Grenser I Endokrinologi

Introduksjon

Polycystisk ovariesyndrom (PCOS), den viktigste årsaken til anovulasjon og infertilitet blant kvinner i reproduktiv alder, er den vanligste endokrine lidelsen som påvirker 5-10% av befolkningen.kvinner over hele verden (1). Akselerert lipolyse og påfølgende dyslipidemi hos kvinner MED PCOS er forbundet med metabolske abnormiteter, inkludert fedme, insulinresistens og type 2 diabetes (T2DM) (2). De reflekterte endringene i follikulærvæsken (ff) av dominerende follikkel (3, 4) kan direkte påvirke oocytens kvalitet og metabolisme. Lavverdig kronisk betennelse skyldes ofte som en etiopathogenetisk mekanisme for infertilitet. Inflammatoriske cytokiner er betydelig høyere blant kvinner med uforklarlig infertilitet (5). Proinflammatoriske faktorer har vist seg å være signifikant forbundet med høyere feilfrekvenser av in vitro befruktning (IVF), spesielt i implantasjonstrinnet, blant kvinner med uforklarlig infertilitet (6). Studier har funnet forhøyede nivåer av interferon gamma (IFN-γ) og interleukin-2 (IL-2) og reduserte nivåer av transformerende vekstfaktor beta (TGF-β), en viktig endogen antiinflammatorisk mediator, (7) i plasma hos kvinner med uforklarlig infertilitet sammenlignet med fertile kontroller under implantasjonsvinduet (lutealfasen) (8). Videre har uforklarlige infertile pasienter vist forhøyede nivåer av serum IL-2, IL-4, IL-6, IL-21, tumornekrosefaktor alfa (TNF-α) og IFN-γ sammenlignet med fertile kvinner (5).

de gunstige effektene av kromtilskudd har allerede blitt rapportert om metabolske abnormiteter blant kvinner som lider AV PCOS. I en meta-analyse utført Av Fazelian et al. (9), kromtilskudd reduserte seruminsulin og fritt testosteron og forbedret kroppsvekt hos pasienter med PCOS. Vi har allerede publisert fordeler med å ta kromtilskudd i 8 uker på glykemisk kontroll, kardiometabolske risikoparametere og oksidativt stress hos infertile kvinner MED PCOS som var kandidat TIL IVF (10). Videre viste kromtilskudd hos diabetiske rotter antidiabetiske aktiviteter, noe som kan forklares gjennom krompåvirkning på moduleringen av peroksisomproliferatoraktivert reseptor gamma (PPAR-γ), insulinreseptorsubstrat 1 (IRS-1) og nukleær faktor kB (NF-kB) proteiner (11). Tilsvarende Wang et al. (12) fant at sammenlignet med overvektige kontrollrotter, hadde de supplert med krom signifikant forbedring i deres glukoseavhending og en økning i insulinstimulert p-IRS-1 og fosfatidylinositol-3 kinaseaktivitet i skjelettmuskler. I et annet dyreforsøk reduserte inntak av krom i 7 uker hos diabetiske rotter signifikant inflammatoriske markører, inkludert C-reaktivt protein (CRP), TNF-α og IL-6 (13).

Med Tanke på anti-diabetiske og lipidsenkende effekter av krom (11, 14), antydet vi at kromtilskudd kan være gunstig hos kvinner MED PCOS og kandidat TIL IVF, som lider av forskjellige metabolske abnormiteter. Ifølge vår beste kunnskap har ingenting blitt publisert om effekten av kromtilskudd på genuttrykk av insulin, lipid og inflammatoriske markører hos infertile kvinner med PCOS som var kandidat TIL IVF. Denne studien var rettet mot å bestemme effekten av kromtilskudd på genuttrykk av insulin, lipid og inflammatoriske markører hos infertile kvinner som led AV PCOS og var kandidat TIL IVF.

Materialer Og Metoder

Forsøksdesign Og Deltakernes Egenskaper

denne randomiserte, dobbeltblindede, placebokontrollerte studien ble registrert Av Iransk nettsted for registrering av kliniske studier (http://www.irct.ir:IRCT20170513033941N32). Førti infertile kvinner med PCOS, i alderen 18-40 år, som var kandidat TIL IVF uten TIDLIGERE IVF-historie, ble inkludert. Denne studien ble utført I Taleghani Hospital, Teheran, Iran, mellom februar Og Mai 2018. Rotterdam-kriteriene ble brukt for å bekrefte DIAGNOSEN PCOS (15). Deltakere med metabolske abnormiteter inkludert skjoldbruskdysfunksjon, diabetes eller nedsatt glukosetoleranse ble ekskludert fra studien. Denne undersøkelsen ble utført i samsvar Med Helsinkideklarasjonen og retningslinjene For God Klinisk Praksis, og ble godkjent av forskningsetikkutvalget Ved SHAHID Beheshti University Of Medical Sciences (SUMS), Teheran, Iran. Skriftlig informert samtykke ble signert av alle personer.

