 표지자의 유전자 발현에 미치는 영향

우리의 연구는 8 주 동안 크롬을 투여하는 것이 체외수정 후보자였던 다낭성 난소 증후군이 있는 불임 여성에서 일-1 및 혈청 간질환의 유전자 발현을 유의하게 감소시켰다는 것을 뒷받침했다. 염증 마커 및 그들의 순환 수준의 유전자 발현에 크롬 보충의 효과 보여주는 현재 증거는 부족 하 고 주로 동물 연구에 제한. 8 주 동안 주커 당뇨병 지방 쥐에 대한 크롬 보충은 혈청 혈당치 수치를 유의하게 감소시켰다(26). 다른 연구에서,7 주 동안 나이아신산 크롬을 섭취하면 당뇨병 쥐의 프로 염증성 사이토 카인 수준,산화 스트레스 및 지질 농도가 감소했다(13). 또한,크롬 피 콜리 네이트,포스파티딜 세린,도코 사 헥사 엔 산 및 붕소를 함유 한 영양 보충제를 12 주 동안 투여하면 고지방식이 요법을 먹인 쥐의 농도가 유의하게 감소했다(27). 다른 연구 설계,사용 된 크롬의 유형 및 투여 량,개입 기간 및 참가자의 특성을 적용하여 설명 할 수 있습니다. 크롬의 높은 투여 량은 크게 대사 프로파일을 향상시킬 수있다. 염증 및 산화 스트레스의 마커는 많은 당뇨병 환자에서 상승하여 혈관 염증을 긍정적으로 나타냅니다(28). 인슐린 저항성 및 후속 혈관 염증은 중추 신경계 질환 발병의 주요 위험 요소입니다(29). 프로 염증 성 마커에 크롬의 억제 효과 산화 스트레스 경로 비활성화 하 고 간(30)에서 인슐린 저항 캐스케이드와 관련 된 인산화의 감소에 의해 촉진 될 수 있습니다. 현재의 증거는 증가 된 염증성 사이토 카인이 체외 수정의 결과에 관여한다는 것을 보여주었습니다. 하이 모비치 등에 의해 실시 된 연구에서. (31),태아를 출산 한 여성은 일리노이-6 수준이 낮았다. 일-1 의 존재하에 프로게스테론을 생산하는 황체 세포의 억제는 이식 실패로 이어지는 요인 중 하나 일 수있다(32). 따라서 난 모세포와 배아의 품질에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다(33). 레빈 등이 실시한 또 다른 연구에서. (34),체외 수정 자극 하는 동안 높은 당뇨 수준 개념의 실패와 관련 된 크게 했다. 위에서 언급 한 출판 된 증거에 따르면 우리는 체외 수정의 결과가 염증 감소에 의해 영향을받을 수 있다고 가정했습니다. 최근 연구에 따르면,정맥 내 면역 글로불린 억제제 및 정맥 내 면역 글로불린을 사용하면 체외 수정의 결과가 크게 개선되었습니다.; 높은 수준의 티 헬퍼 1/티 헬퍼 2 사이토 카인을 가진 젊은 불임 여성의 이식,임상 임신 및 출생률(35).

이 연구에는 몇 가지 제한이있었습니다. 부적절한 자금 조달로 인해 우리는 크롬 수준을 측정 할 수 없었고 산화 스트레스의 유전자 발현에 대한 크롬의 영향을 평가할 수 없었습니다.

전반적으로,우리의 연구는 체외 수정을위한 후보자 다낭성 난소 증후군과 불임 여성의 유전자 발현을 개선하여 염증 마커를 낮추는 크롬 보충의 장점을 시사한다.

저자 공헌

자 원고의 개념,설계 및 통계 분석에 도움. MA,SZ,NM,EA,그리고 SS 에 기여 데이터 수집 및 원고 제공됩니다. 자 연구를 감독.

자금

이 연구는 연구 부총장,의료 과학의 샤 히드 베헤시 대학,테헤란,이란의 보조금에 의해 지원되었다.

이해 상충 성명

저자는 연구가 잠재적 인 이해 상충으로 해석 될 수있는 상업적 또는 재정적 관계가없는 상태에서 수행되었다고 선언합니다.