In Vitro Evaluering Av Kolloidalt Sølv På Immunfunksjon: Antilymfoproliferativ Aktivitet

Abstrakt

Kolloidalt sølv (AgC) brukes for tiden av mennesker, og Det kan internaliseres gjennom innånding, injeksjon, inntak og hudkontakt. Det er imidlertid begrenset informasjon om immunologisk aktivitet; flere undersøkelser ved bruk av kolloidalt sølv er nødvendig. I denne studien er Effekten Av AgC (17.5 ng/mL) på immunologiske parametere (proliferasjon og immunfenotyping) ved bruk av humane mononukleære celler i perifert blod (PBMC) og makrofager (fagocytose) og cytotoksisitet på leukemi-og lymfomkreftcellelinjer (1,75 til 17,5 ng / mL) ble undersøkt. AgC ble observert å signifikant () redusere interleukin – 2 (IL-2) produksjon og proliferasjon indusert av fytohemagglutinin eller concanavalin A I PBMC uten å påvirke cellens levedyktighet, men med cytotoksisk effekt på kreftceller. Il-2, IL-4, IL-6, IL-10, inf-γ og il-17A cytokiner produksjon OG CD3+, CD3−CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ og CD16+CD56+ pbmc fenotyper ble ikke påvirket Av AgC. Den foreliggende studien viser at kolloidalt sølv er ufarlig og ikke-toksisk for immunsystemceller og dets evne til å forstyrre immunresponsen ved å redusere celleproliferasjon når stimulert med mitogener viste det antilymfoproliferative potensialet For AgC.

1. Innledning

Bioaktivitet av stoffer har blitt screenet for å identifisere egenskaper knyttet til antitumoral eller antiproliferativ virkning . Produkter med denne aktiviteten har blitt brukt i klinisk praksis for behandling av kreft eller sykdommer relatert til betennelse som autoimmunitet. Sølvprodukter har blitt brukt i tusenvis av år for hygiene og som antimikrobielle midler. Siden 1964 har kolloidalt sølv (AgC) blitt registrert som et biocidmateriale i Usa ; I Mexico Brukes AgC ofte som desinfeksjonsmiddel av vann og mat til konsum . Vanligvis er disse produktene en blanding av metalliske nanopartikler med oksidasjonstilstand på null (Ag+0) og sølvsalter Med oksidasjonstilstander Av Ag+1, +2 eller +3 . Det er studier som indikerer at antibakterielle og antitumoregenskaper er avhengige av oksidasjonstilstandene av sølv . Sølv nanopartikler (AgNPs) og sølvioner (Ag+) har forskjellige nivåer av toksisitet på grunn av deres overfladiske ladningsinteraksjoner. Sølvioner er mer giftige fordi de kan samhandle med negative grupper av proteiner, som produserer strukturelle endringer på cellemembranen og cytoplasmatiske proteiner, Mens AgNPs kan samhandle MED DNA, forårsaker skade og strukturell blokkering; noen studier har foreslått at disse nanostrukturer kan produsere økt toksisitet ved lange eksponeringstider på grunn Av Det Faktum At AgNPs i vandige løsninger kan oksidere og frigjøre sølvioner; den vellykkede bruken av kolloidale sølvløsninger kan forklares med denne virkningsmekanismen . Anticanceraktiviteten Til AgC på MCF-7 kreftceller skyldes sannsynligvis indusert apoptose ved å redusere laktatdehydrogenase og øke superoksiddismutaseaktivitetene; i MOTSETNING til PBMC ble laktatdehydrogenaseaktiviteten redusert med AgC, men den korrelerte ikke med celledød . Det er lite vitenskapelig informasjon om immunologiske og kreftparametere hos mennesker om effekten av kolloidalt sølv, som en blanding av nanopartikler og ioner, sammenlignet med sølv nanopartikler forskning. Denne studien ble designet for å utforske de antiproliferative egenskapene til kolloidalt sølv og dets effekt på cellulær immunfenotyping, cytokin produksjon og fagocytose på PBMC.

