Cytokeratin 5/6 og cytokeratin 8/18 uttrykk i trippel negativ brystkreft: klinisk betydning I Sør-Asiatiske befolkningen

Metoder

Totalt 150 tilfeller AV TNBC ble valgt fra registreringer av patologi avdeling arkiver. De kirurgiske prøvene inkluderte modifiserte radikale mastektomier, enkle mastektomier og brede lokale excisjoner med sentinel lymfeknudedisseksjon. Alle pasientene gjennomgikk operasjoner På Liaquat National hospital, Karachi fra januar 2008 til desember 2013 over en periode på 6 år. Studien ble godkjent av instituttets forsknings – og etisk gjennomgangsutvalg og informert samtykke ble tatt fra alle pasienter ved operasjonen. Hematoksylin og eosin farget lysbilder og parafin blokker av tilfeller ble hentet og nye seksjoner ble kuttet der det er nødvendig. Lysbilder av alle tilfeller ble gjennomgått av to senior histopatologer og patologiske egenskaper som histologisk type, tumorgrad, T-stadium, N-stadium, lymfovaskulær invasjon, nekrose, fibrose, lymfocytisk infiltrasjon (tumorinfiltrerende lymfocytter), tilstedeværelse av insitu komponent, pagetoid spredning og dermal lymfatisk invasjon ble evaluert. Kliniske journaler for alle pasienter ble også gjennomgått fra institusjonelle journaler for å evaluere pasientens alder, historie med stråling og kjemoterapi og residivstatus. Videre ble representative blokker av hvert tilfelle valgt og er, PR og Her2neu immunhistokjemi ble utført for å bekrefte trippel negativ status.

ER, PR, Her2neu og Ki67 IHC ble utført ved BRUK AV DAKO-antistoffer som under, Med EnVision™ FLEX, HØY pH DAKO kit i henhold til produsentens protokoll.

1. FLEX monoklonal kanin anti-human østrogenreseptor alfa, klon EP1.

2. FLEX monoklonal mus anti-human progesteronreseptor klon PgR 636.

3. Polyklonal kanin anti-human c-erbb-2 onkoprotein.

4. FLEX monoklonal mus anti-human Ki67 antigen klon MIB-1.

Nukleær farging av ER og PR i > 1% av kreftcellene ble ansett som positiv. For her2neu ble saker scoret 1+, 2 + og 3 + i HENHOLD TIL CAP-retningslinjene. For tvetydige tilfeller (2+) ble FISK utført ved Bruk Av Path Vysion Her2neu probe kit i henhold til produsentens protokoller. Resultatene ble uttrykt som forholdet mellom her2neu-signaler sammenlignet MED CEP17-signaler i HENHOLD TIL ASCO / CAP-retningslinjene.

Ki67 immunosteining ble registrert som kontinuerlige variabler basert på andel positive fargete kreftceller. Videre på Grunnlag Av Ki67-indeksen ble tilfeller kategorisert i < 15, 16-24, 25-44 og > 44% ki67-indekskategorier.

CK5 / 6 IHC ble utført VED BRUK AV FLEX Monoklonal Mus Anti-human Cytokeratin 5/6, klon D5/16 B4 VED DAKO envision-metoden i henhold til produsentens protokoll. Intermediær til sterk cytoplasmatisk og membranøs farging i mer enn 10% celler ble ansett som positiv. Svak til mellomliggende farging i < 10% ble tatt som fokal positiv, mens ingen farging ble vurdert som negativ (Tilleggsfil 1: Figur S1).

CK 8/8 IHC ble utført ved bruk av monoklonal mus anti-human Cytokeratin 5/6, klon D5/16 B4, I HENHOLD TIL DAKO envision-metoden. Intermediær til sterk cytoplasmatisk og membranøs farging i mer enn 50% celler ble ansett som positiv. Svak til mellomliggende farging (cytoplasmatisk, med tap av membranreaktivitet) i 10-50% ble tatt som fokal positiv, mens ingen farging eller svak farging i < 10% ble ansett som negativ (Tilleggsfil 1: Figur S1).

Residivstatus og oppfølging ble evaluert ved gjennomgang av sykehusjournal. Total overlevelse ble tatt fra kirurgisk eksisjon til død eller siste oppfølging, og sykdomsfri overlevelse ble definert som tid mellom kirurgisk eksisjon og lokal residiv eller fjernmetastase, død eller siste oppfølging.

Statistisk pakke for samfunnsvitenskap (SPSS 21) ble brukt til datasamling og analyse. Gjennomsnitt og standardavvik ble beregnet for kvantitative variabler. Frekvens og prosentandel ble beregnet for kvalitative variabler. Chi square ble brukt til å bestemme foreningen. Student t test Eller Mann whitney test ble brukt til å sammenligne forskjellen i midler blant grupper. P verdi ≤ 0.05 som signifikant. Overlevelseskurver ble plottet ved Hjelp Av Kaplan-Meier-metoden, og betydningen av forskjellen mellom overlevelseskurver ble bestemt ved hjelp av log-rank ratio. P-verdi ≤ 0.05 ble tatt som signifikant.