Intervensjon

Deltakerne ble tilfeldig fordelt i intervensjonsgrupper for å ta enten 200 µ/dag krompikolinat (Nature Made, California, USA) (n = 20) eller placebo (Barij Essence, Kashan, Iran) (n = 20) i 8 uker. Kromtilskudd og placebo ble matchet med hensyn til form, utseende, lukt og emballasje. Randomisering ble gjort ved hjelp av datagenererte tilfeldige tall. Randomisering og tildelingsprosess ble skjult for både forskere og deltakere til ferdigstillelse av endelige analyser. En annen person, ikke involvert i forsøket og uvitende om tilfeldige sekvenser, tildelte fagene til de nummererte flasker med tabletter. Overholdelse av kosttilskudd og placebo, gjennom hele forsøket, ble overvåket og spurte enkeltpersoner om å bringe medisinbeholderne tilbake. For å øke samsvarsfrekvensen mottok alle deltakerne korte daglige påminnelser på sine mobiltelefoner for å ta kosttilskuddene. Studiedeltakere fullførte diettregistre i uke 0, 4 og 8 av intervensjonen.

Vurdering Av Utfall

Serumnivåer Av C-reaktivt protein med Høy følsomhet (Hs-CRP) ble vurdert som det primære utfallet og metabolske profiler ble målt som sekundære utfall. Fastende blodprøver (15 mL) ble samlet i begynnelsen og slutten av 8-ukers intervensjon Ved Taleghani Sykehus (Teheran, Iran). Hs-CRP-nivåene ble målt ved bruk av commercial ELISA kit (LDN, Nordhorn, Tyskland) med inter-og intra-assay koeffisientavvik (CVs) på lavere enn 7%. Plasmanivåer av nitrogenoksid (NO) ble målt Ved Bruk Av Griess-metoden (16) med Intra-assay CVs på < 5%.

Isolering Av Lymfocyttceller

Blodprøver ble brukt til å trekke ut lymfocyttceller ved bruk av 50% percoll (Sigma-Aldrich, Dorset, STORBRITANNIA). Celletall og levedyktighetstest ble utført ved bruk av trypanblå, RNA OG DNA-ekstraksjon (17).

Rna-Ekstraksjon OG Sanntids PCR (RT-PCR)

RNA ble ekstrahert fra blodprøver ved HJELP AV RNX-plus kit (Cinnacolon, Teheran, Iran). Rna-suspensjon ble frosset ved -20°C til cDNA ble avledet. Etter ekstraksjon av totale Rna fra hver prøve ble RNA kvantifisert VED HJELP AV UV-spektrofotometer. Hver prøve OD 260/280 ratio på 1,7-2,1 representerte ingen kontaminasjon med protein eller DNA (17). Ved hjelp av moloney murine leukemi virus revers transkriptase (RT), ble isolert RNA revers transkribert til cDNA bibliotek. Genuttrykk FOR PPAR-γ, glukosetransportør 1 (GLUT-1), lipoproteinreseptor med lav tetthet (LDLR), IL-1, IL-8, tnf-α, TGF-β og vaskulær endotelvekstfaktor (VEGF) ble utført på mononukleære celler (PBMCER) i perifert blod ved BRUK AV SYBR-grønt deteksjons-Og Amplikonsett og ved bruk AV kvantitativ RT-PCR-OG Lyscyklerteknologi (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Sveits) (Tabell 1). Glyceraldehyd-3-fosfat dehydrogenase (GAPDH) primere ble brukt som et husholdningsgen. Primere ble utviklet ved Hjelp Av Primer Express Programvare (Applied Biosystems, Foster City, USA) og Beacon designer programvare (Takaposizt, Teheran, Iran). Relative transkripsjonsnivåer ble beregnet ved Bruk Av PFFAFI ELLER 2−ΔΔ METODER.