2. Materialer og Metoder

2.1. Kolloidalt Sølv (AgC)

Grenetinstabilisert kolloidalt sølv ble kjøpt fra MICRODYN (Mé) som en 0,35% lagerløsning. Den ble sterilisert ved filtrering (0,2 µ filter, Millipore, USA) og fortynnet til en konsentrasjon på 10,5 µ/mL med RPMI-1640, supplert med 10% FBS for in vitro-analyser.

2.2. Reagenser

Phytohemagglutinin (brukt ved doser på 5 µ/mL) og concanavalin A (brukt ved doser på 5 µ/mL) ble kjøpt fra Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Doksorubicin (LEMERY s. a. De C. V., M@xico) ble lagret som 3,4 mM stamoppløsning I RPMI 1640 ved romtemperatur og LPS (E. coli 0111: B4, Sigma-Aldrich) ble fremstilt ved 10 ng/mL til behandling av humane mononukleære celler i perifert blod.

2.3. AgC Karakterisering

morfologien av kolloidalt sølv ble undersøkt med feltet utslipp scanning elektronmikroskop (Sem) (Nova NanoSEM200 FEI). Kolloidal oppløsning (50 µ) ble plassert på et karbonbånd og tørket ved romtemperatur. Nanopartikkel størrelse og distribusjonsmålinger ble bestemt ved hjelp av en dynamisk lysspredning (DLS) utført av en nanosizer NS 90 Malvern Instruments (Malvern Instruments, UK); størrelsesfordelinger gitt AV DLS ble rapportert som prosentandel av intensitet, og resultatene ble presentert som middelverdien av minst tre målinger. Resonansplasma målt VED UV-vis ble observert i et område mellom 300 og 600 nm ved Bruk Av NanoDrop Spektrofotometer 2000 (Thermo Fisher Scientific).

2.4. Isolering Av Mononukleære Celler I Perifert Blod (PBMC)

Blod fra friske frivillige mennesker ble oppnådd med hepariniserte sprøyter og plassert i sterile polypropylenrør. PBMC ble videre isolert Med Histopaque 1.077 tetthet gradient sentrifugering ved 400 g i 30 min ved 25°C (Sigma-Aldrich). PBMC ble vasket to ganger med RPMI 1640 medium supplert med 10% føtalt bovint serum (FBS) og 1% antibiotisk-antimykotisk oppløsning (referert som komplett rpmi medium) ved 250 g i 10 min ved 25°C.

2,5. Cellevennlighet

PBMC ble justert til 1 × 106 celler / mL i komplett rpmi-medium, og 17,5 ng / mL kolloidalt sølv ble tilsatt og inkubert i 72 timer ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. Deretter ble supernatanten fjernet ved sentrifugering ved 250 G. Celler ble deretter vasket to ganger med komplett RPMI-medium. Cellens levedyktighet ble bestemt av den kolorimetriske mtt-reduksjonsanalysen, og optiske tettheter som følge av formazanproduksjon ble lest ved 570 nm. Celleviabilitet ble uttrykt som prosentvis levedyktighet sammenlignet med ubehandlet kontroll. Resultatene ble gitt som gjennomsnittlig ± SD for tre uavhengige eksperimenter.

k562 (kronisk myelogen leukemi), MOLT-4 (akutt lymfoblastisk leukemi), Ramos (Burkitts lymfom) og L5178Y (lymfom) kreftcellelinjer ble kjøpt fra American Type Culture Collection (Atcc, Manassas, VA, USA) og vedlikeholdt i komplett rpmi medium. Cellene ble dyrket ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. Kreftcellelinjer (5 × 103 celler/brønn) ble belagt på 96-brønnplater og inkubert i 24 timer ved 37°C i 5% CO2-atmosfære.