Resultater

Gjennomsnittsalder for pasientene involvert i studien var 48,9 år og den vanligste aldersgruppen var 31-50 år. De fleste pasientene presenterte på Stadium T2 med en høy gjennomsnittlig ki67-indeks, dvs. 46,9%. 42,7% av tilfellene hadde nodal metastase. Selv om 84% av tilfellene var av konvensjonelt invasivt duktalt karsinom, VAR NST, men en betydelig andel av tilfellene var av metaplastisk histologi (9,3%). De fleste tilfellene var av høy grad (86,7% GRAD III). De fleste svulster viser lymfocytisk infiltrasjon og nekrose. De fleste svulstene mangler isitu-komponent (61%). Lokal residiv eller sen fjernmetastase ble observert i 17,8% av tilfellene (Tabell 1).

Positiv (> 10%) CK5/6-uttrykk ble observert i 8% (12 tilfeller) AV TNBC mens 2,4% (4 tilfeller) viste fokal positiv (< 10%) og 89,3% (134) var negative MED CK5/6. Fullstendig tap AV CK8 / 18-ekspresjon ble sett hos 4,7% (7 tilfeller), mens 32,7% (49 tilfeller) viste fokaltap AV CK8 / 18 og 62,7% (94 tilfeller) viste intakt normalt ekspresjon AV CK8/18. INGEN signifikant sammenheng MELLOM CK5 / 6 og CK8 / 18 med ulike klinikopatologiske parametere ble observert (Tabell 2 og 3). Tilsvarende ble det ikke observert noen signifikant sammenheng mellom CK 5/6 og CK8/18 med residivstatus hos pasientene (Tilleggsfil 2: Figur S2).

Diskusjon

i denne studien vurderte vi ekspresjon av en basal (CK5/6) og en luminal markør (CK8/18) I TNBC i vår populasjon og fant at; 8 og 2,7% av TNBC viste positivt og fokalt positivt uttrykk for HENHOLDSVIS ck5/6 og 4,7 og 32.7% av TNBC viste fullstendig tap og fokaltap av HENHOLDSVIS CK 8/18-uttrykk. I alle de tilfellene hvor fokaltap CK8/18 ble notert, var det tap av membranreaktivitet mens cytoplasmatisk farging ble beholdt i få celler. Det ble imidlertid ikke observert noen signifikant sammenheng mellom disse unormale ekspresjonsmønstrene av cytokeratiner med ulike klinikopatologiske og prognostiske parametere FOR TNBC i vår populasjon. Brystkreft er en av de vanligste maligniteter I Sørasiatiske befolkningen spesielt i ung alder .

Genuttrykk profilering definerer basal brystkreft som de som viser basale klynger av gener som INKLUDERER EGFR, basal cytokeratin 5/6, C-kit, proliferasjon klynge og lav ekspresjon Av her2neu og hormon reseptor relaterte gener . Men basal brystkreft er ikke en enkelt enhet, og det inkluderer flere subtyper inkludert to basal som subtyper (BL1 OG BL2), mesenchymal, mesenchymal stilk-lignende, immunmodulerende og luminal androgen subtyper . I tillegg til at interferon rik og claudin-lav subtyper er også definert . Subtype av basal brystkreft er ikke anbefalt AV ASCO / CAP. CK 5/6 uttrykk varierer fra 24 til 72% I TNBC som rapportert i tidligere studier . Andre forskere har også foreslått prognostisk betydning AV CK 5/6 i node negative brystkreft . Nielson et al. foreslått AT CK5 / 6 positiv brystkreft har dårligere prognose uavhengig av tumorgrad, T-stadium og hormonell/Her2neu status . Tilsvarende i en annen studie ble det foreslått AT CK5 / 6 er markør for kortere sykdomsfri overlevelse, uavhengig av andre prognostiske faktorer for brystkreft . Inanc et al. rapportert 50.5% ekspresjon AV CK5 / 6 med positiv korrelasjon AV CK5 / 6 TNBC med nodal metastase og tumorstørrelse . I motsetning til disse studiene fant vi imidlertid et lavt UTTRYKK FOR CK5 / 6-uttrykk i TNBC i vår studerte populasjon, noe som kan representere en annen genomisk profil AV TNBC i vår populasjon, som må utforskes i videre studier. Prognostisk rolle AV CK5 / 6 har blitt foreslått i andre kreftformer i kroppen .

CK8 / 18 er et luminalt cytokeratin som hovedsakelig uttrykkes i brystepitel i et membranøst og cytoplasmatisk mønster. Cimpean et al. definert disse forskjellige mønstrene AV CK8 / 18 i brystkreft; diffus cytoplasmatisk, membranøs og kombinert cytoplasmatisk og membranøs .Noen forskere har foreslått at tap AV CK8 / 18 uttrykk/lav CK8/18 er forbundet med dårligere prognose og høy risiko for metastase . Vi fant imidlertid ingen prognostisk betydning av TAP AV CK8 / 18-uttrykk med ulike prognostiske faktorer og tilbakefall i TNBC.

vi fant at 32,7% AV TNBC viser fokaltap av uttrykk CK8/18. I alle disse tilfellene var det tap AV membranøs reaktivitet AV CK8/18 mens cytoplasmatisk farging ble beholdt i få celler. Aiad et al. i en studie med 70 tilfeller av brystkreft funnet unormal uttrykk FOR ck8 / 18 (cytoplasmatisk) i 70% Av Egyptisk brystkreft, som tyder på mye heterogenitet i cytokeratin uttrykk for brystkreft i ulike deler av verden .