Anatomi Og Fysiologi

denne studien ble utført, med regler og forskrifter for pleie og bruk av laboratoriedyr i dyrehuset, og det respektive eksperimentet ble godkjent av Central Animal Ethical Committee. 25 Kvinnelige Sveitsiske albino mus med en gjennomsnittlig alder 45 dager og 25 til 35gm vekt ble valgt tilfeldig Fra Dyrehus, fra forskjellige avlskolonier. Disse kvinnelige ikke gravide voksne ble forsettlig copulated av mannlige mus av samme variasjon med sikte på å skaffe 10 valper av ytterligere generasjon. I plast polykarbonat bur med rustfritt stål pålegg enkelt sterk og stout heterozygot hann ble plassert med enkelt kvinne i en atmosfære kontinuerlig opprettholdt ved 20-25c og 55±5% fuktighet, 12 timer senere lys og mørk syklus. De kvinnelige musene ble undersøkt for vaginal kryssplugg og tilstedeværelse av brønn visualiser plugg ble merket som fastslått graviditet og tildelt dag null av svangerskapet. På dag 7, 8 og 9 av svangerskapet plugget kvinner ble chequed for graviditet ved abdominal palpasjon.

Karakterisering Av AgNps

Sølv nanopartikler fra forskning innkjøp kilder ble evaluert for sin primære størrelse VED TEM og for deres agglomerering i cellemedium ved photon cross correlation spectroscopy (PCCS) og ultrafiolett–synlig (UV-Vis) spektroskopi, Dynamisk Lysspredning Og Zeta potensial. Representative tem bilder Av AgNps ble vist. DE tem bilder AV PVP belagt AgNps spredt og suspendert i 1.5M nacl bekreftet den primære partikkelstørrelsen oppgitt av produsentene. De ubestrøkne sølv nanopartikler funnet heterogen fordeling innenfor området 50 til 100 nm, de fleste av dem er rundt 71nm.

I tilfelle av suspendert pulver AgNps, TEM bilder viste at i et vandig miljø sølv nanopartikler klumper og danner store aggregater, hvorav mange er større enn 50nm. Dette resultatet er i samsvar med resultatene av hydrodynamisk størrelsesfordeling som ble oppnådd fra dynamic light scattering method (zeta sizer). EDX analyser ble bekreftet at bare elementært sølv ble presentert i både kolloidalt Og tørt pulverisert AgNps. IFØLGE ICP-AES-resultatene var konsentrasjonene Av Ag-ioner i de sure fordøyede bestandene av kolloidalt Og suspendert pulver AgNps henholdsvis 1908.1 og 447.2 mgl-1. Også resultater AV xrd mønsteret bekrefter krystalliniteten av pulverformig Type AgNps og tilstedeværelse av elementært krystallinsk sølv, også andre faser, unntatt metallisk sølv, var ikke tilstede i prøven. I TILLEGG VISTE xrf-resultatene at renhet Av pulverisert Type AgNps var 97.86%.

Eksponering Av AgNps kolloidal løsning gjennom gjentatte orale gavages

Gravide mus ble administrert dobbelt med normal saltvann (Sham kontroll) som kjøretøy og i en dose på 5, 10, 15, 20mg/kg b.w. ble gitt gjennom gjentatte orale gavages, fra 7 til 12 svangerskapsdag ved hjelp av en stump spiss buet akselmatingsnål og varebil festet. Sham kontroll dyr er inkludert i forsøk med behandlede dyr og ubehandlede dyr.

Disseksjon og evisceration

PÅ GD 18 ble høyre og venstre horn av livmor av gravid mor eksteriorisert etter ventral laparotomi under dyp eter/kloroformbedøvelse og 250 ferske oppsamlede dammer gjennom disseksjon vasket med vann fra springen på Petriskål for å fjerne blod og fostervann og tørket av filterpapir og dehydrert i 95% alkohol i 48 timer.visualisering av bein enten normal eller unormal.13

Metode (Vurdering av skjelettdysmorfologi ved teknikken for evisceration Og Alizarin-farging) -:

Skjelettdysmorfologi-studien ble utført ved teknikken for evisceration og Alizarin-farging. Alle prøver (50 valper) fra hver gruppe ble dehydrert i 95% alkohol (rektifisert ånd) i 48 timer og deretter fjernet og vasket av rennende vann fra springen og deretter slettet av 1% KOH-løsning(KOH 1GM+100ml d.w.). Etter å ha gjort ventral laparotomi fjernes vitale organer. Prøvene ble dyppet grundig i rikelig med 1% kaliumhydroksid (KOH) løsning i minst 2 til 4days til kjøtt, sene, muskler og innvoller var gjennomsiktig & klar og oppløst etterfulgt av krystallklar synlighet av bein og brusk. Hver dag løsningen ble endret når det blir misfarget og avfall.

den krystallklare bein og brusk synlige prøven ble deretter plassert i samme 1% KOH og deretter ble 6 til 8 dråper 1% Alizarin flekk tilsatt for å farge den dyp lilla rød. Løsningen ble forsiktig ristet et par ganger i timen. Deretter ble samme prosedyre videreført i en annen 2-3dager for å gi dyp lilla rød farge til bein og brusk. For fjerning av overfarging og utjevning av prøvene, blir det samme passert gjennom 40%, 80% (40 ml glyserol+60 ml destillert vann, 80 ml glyserol+20 ml destillert vann) og 1 til 2 krystall tymol tilsatt for langvarig bevaring endelig opprettholdt i 100% glyserol, servert for fotografi & kraftig håndlinsobservasjon.

totalt ble det samlet inn 250 fostre fra 25 mødre fra 1, 2, 3, 4 og 5 grupper, hvorav alle prøvene ble utsatt for skjelettdysmorfologiske eksperimenter. 60 fostre ble observert resorpsjon.