etter inkubasjon ble kulturmediet fjernet, og kolloidalt sølv ble tilsatt i konsentrasjoner fra 1,75 til 17,5 ng/mL. Platene ble deretter inkubert i 5 timer ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. Deretter ble supernatanten fjernet og cellene ble vasket to ganger med rpmi 1640 medium. Celleviabilitet ble bestemt ved hjelp av trypanblå ekskluderingsmetode, og cytotoksisitet ble uttrykt som 50% (LD50) og 100% (LD100) celleveksthemming, sammenlignet med ubehandlet kontroll. Resultatene ble gitt som gjennomsnittlig ± SD for tre uavhengige eksperimenter.

2.6. Cytokin-Analyse

Supernatanter Fra AgC-behandlet PBMC ble analysert for cytokin-nivåer. Il-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF-α og IL-17A humane cytokiner ble bestemt ved flowcytometri (Accuri C6, BD Bioscience, CA, USA), ved BRUK AV Cba Th1/Th2/Th17 Cytokinsett BD™ (Bd Bioscience, Bedford, MA, USA), som følger produsentens anvisninger. Cba Flex Set analyse ble utført ved HJELP AV FCAP array v1. 0 programvare (Soft Flow Inc., USA). Proteinverdier ble konvertert til NIBSC / WHO proteinstandarder for videre sammenligninger.

2.7. Proliferasjon og IL-2-Analyse

PBMC ble isolert Ved Histopaque tetthetsgradientsentrifugering, vasket tre ganger med PBS og resuspendert I Fortynningsmiddel C ved 106 celler / mL. Cellesuspensjonen ble deretter fortynnet med samme volum på 2,5 mM PKH26 fargestoff (Sigma, St. Louis, MO)fremstilt I Fortynningsmiddel C, inkubert i 3 min ved romtemperatur, deretter tilsatt til et like volum AV FBS, og inkubert ved romtemperatur i ytterligere 2 min for å stoppe merkingen, ifølge ” Rimaniol et al ., 2003 .”DERETTER ble PBMC justert ved konsentrasjoner på 1 × 106 celler / mL, behandlet med kolloidalt sølv i en konsentrasjon på 17,5 ng / mL, PHA eller Con A, og inkubert i 72 timer ved 37°C Og 5% CO2-atmosfære; den cellulære proliferasjonen ble bestemt av flowcytometri. Mengdene AV IL-2 innhold I supernatanter AV PBMC ble målt Ved Human IL-2 Høy Følsomhet ELISA kit (grense for deteksjon 0,4 pg / mL) og brukes i henhold til produsentens instruksjoner (eBiosciences, Wien, Østerrike).

2.8. Bestemmelse Av Nitritt/Nitrat Produksjon

Nitritt Og nitrater nivåer ble målt ved kolorimetrisk Griess reaksjon ved bruk av nitratreduktase (Nitrat / Nitritt Kolorimetrisk Assay Kit Cayman, USA) i henhold til produsentens instruksjoner. Serumnitritt / nitratnivåer ble uttrykt som nM/200 µ.

2.9. Flowcytometrianalyse av Celleoverflateantigener

PBMC ble justert ved konsentrasjoner på 1 × 106 celler / mL og behandlet med kolloidalt sølv ved konsentrasjon på 17,5 ng / mL, og platene ble inkubert i 72 timer ved 37°C Og 5% CO2-atmosfære. Deretter ble celler samlet ved sentrifugering ved 600 g i 10 minutter og ett sett med antistoffer CD3 + FITC / CD8+, PE / CD45 + og PerCP/CD4 APC eller et annet sett med antistoffer CD3 + FITC / CD16+, CD56 PE / CD45 og PerCP / CD19 APC (BD Multitest IMK Kit) ble tilsatt og inkubert 15 minutter ved romtemperatur i mørket. Erytrocytene ble deretter lysert ved å tilsette 450 µ av 1x BD FACS™ lysing-oppløsning og inkuberte 15 minutter ved romtemperatur i mørket. Prøver var da klare til å bli analysert på cytometeret. Oppkjøpet ble utført På Accuri c6 bd instrument ved HJELP AV bd Multiset programvare med bd Worklist Manager programvare. Automatisert gating ble brukt for enkel analyse av hver delsettpopulasjon.

