해부학 및 생리학
본 연구는 동물 집의 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 규칙 및 규제와 함께 수행되었으며 각 실험은 중앙 동물 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 평균 연령 45 일 및 25~35 그램의 무게를 가진 25 마리의 암컷 스위스 알비노 생쥐가 다른 번식 식민지에서 동물 집에서 무작위로 선택되었습니다. 이러한 여성 비 임신 성인 추가 세대의 10 새끼를 조달 하기 위한 목적으로 같은 다양 한 남성 마우스에 의해 의도적으로 교미 했다. 스테인레스 스틸 토핑이있는 플라스틱 폴리 카보네이트 케이지에서 단일 강하고 단단한 이형 접합 수컷은 20-25 도 및 55%습도,12 시간 이후 밝은 주기와 어두운 주기로 지속적으로 유지되는 대기 중에 단일 암컷과 함께 배치되었습니다. 여성 마우스 질 크로스 플러그와 잘 시각화 플러그의 존재에 대 한 검사 했다 확인 된 임신으로 표시 하 고 임신의 날 0 할당. 임신 7,8,9 일에 연결 된 여성 복 부 촉진에 의해 임신에 대 한 검사 했다.연구 구매원으로부터의 은 나노입자의 특성화는 광자 교차 상관 분광학 및 자외선 가시(자외선–비스)분광학,동적 광 산란 및 제타 전위에 의한 세포 배지에서의 응집 및 1 차 크기에 대해 평가되었다. 대표 템 아그네스의 사진을 보여 주었다. 이 경우,이 이미지는 100000000000 의 비율로 분산되어 있습니다.제조사가 명시한 1 차 입자 크기를 확인했습니다. 코팅되지 않은 은 나노 입자는 50~100 나노 미터 범위 내에서 이종 분포를 발견했으며,대부분은 약 71 나노 미터이다.
현탁 분말의 경우,템 이미지는 수성 환경에서 은 나노 입자가 응집되어 큰 응집체를 형성한다는 것을 보여 주었고,그 중 다수는 50 나노 미터보다 크다. 이 결과는 동적 광 산란 방법(제타 사이 저)에서 얻은 유체 역학 크기 분포의 결과와 일치합니다. 콜로이드 성 및 건조 분말 분말 모두에서 원소 실버 만 제시되었다는 분석이 확인되었습니다. 또한,산 소화된 콜로이드 및 현탁 분말 아그네틱스 내의 아그네틱스 이온의 농도는 각각 1908.1 및 447.2 아그네틱스-1 이었다. 또한,금속성 은을 제외한 다른 상들도 샘플에 존재하지 않았다. 그 결과,분말형의 순도는 97.86%였다.반복된 경구 투여를 통해 투여되었고,7 내지 12 임신일로부터 무딘 팁 곡선 샤프트 공급 바늘 및 밴의 도움으로 부착되었다. 가짜 대조 동물은 치료 된 동물 및 치료되지 않은 동물을 대상으로 한 실험에 포함됩니다.
18 번 도 18 에서 심부 에테르/클로로포름 마취하에 복부개복술 후 물기를 뼈의 정상 또는 비정상.13
방법(내장 제거 및 알리자린 염색 기술에 의한 골격 이형학 평가)-:
골격 이형학 연구는 내장 제거 및 알리자린 염색 기술에 의해 수행되었습니다. 각 그룹의 모든 표본(50 마리의 새끼)을 48 시간 동안 알코올(정류 된 정신)의 95%에서 탈수시킨 다음 수돗물을 물기를 제거하고 세척 한 다음 1%코 용액(코 1 그램+100 밀리람베르트. 복부 개복술을 한 후 중요한 장기가 제거됩니다. 표본은 살,힘줄,근육 및 내장이 투명해질 때까지 최소 2~4 일 동안 1%수산화 칼륨 용액에 충분히 담그고 해산시킨 다음 뼈와 연골의 맑은 가시성을 나타냈다. 이 변색 및 폐기물이 될 때 매일 솔루션이 변경되었습니다.
