블랙 레그 의심되는 사례에서 샘플

블랙 레그 의심되는 사례에서 근육 샘플에 대해,배양에서 얻은 결과.

생화학 적 식별 방법에 따른 배양은 순수한 배양의 필요성으로 인해 식물상 오염 함량이 높은 샘플에서 복잡하며 감도는 배양액 및 회충 분자에 비해 실질적으로 낮았다. 8 개의 경우에서 배양 및 생화학 적 식별에 의해 차우 보에이를 검출하는 것은 불가능했지만 유기체는 표 2 에 의해 검출되었다. 블랙 레그의 진단을 위해,근육 조직은 혈액보다 근육 조직에서 아마도 더 많기 때문에 부검시 채취됩니다. 단일 혈액 샘플을 잘못 채취했지만 문제는 블랙 레그였습니다.

마찬가지로,블랙 레그 발생에 대한 이전의 연구에서,생화학 분석보다 배양 및 검출이 더 나은 결과를 주었다. 한 사례에서 혈액 한천 플레이트에서 한 근육의 1 차 배양은 다.셉티쿰에 의해 자란 것이지만 다.차우보에이 에 대한 명확한 긍정적 결과를 주었다.

대부분의 임상 사례에서 블랙 레그 양 다. 감염된 조직의 쇼보 에이는 높고 식물을 오염시키는 것과 독립적 인 자궁 경부 세포진 검사법에 의해 쉽게 검출 될 수 있습니다. 또한,이 방법은 적어도 5 일이 걸리는 전통적인 생화학 적 검출 방법보다 훨씬 빠르며,배양에 여분의 시간이 필요할 수있는 균주의 순수한 배양을하는 것이 중요합니다. 식물상 오염을 피하기 위해 근육 조직이 너무 작아서는 안됩니다. 순수 문화 없이 아무 균주 후속 연구 미래에 대 한 수 있습니다.,유일한 방법으로 회로 기판 검출을 사용 하 여 단점입니다.

가축에서 실험적으로 감염된 C.chauvoei,PCR 분석을 실시되었 다진 근육 그리고 다른 기관과 C.chauvoei 에서 감지된 모든 기관 테스트합니다. 블랙 레그 의심되는 사례에서 다진 근육 조각을 직접 테스트했습니다. 이 연구는 혈액 또는 근육 조각의 12%(24 개 중 3 개)만이 회충 분비의 검출 임계 값을 초과 한 반면,육류 주스 샘플의 9%는 검출 임계 값을 초과 한 현재의 연구 결과와 불일치하는 배양 및 생화학 적 식별보다 더 나은 결과를 주었다(표 2). 억제 물질은 아마도 근육 조직에 존재할 것입니다. 간,비장 및 신장에서 효소 반응에 대한 억제제가 확인되었으며 근육 조직에 유사한 억제제가있을 수 있습니다. 무 균 생리 식 염 수 샘플(26%)에 침 용 근육 조각에서 결과 생 화 확 적인 시험의 그 잘 일치 하지 않았다. 근육 조직 또는 기타 유사한 샘플에 대한 직접 회충 분자는 아마도 생화학 적 검사 또는 회충 분자에 의한 배양 단계를 대체하는 데 적합하지 않을 수 있습니다.

면봉

에 의해 수집 된 근육 샘플 분석을 위해 근육 조직을 보낼 필요가 있는지 또는 샘플 수집을 위해 면봉을 사용하기에 충분한 지 여부를 조사하기 위해 우편 서비스를 시뮬레이션했습니다. 조사 된 22 개의 근육 조직 중 64%가 다발성 경화증의 검출 임계 값을 초과했습니다. 우편 서비스 시뮬레이션 후 동일한 샘플의 면봉의 경우 36%에서 47%의 면봉이 검출 임계 값보다 높았습니다(표 3). 면봉 분석에 충분하면 근육 조직 대신 면봉으로 샘플을 채취하는 것이 더 실용적입니다. 그러나 근육 조직을 했다 더 많은 긍정적인 샘플을 보다봉을 때 모두에 의해 분석과 문화 PCR(표 3). 양성 근육 조직의 경우에서 면봉에 차우 보 에이의 발생률은 무작위 것 같았다. 그러나 면봉을 1,3 또는 6 일 동안 보관했는지 여부는 거의 또는 전혀 차이가 없습니다.

바이오가스 플랜트로부터의 샘플

클로스 트리 디움 쇼보 에이 저온 살균 전에 바이오 가스 기질에서 11 개 중 3 개 샘플에서 검출되었지만 저온 살균 또는 소화 후에는 검출 할 수 없었다(표 4). 이러한 종류의 샘플의 박테리아는 두 가지 공급원이 바이오 가스 생산에 사용되기 때문에 분뇨 또는 도살장의 동물 부산물에서 유래 할 수 있습니다. 이 연구에서 채취 한 농장 중 어느 것도 지리적 거리 때문에 바이오 가스 식물에 분뇨를 보내지 않지만 동물은 지역 도살장으로 보내집니다. 블랙 레그의 사례는 또한 바이오 가스 공장의 집수 지역에서보고되었습니다.