2.10. FITC-Dekstranopptak

Dendrittiske celler (DCs) ble generert Fra PBMC og fikk lov til å følge 0,22 µ filter-avkortet kulturkolber (TPP, Tyskland). Etter 2 timer ved 37°c ble ikke-adherente celler fjernet, og adherente monocytter ble deretter dyrket i 5 dager i RPMI-1640, supplert med 10% FBS og 800 E/mL rhuGM-CSF (Peprotech, M@xico) og 50 ng/mL IL-4 (Peprotech, Mé). Deretter ble cellene behandlet med kolloidalt sølv i konsentrasjoner på 17,5 ng / mL og inkubert i 72 timer ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. Dcs-endocytose ble evaluert ved å inkubere 1 × 106 celler med 1 mg/mL FITC-Dekstran (BD) i 30 minutter ved 37°C. etter vask ble cellene analysert ved flowcytometri. Kontroller inkluderte rør inkubert MED FITC-Dekstran ved 4°C for å hemme endocytisk prosess og et basalt opptak utført ved 0-tidspunktet. Opptaket ble kvantifisert VED FACS-analyse (10.000 celler per punkt). Levedyktighet ble bestemt av trypanblå ekskluderingsteknikk.

2.11. Statistisk Analyse

resultatene ble evaluert AV ANOVA og median cytokin nivåer mellom behandlingene ble sammenlignet Ved Bruk Av Mann-Whitney test.

3. Resultater

3.1. Kolloidalt Sølv Karakterisering

karakteriseringen av kolloidalt sølv oppløst i vann og cellekulturmedium ble analysert ved dynamisk lysspredning (DLS); kolloidalt sølv oppløst i vann viste en gjennomsnittlig størrelse på 100 nm med en polydispersitetsindeks på 0,2; kolloidalt sølv oppløst i cellekulturmedium viste en gjennomsnittlig størrelse på 155 nm og polydispersitetsindeks på 0,23 (Figur 1(a) og 1(b)). SEM-bildet viste partikler populasjon oppløst i vann med partikkelstørrelse mellom 50 og 190 nm (Figur 1 (c) og 1(d)); kolloidalt sølv oppløst i cellekulturmedium viste en kombinasjon av nanopartikler og noen sølvsalter (Figur 1(e) og 1(f)); den gjennomsnittlige størrelsen oppnådd VED DLS korrelerte imidlertid med histogram av partikler og karakteristisk plasmonresonans (Figur 1(g), 1(h) og 1(i)). Analysen av kolloidalt sølv antyder at denne løsningen har semispherical form og heterogen populasjon, dannet av nanopartikler og klynge dannet av sølvsalter. Når AgC ble karakterisert, fortsatte vi å evaluere de forskjellige biologiske effektene.

Figur 1

Størrelsesfordeling av kolloidalt sølv. (a) DLS av kolloidalt sølv oppløst i vann viste en gjennomsnittlig størrelse på 100 nm med en polydispersitetsindeks på 0,2. (b) dls målinger av kolloidalt sølv oppløst i cellekulturmedium med en gjennomsnittlig størrelse på 155 nm og polydispersitetsindeks på 0,23. (c, d) sem bilde av partikler populasjoner oppløst i vann. (e, f) sem bilde av kolloidalt sølv oppløst i cellekultur medium. (g, h) Histogram av partikler oppløst i vann og kulturmedium, henholdsvis. (I) UV-vis spektra av kolloidalt sølv. J) Sølvsalter dannet i prøver av kolloidalt sølv oppløst i kulturmedium. DLS, dynamisk lysspredning; SEM, scanning elektronmikroskopi; og au, vilkårlige enheter.