맑은 뼈와 연골 보이는 표본 다음 같은 1%코에서 배치 하 고 다음 6~8 방울 1%알리자린 얼룩 깊은 자줏빛 붉은 색을 추가 했다. 이 솔루션은 부드럽게 시간 당 몇 번 진탕했다. 그런 다음 뼈와 연골에 깊은 자줏빛 붉은 색을 내기 위해 2-3 일 동안 동일한 절차를 계속했습니다. 제거 어떤 넘 염색 및 평활화 샘플,같은 다음 통과 40%,80%(40 미리리터 글리세롤+60 미리리터 증류수,80 미리리터 글리세롤+20 미리리터 증류수)1 2 크리스탈 티몰 추가 장기 보존 마지막으로 유지 100%글리세롤,물 물&강력한 손 렌즈 관찰.
1,2,3,4 및 5 그룹의 25 명의 어머니로부터 총 250 개의 태아를 수집하여 모든 샘플을 골격 이형학 실험에 노출시켰다. 60 명의 태아가 재 흡수가 관찰되었습니다.
통계
골격 기형의 백분율은 각 그룹으로부터 평가되고,이형학에 관여하는 뼈의 수에 의해 평가되었고,최종적으로 용량 의존적 기형 유발 인자에 대해 그룹 간 및 그룹 내에서 백분율을 비교하였다. 이 목적을 위해 사용되는 다중 분산 분석 및 기술 통계(사후 특별 분석)테스트.관찰 및 결과
골격 이형학의 비율은 15 명에서 더 높고 가장 높았다.
그룹 |
그룹당 사용된 임신 쥐의 수 |
아니 골격 이형학을 가진 태아의 |
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새끼 검사 |
영향을받는 강아지 |
다양한 골격 이형학 충족 |
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20 10-15 일. 치료 그룹 |
38(76%) |
요추 부위의 척추 측만증,고정되지 않은 후두골,고정되지 않은 상악골,전두엽,정수리,후두엽,견갑골 및 고관절 뼈,불완전한 연골을 가진 하나의&10 번째,11 번째 및 12 번째 늑골에서 1~5 번째,7 번째 및 8 번째 늑골의 공간 증가,흉골의 2~6 번째 부분의 큰 섬유증,갈라진 발목 관절,갈라진 교향곡 치골,가시 돌기 부재,물결 모양의 갈비뼈,하악 저형성& |
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15 10-15 일. 치료 그룹 |
30(60%) |
척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증,척추 측만증 |
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10 10-15 일. 치료 그룹 |
22(44%) |
요추 및 천골 척추 및 고관절의 부재,연골이없는 갈비뼈의 심한 퇴행,미발달&전두엽,정수리 및 고관절 뼈,척추 측만증,상악 저형성 증,관상 및 시상 봉합의 공개,양측의 미발달하지 않은 사지 뼈 |
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5 10-15 일. 치료 그룹 |
16(32%) |
흉골 막대,흉골 마눔,흉골 갈라진 틈,상악 및 하악 저형성 증,흉골 전두엽 및 정수리 뼈에서 5 번째 흉골 세그먼트가 비 시핑되었습니다. |
표 1 20,15,10,5 의 태아에서 볼 수있는 다양한 골격 이형학
이 경우,치료 기간은 10-15 일이며,치료 기간은 10-15 일입니다.)이 처리 그룹은 거의 대조군 태아(그림 1)로 간주되었다,그래서 골격 이상 매우 최소한의 비율을 관찰 하였다.
그림 1 제어 태아 알리자린 얼룩 등쪽보기(에이)및 측면보기(비).
