Embryoprosjektet Encyclopedia

Golgi-fargeteknikken, også kalt blackreaction etter flekkens farge, ble utviklet på 1870-og 1880-tallet I Italia for å gjøre hjerneceller (nevroner) synlige undermikroskop. Camillo Golgi utviklet teknikken mens han jobbet mednervev, som krevde Golgi å undersøke cellestruktur under mikroskopet.Golgi forbedret eksisterende metoder for farging, slik at forskere kunne se hele nevroner for første gang og endre måten folk diskuterte utviklingen og sammensetningen av hjernens celler. I det tjue-knyttneve århundre fortsatte Golgis flekkmetode å informere forskning på nervesystemet, spesielt med hensyn til embryonisk utvikling.

Golgi begynte å publisere forskning om nervesystemet og dets cellulærstruktur mellom 1870 og 1872, mens han jobbet I laboratoriet Av Giulio Bizzozero Ved Institutt For Generell Patologi Ved Universitetet I Pavia I Pavia, Italia. Etterpå Ble Golgisjeflege ved Pio Luogo degli Incurabili (Sykehus for kronisk Syk) I Abbiategrasso, Italia. Han bygde et laboratorium ikjøkkenet på sykehuset, hvor han utviklet en ny teknikk for å beholde nevrale vev. Fargemetoden av sin tidinvolvert farging av et organisk vev med rød karmin eller blackhematoxylin og utsette det for et reagens, som kaliumdikromateller kromsyre, som herdet de enkelte nevronene. Forskereså isolerte individuelle celler ved å skille dem under et mikroskopmed nåler. Fordi nevroner har en annen form fra andreceller i kroppen, forskere brøt ofte projeksjonene avcelle når de prøvde å skille dem fra. Disse projeksjonene inkluderer web-lignende dendriter som mottar nevrale impulser og videresender dem til cellekroppen, og den lange axonen på den andre siden av cellekroppen som releerer disse impulser.

Golgis tidlige forsøk på å forbedre fargingen involverte infusjon av celler med ulike metaller for å se hele nevroner og andre typer vev i større detalj. Etter å ha eksperimentert med å utsette celler for gull ogkvikksølv, Golgi brukte sølvnitrat. Sølvnitratflekken aktiverte ham for å se nevronene i sin helhet, snu dem svart moten blekgul bakgrunn. Den svarte fargen på de fargede nevronene ledethan for å nevne sin teknikk la reazione nera (blackreaction). Fargeprosessen farget fem til ti prosent av cellsper-prøven, slik At Golgi kan se individuelle cellestrukturer midt i massene av nervesvev.

Mekanismene I Golgi-fargingsteknikken lignet demav hans samtidige. For det første,for å herde det myke nevrale vevet, nedsenkede Golgi prøver i opptil førtifem dager i en 2,5 prosentkaliumdikromatløsning. Deretter fuktet han prøvene i en 0.5til 1 prosent sølvnitratløsning for forskjellige mengder tidå fargestille noen av cellene svart. Golgi dehydrerte deretter prøvenemed alkohol og skiver dem med 100 mikron intervaller, ekvivalentetav tykkelsen på et stykke papir, bred nok til å holde en nevronintakt. Golgi skyllet deretter vevet i terpentin og festet dettil et lysbilde med klart tannkjøtt damar for å bevare det. På det tidspunktet så han på en prøve under et mikroskop.

Golgi publiserte resultatene av sin fargeprosedyre i et 1873-papir med tittelen “Sulla Struttura della Sostanza Grigia del Cervello” (Om Strukturen Av Den Grå Hjernemassen). I Tyskland, Franz Bollpubliserte notater Av Golgis arbeid i tyske tidsskrifter, som spredte Segnyheter Om Golgis arbeid. Golgi fortsatte å bruke sin fargingsteknikk for å undersøke nevrale vev, og senere akkumulert hans funn inSulla Fina Anatomia Degli Organi Centrali del Sistema Nervoso(På Den Fine Anatomien Til De Sentrale Organene I Nervesystemet)publisert i 1885. Det året brukte Eugen Bleuler, en psykiater inSwitzerland, Golgi ‘s fargemetode og presenterte prøver av rabbit’ s hjernebark Til Det Medisinske Samfunnet Av Zü.

På 1880-tallet studerte Albert von Kö, en fysiolog I Sveits, utviklingen av hjernen, nevro-sensoriske veier og indre organutvikling hos pattedyr ved Hjelp Av Golgi-fargingteknikken. Han lærte teknikken Under instruksjon Av Golgii 1887, og han publiserte” Ueber Golgi ‘S Untersuchungen, Den FeinerenBau des Centralen Nervensystems Betreffend” (Om Golgis Studier Om Den Finere Strukturen I Sentralnervesystemet) senere det året. Kö hyllet Golgis fargingsteknikk, noe som førte til at morescientists adopterte Den.

I 1887 endret Santiago Ramó og Cajal i Spania teknikken ved å introdusere sølvnitrat til vevet i to kortere soaks, i stedet for en lang suge. Den endringen forbedret fargen ogdetalj av flekken. Forskere Som Golgi og Ramó y Cajal bruktresultater fra slike fargestudier for å bidra til å utvikle neurondoktrinen, som uttalt at nevroner var individuelle celler som overførte elektriske impulser til og fra hverandre. Den teorienforvandlet teorier om nervesystemets struktur ogfunksjonalitet. Forskere bekreftetteorien ved Å bruke Golgi-fargeteknikken for å vise hullene eller synapsene mellom nevroner. Golgi og Ramó y Cajal delte theNobel-Prisen i Fysiologi eller Medisin til i 1906.

I 1917 tilpasset Pí Del Rí Hortega Golgis metode ved å feste vev med formalin, klorhydrat og kaliumkromat, noe som reduserte tiden som var nødvendig for å fullføre fargingen. I det tjueførste århundre brukte forskere delrí Hortegas metode for å fargestille ikke-neuronale hjerneceller som neurogliaand celler i cerebellum. Etter en lull i popularitet mellomverdenskrigene, Gjenvunnet Golgi-fargingsteknikken popularitet isent 1930-tallet med introduksjonen av elektronmikroskopet.

Forskere brukte Golgis fargingsteknikk for bedre å forklare dannelsen av nevroner, hjernen og sensoriske veier. Golgistaining hjalp også forskere klassifisere organeller i celler, inkludert muskelcelleorganeller som lagrer og transporterer kalsium, kalt sarcoplasmic retikulum, og proteinmodifiserende organeller i celler kalt Golgi-apparatet. Golgi-fargingsteknikken forblir en primær metode for farginginn i det tjueførste århundre.