3.2. Bestemmelse Av Celleproliferasjon Og IL-2-Produksjon

Først bestemte Vi om den cytotoksiske dosen som tidligere ble brukt i brystkreftceller, påvirker lymfocytter eller makrofagfunksjoner. Resultatene viste at kolloidalt sølvbehandling ikke påvirket signifikant () PBMC-celleproliferasjon og celletall, og behandlingene med mitogener Con A eller PHA økte signifikant () celleproliferasjon og celletall sammenlignet med ubehandlet kontroll; interessant nok reduserte de kombinerte behandlingene Med AgC/Con A eller AgC/PHA signifikant () celleproliferasjon og celletall (Figur 2 og 3) AV PBMC. Lignende resultater ble observert ved flowcytometri og fluorescensmikroskopi ved bruk av fluorescerende fargestoff PKH26 (kontroll (94%), Con A (165%), PHA (156%), AgC (91%), AgC + Con A (80%) Og AgC + PHA (77%)) (Figur 3, 4 og 5). I Tillegg påvirket AgC-behandling IKKE IL-2-produksjonen sammenlignet med kontrollen (15 pg/mL) (), men en økning I IL-2-produksjonen ble funnet når PBMC ble stimulert MED PHA (176 pg/mL) Eller Con A (150 Pg/mL), og behandlinger Med AgC + Con A (15 pg/mL) Eller AgC + PHA (13 pg/mL) reduserte IL-2-produksjonen () (Figur 4).

Figur 2

cell levedyktighet AV PBMC behandlet med kolloidalt sølv og mitogener. PBMC (1 × 106 celler/mL) ble behandlet med Enten En (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) og inkubert i 72 h ved 37°C og 5% CO2 i atmosfæren. Celleviabilitet ble analysert VED MTT-analyse. Dataene representerer det gjennomsnittlige ± standardavviket for tre uavhengige eksperimenter. . AgC, kolloidalt sølv; PHA, phytohemagglutinin; Og Con A, concanavalin A.

Figur 3

Cellular telling AV PBMC behandlet med kolloidalt sølv og mitogener. PBMC (1 × 106 celler/mL) ble behandlet med Enten En (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) og inkubert i 72 h ved 37°C og 5% CO2 i atmosfæren. Celletall ble analysert ved flowcytometri. Dataene representerer det gjennomsnittlige ± standardavviket for tre uavhengige eksperimenter. . AgC, kolloidalt sølv; PHA, phytohemagglutinin; og Con A, concanavalin A.

Figur 4

celleproliferasjon OG IL-2 produksjon AV PBMC behandlet med kolloidalt sølv og mitogener. PBMC (1 × 106 celler/mL) ble behandlet med Enten En (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), eller AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) og inkubert i 72 h ved 37°C og 5% CO2 i atmosfæren. Celleproliferasjon basert på uttrykket AV PKH26 ble analysert ved flowcytometri. IL – 2 supernatantene ble evaluert VED ELISA-test. Dataene representerer det gjennomsnittlige ± standardavviket for tre uavhengige eksperimenter. . AgC, kolloidalt sølv; PHA, phytohemagglutinin; Og Con A, concanavalin A.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figur 5

celleproliferasjon AV PBMC behandlet med kolloidalt sølv og mitogener. PBMC (1 × 106 celler/mL) ble behandlet med (a) negativ kontroll, (b) kontroll, (c) PHA (5 µg/mL), (d) Con A (5 µg/mL), (e) AgC (17.5 ng/mL), (f) AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), eller (g) AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) og inkubert i 72 h ved 37°C og 5% CO2 i atmosfæren. Celleproliferasjon ble analysert ved mikroskopi fluorescens. AgC, kolloidalt sølv; PHA, phytohemagglutinin; Og Con A, concanavalin A.

