보체 의존성 세포 독성
치료 항체편집
항 종양 치료 항체의 개발은 질병 통제 예방 센터를 유발하여 표적 세포를 사멸시키는 능력을 포함하는 이펙터 기능의 시험관 내 분석을 포함한다. 고전적인 접근법은 표적 세포와 보체(혈청)의 공급원으로 항체를 배양하는 것입니다. 그런 다음 세포 사멸은 여러 가지 접근 방식으로 결정됩니다:
- 방사성 방법:표적 세포는 질병 통제 예방 센터 분석실험 전에 51 크롬으로 레테르를 붙이고,크롬은 세포 용해 도중 풀어 놓이고 방사능 양은 측정됩니다.
- 살아있는 세포의 대사 활성 측정(살아있는 세포 염색):항체 및 보체로 표적 세포를 배양 한 후 원형질막 투과성 염료를 첨가합니다(예:칼세인-암 또는 레사 주린). 살아있는 세포는 유세포 계측법에 의해 검출 될 수있는 불 침투성 형광 제품으로 대사. 이 제품은 대사 적으로 비활성 인 죽은 세포에서 형성 될 수 없습니다.
- 방출된 세포내 효소의 활성의 측정:죽은 세포는 효소를 방출한다(예를 들면. 이는 일반적으로 흡광도 또는 발광도의 변화로 정량화됩니다.
- 죽은 세포 염색:(형광)염료가 손상된 원형질막을 통해 죽은 세포 안으로 들어갑니다. 예를 들어 요오드화 프로피듐은 죽은 세포의 유전자에 결합하고 형광 신호는 유세포 계측법에 의해 측정됩니다. 장기 또는 골수 이식에 적합한 기증자,즉 조직 적합성 시스템의 일치하는 표현형을 가진 기증자를 찾는 데 사용됩니다. 먼저,훌라 타이핑은 환자 및 기증자가 자신의 훌라 표현형을 결정하기 위해 수행됩니다. 잠재적으로 적합한 커플이 발견되면 환자가 기증자 특이 적 항 힐라 항체를 생성한다는 것을 배제하기 위해 교차 일치 검사가 수행되어 이식 거부 반응을 일으킬 수 있습니다.
질병 통제 예방 센터의 형태(다른 단어 혈청 학적 타이핑)은 특성화 된 동종 항혈청 또는 단일 클론 항체로부터 항-항혈청 항체의 배치를 사용한다. 이 항체는 환자 또는 기증자의 림프구 및 보체 공급원과 함께 하나씩 배양됩니다. 죽은 세포의 양(따라서 긍정적 인 결과)은 죽은 세포 또는 살아있는 세포 염색으로 측정됩니다. 현재 질병 통제 예방 센터 타이핑은 분자 타이핑에 의해 대체되고 있습니다.
질병 통제 예방 센터 분석은 일반적으로 크로스 매치 테스트를 수행하는 데 사용됩니다. 기본 버전은 토끼 보체를 추가 한 후 기증자의 림프구와 두 번째 배양 환자의 혈청의 인큐베이션을 포함한다. 죽은 세포의 존재(양성 검사)는 기증자가이 특정 환자에게 적합하지 않다는 것을 의미합니다. 최소한의 배양 시간 연장,항 인간 글로불린 추가,보체를 추가하기 전에 결합되지 않은 항체 제거,분리 티 세포 과 비 세포 부분 집합. 질병 통제 예방 센터 크로스 매치 외에 유동 세포 측정 크로스 매치 사용할 수 있습니다,즉 더 민감하고 심지어 비 활성화 항체를 보완 감지 할 수 있습니다.