Statistikk

Prosentandel av skjelettmisdannelser ble evaluert fra hver gruppe og vurdert etter antall bein involvert i dysmorfologien, og til slutt ble prosentene sammenlignet mellom gruppen og innen gruppen for doseavhengig teratogenitetsfaktor. Multi ANOVA og Deskriptiv statistikk (post hoc analyse) test brukt til dette formålet.

Observasjon og funn

prosentandelen av skjelettdysmorfologi ble funnet høyere og høyest i 15 mg agnps Og 20 mg AgNps/ kg b.w. behandlede gruppevalp (Tabell 1).

Den Lavere dose AgNps behandlet grupper (0,5 & 1 mg / kg b.w.) ble observert svært minimale prosenter av skjelettavvik, slik at disse behandlede gruppene nesten ble ansett som kontrollgruppefostre (Figur 1).

Figur 1 Kontroll fetus Alizarin flekk dorsal visning (A) og sideriss (B).

En Av 5mg AgNps / kg b.w. behandlet gruppe pup demonstrerte uossifisert 5th sternal segment fra sternal bar og uossifisert Manumbrium segment som er diagnostisert som sternal kløft. Andre fostre viste maksillær og underkjevens hypoplasi, uossifisert frontal, parietal og nasal bein, svikt i fusjon av bakre segment av hoftebenet, 10,11 og 12 ribben sett rudimentær i venstre side av en av fosteret. Fravær av midtaksel på 6 til 12. ribbe sammen med økning av mellomrommet mellom suksessive ribber ble betegnet i flere fostre fra forskjellige grupper og diagnostisert som økt webhotell, Fravær av kropp & spinous prosess ses fra hele thoracale vertebrale segmenter som er diagnostisert som nevralrørsdefekt av nær type i 1% tilfeller fra dette behandlede gruppefostre. Andelen skjelettdysmorfologi beregnet i denne gruppen var 32% (Figur 2).

Figur 2 5 mg AgNps behandlet gruppe fetus Alizarin beis dorsal visning (A) Og (B), sidevisning (C) ventral visning (D) og dorsal visning (E)

De 10mg AgNps behandlet gruppe fostre demonstrert skjelett dysmorfologi i form av fravær av lumbal og sakral vertebra, fravær av hofteben, alvorlig degenerert ribbeina uten brusk, frontal og parietal bein viste unossified og uutviklet, skoliose er observert i thorax og lumbar region i en av fosteret, fravær av halsvirvelen er sett, maksillær hypoplasi, avsløring av sagittal og koronale suturer er også sett. Uutviklede benben i underbenet ses på begge sider av ett av fosteret. Prosentandelen skjelettdysmorfologi beregnet i denne gruppen var 44% (Figur 3).

Figur 3 10 mg AgNps behandlet gruppe fetus Alizarin beis dorsal visning(A, B).

Blant 15mg AgNps behandlet gruppe 8 unger ble observert fravær av halsvirvler med fravær av 12. ribbe og resten av ryggvirvlene ble observert uutviklet spinous prosess, Metatarsal kløft er også sett på dorsal visning av foten av en av fosteret, uossifisert hoftebein på ventral visning med fravær av segment & fibrose er også sett, uossifisert tinningbenet som er funnet fibrosed på sideriss av skallen, fravær av proksimale segment av inominate bein, vertebral kolonne anomali ble sett med rudimentære 6. 9. rib og fravær Av 10., 11. og 12. er observert anencephaly med skoliose ryggvirvler ble sett I L1-L5 i en av fosteret, unossified hoftebenet ble sett, unossified scapulae på begge sider ble sett på dorsal visning av en av fosteret, Fravær av brusk ble sett fra 6. til 12. ribbe i en av fosteret. Prosentandelen skjelettdysmorfologi beregnet i denne gruppen var 60% (Figur 4).

Figur 4 15 mg AgNps behandlet gruppe fetus Alizarin beis dorsal visning (A, B) og ventral visning (C)

20mg / kg b.w. AgNps behandlet gruppe fostre ble presentert høyest prosentandel av skjelettdysmorfologi (76%). Skoliose ble sett i lumbalregionen i ett av fosteret, ett foster viste uossifisert oksepitalbein, uossifisert scapulae og hofteben, stor fibrose er observert i maxilla, frontal og parietal bein, samme er også observert i andre til sjette segment av brystbenet. mellom 1. og 2. ribbe og 5. til 8. ribbe på venstre side av en av fosteret, også kløft er observert i symphisis pubis ledd av en av fosteret, unossified mandibular hypoplasia, fravær av spinous prosess med bølgete ribber er også observert, i ett foster observert vi fullstendig fusjon av 2. til 8. livmorhvirveler som er tydelig differensiert fra resten av 1. livmorhvirveler. Vi har også observert mild skoliose og unossified occipital og parietal bein og fravær av scapulae på høyre side av en av fosteret, hypo plast ryggvirvler er også sett (Figur 5).

Figur 5 20 mg AgNps behandlet gruppe fetus Alizarin flekk dorsal visning.