3.3. Cytotoksisk Effekt Av AgC På Lymfoide Og Leukemi Kreftcellelinjer

våre resultater bekreftet Agcs antiproliferative og cytotoksiske egenskaper på leukemiske (Molt-4 Og K562) og lymfomcellelinjer (Ramos OG L5178Y) på en doseavhengig måte (1,75 til 17,5 ng / mL) () (Figur 6).

Figur 6

cell levedyktighet av kreftcellelinjer behandlet med kolloidalt sølv og mitogener. K562, Molt-4, Ramos Og L5178Y kreftcellelinjer (5 × 103 celler/brønn) ble behandlet med Flere Doser AgC og inkubert i 5 timer ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. Celleviabilitet ble analysert VED MTT-analyse. Dataene representerer det gjennomsnittlige ± standardavviket for tre uavhengige eksperimenter. . AgC, kolloidalt sølv.

3.4. Cytokinbestemmelse

i Tillegg Til AgC-behandling påvirket ikke produksjonen () AV IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-17A (0 pg/mL) eller TNF-α (5,84 pg/mL) sammenlignet med ubehandlet kontroll. LPS-behandling brukt som positiv kontroll induserte imidlertid en høy produksjon av alle cytokiner som ble evaluert (Tabell 1).

3.5. Fenotyping Av Celleoverflatemarkører

våre resultater viste At AgC−behandling ikke påvirket prosentandelen av ekspresjon AV cellepopulasjoner CD3+ (79,7%), CD3-CD19+ (10,2%), CD3+CD4+ (52,2%), CD3+CD8+ (33,9%) og CD16+CD56+ (7,6%), sammenlignet med kontrollen () (Tabell 2).

3.6. Peroksynitritt Og Opptak AV Fitc-Dekstranbestemmelser

kolloidalt sølvbehandling (99%) påvirket ikke levedyktigheten til dendrittiske celler(Figur 7 (a)) eller nivåene av peroksynitritt som ble evaluert (Figur 7 (b)), men økte fagocytoseprosenten(figur 7 (c)) sammenlignet med kontrollen ().

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)
(c))

Figur 7

celle levedyktighet av humane makrofager, fagocytose, og peroksynitritter produksjon. Humane makrofager (1 × 106 celler) ble behandlet Med AgC og inkubert i 5 timer ved 37°C og 5% CO2-atmosfære. (A) celle levedyktighet ble analysert ved trypan blå assay. (b) makrofager fagocytose AV FITC-Dekstran evaluert ved flowcytometri. (C) Nitrat / nitritt bestemt Av Griess reaksjon (nitrat/nitritt kolorimetrisk assay kit); LPS ble brukt som positiv kontroll. Dataene representerer det gjennomsnittlige ± standardavviket for tre uavhengige eksperimenter. . AgC, kolloidalt sølv; FITC-Dekstran, fluoresceinisotiocyanat-Dekstran; OG LPS, lipopolysakkarid.