바이오가스 처리 후,소화된 잔여물을 비료로 사용한다. 포자 형성 박테리아는 바이오 가스 식물에서 저온 살균 및 소화에서 생존 할 수 있으며 바이오 가스 식물에서 소화 된 잔류 물은 따라서 블랙 레그를 새로운 영역으로 퍼뜨릴 수 있습니다. 그러나,아니 다. 차우보에이는 가공된 제품에서 검출되었기 때문에 아마도 소화조 내의 환경이 차우보에이에게 적합하지 않거나 소화조 내의 식물상이 차우보에이보다 빨리 자라날 수 있습니다. 클로스트리듐 포자는 토양에서 오랜 기간 동안 생존할 수 있으며,이는 소화조에서 차우보에이 에 대한 추가 연구에서 고려되어야 한다.

농장의 샘플

조사한 모든 농장이 최근 몇 년 동안 블랙 레그의 의심되는 사례를보고 했음에도 불구하고 대변,토양 및 사일리지의 모든 샘플은 차우 보이에 대해 음성 테스트를 거쳤습니다. 이에 대한 몇 가지 설명이있을 수 있습니다. 포자는 여전히 물질에 존재할 수 있지만 탐지 수준 아래에 있습니다. 또한,PCR 억제물은 존재할 수 있는 샘플에이고 PCR 방해 할 수 있습니다. 소 배설물에는 휘발성 지방산이 포함되어 있으며 토양 샘플에는 미량의 금속이 포함될 수 있습니다. 그러나,배양 단계는 억제 물질의 영향을 감소시킨다.

이후 차우 보 에이 토양 박테리아 일부 계절적 변화가 발생할 수 있으며,예를 들어 폭우가 포자의 확산에 기여할 수 있으며 토양의 포자 양은 가축이 더 쉽게 접근 할 수 있습니다. 대부분의 샘플링은 날씨가 맑고 따라서 샘플의 포자 농도가 낮을 것으로 예상되는 이른 가을에 수행되었습니다. 샘플의 수는 환경 오염의 탐지를 위해 부족했을 수 있습니다. 그러나 실용적인 이유로 매우 많은 수의 환경 샘플을 현장에서 거의 구할 수 없습니다.

농장에서의 흑다리 의심 사례는 주로 송아지와 암소에서 발생했지만 한 농장은 성인 소에서 발생했다. 11 개의 농장 중 7 개는 샘플링 당시 예방 접종 루틴을 가졌습니다(표 1).

두 농장은 퍼지기 전에 분뇨를 저장했고 다른 농장은 그렇지 않았지만 어느 농장도 분뇨를 목초지에 퍼뜨리지 않았다. 지역 수의사들은 특히 알바레(길이가 거의 40 킬로미터,너비가 10 킬로미터 인 불모의 석회암 평야,얇은 토양과 높은 산도에 따라 특별한 식물상)에서 관목 개간 후 더 많은 블랙 레그 사례를 본 것으로 알려졌다. 알바레는 일반적으로 이웃 농장에 의해 목초지로 사용됩니다. 샘플링의 해에 많은 관목 개간이 이루어지지 않았습니다.

문화적 절차는 비용이 많이 들고 시간이 많이 걸리며 다른 혐기성 세균에 의한 오염은 종종 문제를 일으킨다. 생존 가능한 세포와 생존 할 수없는 세포의 유전자가 증폭됩니다. 생존 가능한 세포 만 검출 될 경우 농축 단계를 적용 할 수 있습니다. 이 연구에서 배양에서 연방 항공국 플레이트 전에 비 생존 가능한 박테리아 및 위양성 인쇄 회로 기판 반응의 검출을 피하기 위해 사용 되었다. 유전자는 순수한 배양에서 증폭하기 쉽지만 오염 된 샘플(예:생물 폐기물의 샘플)에서는 문제가 발생합니다. 부식산,지방 및 단백질을 포함한 수많은 물질에 의해 방해받을 수 있습니다. 그러나,배양 단계는 농축 단계로 사용되었고,따라서 억제 물질의 영향을 감소시킨다. 군집 식물 때문에 연방 항공국 접시에서 정화 할 수 없습니다.이것은 검출 수준이 좋지 않은 것처럼 보일 수 있지만 분뇨,토양 및 바이오 가스 기질과 같은 샘플이 주변 식물상에 의해 심하게 오염된다는 사실로 설명 할 수 있습니다. 사사키는 분명히 깨끗한 샘플에서 10 의 검출 수준을보고했습니다. 그러나,우리의 연구에서 검출 수준이 200 이었기 때문에 이러한 샘플은 낮은 수의 차우 보 에이를 포함 할 것으로 예상 되었기 때문에. 따라서,본 연구에서 사용 된 방법은 실질적으로 적용 할 수 없다.

환경적 측면

전배양 후 환경보호기법의 검출 문턱은 현재 단계에서 동물이 감염되지 않도록 보장하거나 목초지의 상태를 결정하는 데 적합하지 않다. 대신 현재 적용된 권장 사항을 사용해야합니다.이 방법은 예방 접종 루틴의 기초로 사용할 수 없기 때문입니다. 블랙 레그가 풍토병 인 지역에서는 방목하기 전에 연간 예방 접종을 권장합니다.,필요한 비용과 시간에도 불구하고.

이 연구는 차우보에이가 바이오가스 과정을 통과하지 못한다는 것을 보여주었다. 바이오 폐기물에서 차우보에이 수 아마도 감소 소화 방법 및 소화 잔류물 확산의 위험 검출 임계값 이하로 따라서 무시할 수 있습니다. 명확한 결론을 도출하기 전에 바이오 가스 과정을 통한 클로스 트리 디움 생존에 대한 더 많은 연구가 필요합니다. 그러나 비료로서 소화 된 잔류 물의 장점은 아마도 블랙 레그를 퍼뜨릴 위험보다 큽니다.