치료 된 그룹 강아지 중 하나는 흉골 막대에서 시연되지 않은 5 번째 흉골 세그먼트와 흉골 갈라진 틈으로 진단 된 시연되지 않은 매넘버 세그먼트. 다른 태아는 상악 및 하악 저형성 증,고정되지 않은 정면,정수리 및 비강 뼈,엉덩이 뼈의 후부 부분의 융합 실패,태아 중 하나의 왼쪽에서 초보적으로 보이는 10,11 및 12 번째 늑골을 보여주었습니다. 연속 갈비뼈 사이의 공간의 증가와 함께 6~12 늑골의 중간 샤프트의 부재는 다른 그룹의 여러 태아에서 표시되었고 증가 된 웹 공간으로 진단되었으며,신체의 부재&이 치료 된 그룹 태아에서 1%의 경우에 가까운 유형의 신경관 결손으로 진단되는 전체 흉부 척추 분절에서 가시 과정이 보입니다. 이 그룹에서 계산 된 골격 이형학의 비율은 32%였습니다(그림 2).
그림 2 5mg AgNps 처리 그룹 태아 알리자린 얼룩 등 보기(A)및(B),측면 보기(C)복부 전망(D)등 보기(E)
10mg AgNps 처리 그룹아 입증 골격 dysmorphology 의 형태의 부재 허리와 성례의 척추의 부재는 엉덩이뼈,심각하게 변성한 갈비 없이 연골, 정면과 정수리 골 보 unossified 과 미개발,척추 관찰에서의 흉추 및 요추 지역 중 하나에서 태아의 부재의 경추 볼 수있다,상악 hypoplasia,화살 공개 그리고 관상 봉합도 볼 수 있습니다. 미개발 낮은 사지 뼈는 태아 중 하나의 양쪽에 볼 수 있습니다. 이 그룹에서 계산 된 골격 이형학의 비율은 44%였습니다(그림 3).
그림 3 10mg AgNps 처리 그룹 태아 알리자린 얼룩 등 보기(A,B).
12 번째 늑골 부재와 나머지 척추의 부재가 관찰되었다 미개발 된 척추돌기,중족골 갈라진 틈은 태아 중 하나의 발의 등쪽보기에서 볼 수 있으며,세그먼트가없는 복부보기에서 비 시화 고관절 뼈&섬유증도 볼 수 있으며,두개골의 측면보기에서 섬유화 된 것으로 발견 된 비 시화 측두골,무증상 뼈의 근위 세그먼트의 부재,척추 기둥 기형이 관찰되었다.늑골과 10,11 및 12 의 부재가 관찰됩니다 척추 측만증 척추와 무뇌증은 태아 중 하나의 척추 측만증에서 볼 수 있었다,척추 측만증 엉덩이 뼈가 볼 수 있었다,양쪽의 견갑골은 태아 중 하나의 등쪽보기에서 볼 수 있었다,연골의 부재는 태아 중 하나에서 6 번째에서 12 번째 갈비뼈에서 볼 수 있었다. 이 그룹에서 계산 된 골격 이형학의 비율은 60%였습니다(그림 4).
태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기태아기)
20 마그네슘/킬로그램 무증상 치료 그룹 태아는 골격 이형(76%)의 가장 높은 비율을 제시했다. 척추 측만증은 태아 중 하나에서 요추 부위에서 보였고,한 태아는 비 시화 후두골,비 시화 견갑골 및 엉덩이 뼈를 보였으며,큰 섬유증은 상악골,정면 및 정수리 뼈에서 관찰되며,흉골의 두 번째에서 여섯 번째 부분에서도 관찰됩니다.,발목 관절에서 갈라진 틈이 관찰되고,태아 중 하나의 왼쪽의 1~2 늑골과 5~8 늑골 사이에 증가 된 공간이 관찰되며,또한 태아 중 하나의 치골 관절에서 갈라진 틈이 관찰되며,하악 저형성 증,물결 모양의 갈비뼈가있는 가시 과정의 부재도 관찰되며,한 태아에서 우리는 나머지 1 경추와 명확하게 구별되는 2~8 경추의 완전한 융합을 관찰했습니다. 우리는 또한 경미한 척추 측만증과 시프팅되지 않은 후두 및 정수리 뼈와 태아 중 하나의 오른쪽에 견갑골이없는 것을 관찰했으며,저 플라스틱 척추도 보입니다(그림 5).
그림 5 20 밀리그램 아그네프 치료 그룹 태아 알리자린 얼룩 등쪽보기.