4. Diskusjon

det er kjent at flere kjemoterapeutiske midler som brukes i kreftbehandling (cyklofosfamid, vinblastin, vinkristin, bleomycin og cisplatinum) har antiproliferative og cytotoksiske effekter; men ved lave doser kan de stimulere immunresponsen . Effekten på immunsystemet av noe stoff bør testes fordi eventuelle skader i dette systemet kan påvirke kroppens homeostase. I denne studien analysen av kolloidalt sølv antyder tilstedeværelsen av en heterogen populasjon av nanopartikler og klynger dannet av sølv salter, sannsynligvis stammer fra interaksjoner med proteiner som finnes i fullstendig kultur medium. Aggregeringseffekten av sølvpartiklene i biologiske væsker på grunn av tilstedeværelse av proteiner og lipider er rapportert . I tillegg viste våre resultater At AgC (17,5 ng/mL) kan hemme produksjonen AV IL-2 indusert av mitogener. Immunsuppresjon indusert I PBMC kan derfor medieres ved hemming AV il-2 frisetting. Den immunsuppressive aktiviteten til enkelte legemidler som ciklosporin og azatioprin har blitt bekreftet ved hemming av proliferasjon av lymfocytter og produksjon av cytokiner (INF-γ, IL-2, RANTES, TGF-β og TNF-α), når lymfocytter stimuleres av reagenser som PHA, Con A eller pokeweed mitogen . IL-2 er en autokrin vekstfaktor For T-celler, og produksjonen er selektivt hemmet ved behandling med immunsuppressiva takrolimus (FK506) eller mykofenolsyre . Det er kjent at immunsuppressive midler (kortikosteroider) brukes til behandling av lymfoide maligniteter fordi de induserer apoptose av ondartede lymfoide celler . Vi viste de antiproliferative og cytotoksiske egenskapene Til AgC (155 nm) (doser fra 1,75 til 17,5 ng/mL) på leukemiske og lymfomatøse cellelinjer til tross for tidligere rapporter som nevnte at sølvpartikler i området 10-100 nm diameter er mer cytotoksiske enn større partikler . Det er nødvendig å kjenne mekanismen for selektivitet MELLOM pbmc og myeloid og lymfoid opprinnelse kreftceller og fremtidige studier bør utvikles i området av reseptor-mediert apoptose som diskutert av ” Vega og De Maio, 2005 .”På grunn av glukokortikoidresistens i lymfombehandling fortsetter tumorcellene sine utvidelser i nærvær av glukokortikoider . Av Denne grunn Kan AgC tilby et nytt klinisk alternativ som skal vurderes, men flere studier relatert er nødvendig. På den annen side indikerer våre resultater at cytokin-produksjon og prosentandelen av overflatemarkører uttrykt av t -, B-og NK-celler ikke påvirkes som respons På AgC (17,5 ng / mL), motsatt av andre immunosuppressorer som rapamycin eller soraphen, hvor immunosuppressoreffekten tilskrives interferens av en signalvei og metabolisme av fettsyrer . Videre er det bevis for at immunsystemceller kan aktiveres som respons på biomaterialer, selv OM MHC/peptid / tcr-induserte signalveier ikke forventes. Alternative ikke-gjenkjennbare veier kan imidlertid føre til aktivering ved kryssbindende glykoproteiner på plasmamembranoverflaten, slik som mitogenindusert lymfocyttproliferasjon . Med hensyn til peroksynitritt induserte ikke kolloidalt sølv (17,5 ng/mL) produksjonen, men fagocytoseaktiviteten økte sannsynligvis på grunn av opptak av kolloidalt sølv på en uspesifikk måte. Andre forfattere har beskrevet at sølvnanopartikler i et område på 5, 10, 15 og 100 nm øker de reaktive oksygenartene som påvirker mitokondriefunksjonen, og at fagocytose av sølvpartikler blokkerer cellesyklusen I s-fasen og stimulerer inflammatorisk signalering gjennom generering av reaktive oksygenarter, etterfulgt AV sekresjon AV TNF-α, noe som reduserte levedyktigheten til rotteleverceller .

til slutt viser den foreliggende studien ikke-toksisiteten til kolloidalt sølv over immunsystemceller og dets evne til å forstyrre immunresponsen ved å redusere celleproliferasjon når den stimuleres med mitogener, noe som tyder på at kolloidalt sølv kan betraktes som et immunosuppressivt middel, men flere studier må utføres for å etablere effektivitet og virkningsmekanisme.

Konkurrerende Interesser

forfatterne erklærer at det ikke er noen interessekonflikt angående publisering av dette papiret.

Anerkjennelser

denne studien er støttet Av Laboratory Of Immunology and Virology, Fakultet For Biologiske Vitenskaper, Autonomous University Of Nuevo Leon, San Nicol@s de los Garza, NL, Mexico, i samarbeid med “Red Temupuntica de Inmunologí og Enfermedades Infecciosas” med Registernr. 253053, CONACYT.