Utvalgsstørrelse Og Statistiske Metoder

Utvalgsstørrelse ble beregnet ved hjelp av den etablerte formelen for Rcter, med type en (α) og type to feil (β) ble ansett som 0,05 og 0.20 for å gi kraften til 80%. Basert på en tidligere publisert studie (18) ble en gjennomsnittlig forskjell (d) på 1500,0 ng/mL og et standardavvik (SD) på 1496,1 ng/mL for HS-CRP brukt til å beregne prøvestørrelse. Med tanke på et sannsynlig frafall av 4 forsøkspersoner i hver intervensjonsgruppe ble den endelige utvalgsstørrelsen bestemt til å være 20 (16 + 4) forsøkspersoner per gruppe.

normalitet av data ble vurdert Ved Hjelp Kolmogorov-Smirnov test. Analyser ble utført ved hjelp av intention-to-treat (itt) tilnærming. Uavhengige prøver t-test ble brukt for å bestemme forskjellene i antropometriske tiltak og genuttrykk av insulin, lipid og betennelse mellom intervensjonsgrupper. Effekten av kromtilskudd på inflammatoriske markører ble vurdert ved bruk av gjentatte tiltak ANOVA test. Forskjeller i proporsjoner ble evaluert Av Fishers eksakte test. P < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant. Statistiske analyser ble utført ved Hjelp Av Statistikkpakken For Samfunnsvitenskapelig versjon 18 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA).

Resultater

Tre frafall ble rapportert i hver intervensjonsgruppe av personlige årsaker. Så totalt 34 deltakere fullførte studien (Figur 1). Ved HJELP AV itt-tilnærmingen ble alle 40 deltakere (20 i hver gruppe) inkludert i den endelige dataanalysen. Compliance rate i denne studien var høy, med mer enn 90% av tabletter ble konsumert under intervensjonen i begge grupper. Ingen bivirkninger ble rapportert etter inntak av krom hos kvinner MED PCOS i denne studien.

Antropometriske tiltak var ikke statistisk forskjellige mellom intervensjonsgruppene (Tabell 2). VIDERE, ETTER kromtilskudd, VAR IVF-utfall inkludert endometrietykkelse, antall oocytter hentet, antall befruktede oocytter, befruktningsrate, graviditetsrate og antall embryo ikke signifikant forskjellig mellom supplerte og placebogrupper.

gjennomsnittet av makro-og mikronæringsinntak var heller ikke signifikant forskjellig mellom to intervensjonsgrupper gjennom hele behandlingen (Data ikke vist).

Kromtilskudd nedregulerte også genuttrykket AV IL-1 (P = 0,004) i Pbmcer sammenlignet med placebo (Figur 3). Det var ingen signifikant effekt av kromtilskudd på GENUTTRYKK AV IL-8, TNF-α, TGF-β og VEGF hos pasienter med PCOS.

Diskusjon

vi fant gunstige effekter av kromadministrasjon i 8 uker hos infertile kvinner MED PCOS som var kandidat TIL IVF. Kromtilskudd senket inflammasjon og forbedret genuttrykk FOR PPAR-γ, GLUT-1, LDLR og IL-1, selv om det ikke påvirket genuttrykket FOR IL-8, TNF-α, TGF-β og VEGF. Etter vår beste kunnskap er dette den første studien som rapporterer effekten av kromtilskudd på genuttrykk relatert til insulin, lipid og inflammatoriske markører hos infertile kvinner diagnostisert MED PCOS og kandidat FOR IVF.

Effekter Av Krom på Genuttrykk Av Insulin Og Lipidmetabolisme

PASIENTER med PCOS er sårbare for ulike metabolske abnormiteter, som økt insulinresistens, dyslipidemi og kronisk betennelse (19, 20). Den nåværende studien viste at kromtilskudd i 8 uker til infertile kvinner MED PCOS som var kandidat TIL IVF, økte genuttrykket av PPAR-γ, GLUT-1 og LDLR betydelig. I samsvar med våre funn viste kromadministrasjon til diabetiske rotter antidiabetisk aktivitet, sannsynligvis relatert til virkningen av krom på modulering AV PPAR-γ og IRS-1 proteiner (11). Wang et al. (12) fant også at overvektige rotter supplert med krom økte signifikant deres glukoseavhending. Videre, sammenlignet med overvektige kontroller, viste disse rotter en økning i insulinstimulert p-IRS-1 og fosfatidylinositol-3 kinaseaktivitet i skjelettmuskler. I en annen studie oppregulerte krom, biotin eller deres kombinasjon signifikant PPAR-γ uttrykk i fettvev, noe som kan ha en effektiv insulinsensibiliserende effekt og redusere insulinresistens i en diabetisk rottemodell (11). Krom kan også fremme GLUT-4-handel og insulin-stimulert glukosetransport (21). På samme måte viste rotter med diabetisk retinopati som ble supplert med krom i 12 uker forbedring i genuttrykket AV GLUT-1, GLUT-3 og insulin (22). Ppar-γ er den sentrale regulatoren av insulin -, glukose-og lipidmetabolismen, som uttrykkes mye i fettvev. PPAR – γ kan forbedre insulinfølsomheten og lipidprofilen hos pasienter med type 2 diabetes samt i diabetiske gnagermodeller (23). Nåværende bevis tyder på AT PPAR-γ agonister kan være gunstig for å redusere nyrebark lipider og proteinuri gjennom en mekanisme uavhengig av deres hypoglykemiske effekt (24, 25).

