Kvantifisere ROS nivåer ved HJELP AV CM-H2DCFDA og HyPer

ved lave nivåer kan reaktive oksygenarter (ROS) fungere som signalmolekyler i celler. NÅR ROS-produksjonen overskrider kapasiteten til endogene antioksidantsystemer, eller antioksidantnivåene reduseres, øker ROS-nivåene ytterligere. Sistnevnte er assosiert med induksjon av oksidativt stress og tilhørende signaltransduksjon og karakterisert VED ROS-induserte endringer i cellulær redoks homeostase og / eller skadelige effekter på biomolekyler (f. eks. DNA, proteiner og lipider). Gitt de komplekse mekanismene som er involvert I ROS-produksjon og fjerning, i kombinasjon med mangelen på reportermolekyler som virkelig er spesifikke for en bestemt TYPE ROS, er kvantifisering av (sub)cellulære ROS-nivåer en utfordrende oppgave. I dette kapitlet beskriver vi to strategier for å måle ROS: one approach to assess general oxidant levels using the chemical reporter CM-H2DCFDA (5-(and-6)-chloromethyl-2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate), and a second approach allowing more specific analysis of cytosolic hydrogen peroxide (H2O2) levels using protein-based sensors (HyPer and SypHer).