Effekter Av Krom På Genuttrykk Av Inflammatoriske Markører

vår studie støttet at kromadministrasjon i 8 uker signifikant reduserte genuttrykk AV IL-1 og serum hs-CRP nivåer hos infertile kvinner MED PCOS som var kandidater FOR IVF, selv om det ikke påvirket genuttrykk AV IL-8, TNF-α, TGF-β og VEGF. Nåværende bevis som viser effekten av kromtilskudd på genuttrykk av inflammatoriske markører og deres sirkulerende nivåer er knappe og for det meste begrenset til dyreforsøk. Kromtilskudd i 8 uker Til zucker diabetisk fett (ZDF) rotter reduserte signifikant DERES serum CRP nivåer (26). I en annen studie reduserte inntak av krom niacinat i 7 uker proinflammatoriske cytokiner (TNF-α, IL-6 og CRP) nivåer, oksidativt stress og lipidkonsentrasjoner hos diabetiske rotter (13). Videre reduserte administrering av et kosttilskudd som inneholdt krompikolinat, fosfatidylserin, dokosaheksaensyre og bor i 12 uker signifikant CRP-og tnf-α konsentrasjoner hos rotter som fikk fettfattig diett (27). Vi fant ingen signifikant effekt av kromtilskudd PÅ IL-8, TNF-α, TGF-β, OG VEGF, som kan forklares ved bruk av forskjellige studiedesign, type og doser brukt krom, intervensjonens varighet og deltakernes egenskaper. Høyere doser av krom kan forbedre de metabolske profilene betydelig, inkludert IL-8, TNF-α, TGF-β og VEGF. Markørene for betennelse og oksidativt stress er forhøyet hos mange diabetespasienter, noe som positivt representerer vaskulær betennelse (28). Insulinresistens og påfølgende vaskulær betennelse er de viktigste risikofaktorene for Å utvikle CVD (29). Den hemmende effekten av krom på proinflammatoriske markører kan lettes ved inaktivering av oksidativt stress og reduksjon Av akt-fosforylering assosiert med insulinresistenskaskaden i leveren (30). Nåværende bevis har vist at økte inflammatoriske cytokiner er involvert i RESULTATENE AV IVF. I en studie utført Av Haimovici et al. (31), kvinnene som fødte sitt foster hadde lavere IL-6 nivåer. Hemming av lutealceller som produserer progesteron i NÆRVÆR AV IL-1Β kan være en av faktorene som fører til svikt i implantasjonen (32). Økt follikulær tnf-α og IL-6 kan forringe mikromiljøet i follikkelen og dermed påvirke kvaliteten på oocytter og embryoer negativt (33). I en annen studie utført Av Levin et al. (34), høyere CRP nivåer, UNDER IVF stimulering, var signifikant forbundet med svikt i unnfangelsen. Ifølge ovennevnte publiserte bevis antok vi at UTFALLET AV IVF kan påvirkes av redusert betennelse. En nylig studie viste at BRUK AV tnf-α hemmer og intravenøst immunglobulin signifikant forbedret RESULTATENE AV IVF, inkludert; implantasjon, klinisk graviditet og levende fødselsrater hos unge infertile kvinner som hadde høye nivåer Av T-hjelper 1 / T-hjelper 2 cytokiner (35).

det var noen begrensninger i denne studien. På grunn av utilstrekkelig finansiering kunne vi ikke måle kromnivåer og kunne ikke vurdere effekten av krom på genuttrykk av oksidativt stress.

Samlet sett foreslår vår studie fordelene med kromtilskudd ved å senke inflammatoriske markører gjennom å forbedre genuttrykk AV PPAR-γ, GLUT-1, LDLR og IL-1IN infertile kvinner med PCOS som var kandidater for IVF.

Forfatterbidrag

ZA hjalp til med oppfattelse, design og statistisk analyse av manuskriptet. MA, SZ, NM, EA og SS bidro med datainnsamling og manuskriptutforming. ZA overvåket studien.

Finansiering

denne studien ble støttet av et stipend fra Visekansler For Forskning, Shahid Beheshti University Of Medical Sciences, Og Teheran, Iran.

Interessekonflikt

forfatterne erklærer at forskningen ble utført i fravær av kommersielle eller økonomiske forhold som kan tolkes som en potensiell interessekonflikt.