Effekt Av Langvarig Behandling med Azitromycin, Klaritromycin eller Levofloksacin på Chlamydia pneumoniae i En Kontinuerlig Infeksjonsmodell | Jiotower
DISKUSJON
Metoder som for tiden brukes Til dyrking Av C. pneumoniae og i in vitro følsomhetsstudier er ikke analoge med infeksjonen som den forekommer in vivo. Vi etablerte en in vitro-modell av kontinuerlig c. pneumoniae-infeksjon med HEp – 2-celler som hadde vært vedvarende infisert i over 4 år uten tilsetning av fersk klamydia eller vertsceller, tilsetning av cykloheksimid eller sentrifugering (23). Ultrastrukturstudier av de kontinuerlig infiserte cellene viste tilstedeværelsen av en subpopulasjon av unormale inneslutninger, som var svært lik i utseende til vedvarende former indusert etter behandling med gamma interferon (22). Derfor kan denne modellen mer nøyaktig gjenspeile interaksjoner mellom klamydia og vertsceller og dermed være en bedre modell for in vitro-følsomhetsstudier Av c. pneumoniae.
resultatene av denne studien viste at langvarig behandling med azitromycin, klaritromycin og levofloksacin ved konsentrasjoner oppnådd i epithelial lining fluid reduserte, men eliminerte Ikke c. pneumoniae fra kontinuerlig infiserte vertsceller.
Galasso og Manire (7) var de første forskerne som benyttet en kontinuerlig infeksjonsmodell for antibiotikaaktivitetstesting. De benyttet HeLa-celler kontinuerlig infisert Med Chlamydia psittaci for å bestemme effekten av penicillin, tetracyklin og kloramfenikol. De fant at 500 u penicillin / ml undertrykte chlamydialveksten, men selv langvarig behandling i 100 dager klarte ikke å eliminere organismen. Mer enn 14 dagers behandling med 10 hryvnias tetracyklin/ml eller 21 dager med 25 og 100 hryvnias kloramfenikol/ml var nødvendig for å undertrykke chlamydial vekst til ikke-målbare nivåer. Dreses-Werringloer et al. (6) nylig rapporterte lignende observasjoner om effekten av ciprofloxacin og ofloxacin på etablert (2 til 3 dager etter inokulering) c. trachomatis-infeksjon. De fant at begge legemidlene, ved konsentrasjoner som oversteg den minimale bakteriedrepende konsentrasjonen (0,5 µ av ciprofloksacin / ml, 1,0 og 2,0 µ av ofloksacin/ml), ikke klarte å utrydde C. trachomatis fra infiserte HEp-2-celler og også induserte vedvarende infeksjon karakterisert ved et lavt antall små avvikende inneslutninger tilstede gjennom 20 dagers kultur. Etter fjerning av ciprofloxacin fra media 10 eller 14 dager etter infeksjon, gikk vedvarende klamydia tilbake til åpen vekst.
resultatene av denne studien tar opp noen viktige spørsmål om bruk av antibiotika, inkludert azitromycin, for sekundær forebygging av hjertesykdommer (1, 10, 13). Dosene av azitromycin som brukes er 500 eller 600 mg / dag i 3 og 6 dager etterfulgt av ukentlige doser på 500 til 600 mg i perioder på 3 måneder til 1 år. Basert på dataene som presenteres her, virker det lite sannsynlig at disse doseringsregimene vil eliminere C. pneumoniae fra et intravaskulært fokus. Standard respirasjonsdose av 1.5 g azitromycin i løpet av 5 dager hadde bare 70 og 83% effekt ved å utrydde C. pneumoniae fra henholdsvis nasopharynx av kulturpositive voksne og barn med lokalt oppkjøpt lungebetennelse (28). Data er lik for andre antibiotika. Block et al. (3) fant at en 10-dagers behandling med erytromycin eller klaritromycin suspensjon utryddet C. pneumoniae fra nasopharynx av henholdsvis 86 og 79% av kulturpositive barn med lokalt ervervet lungebetennelse, til tross for at klaritromycin var fire ganger mer aktiv in vitro (15). Resultatene fra to studier av pneumonibehandling hos voksne, som evaluerte levofloksacin og moksifloksacin, fant utryddelsesrater på 70 til 80% (16, 17). Dessus-Babus et al. nylig beskrevet induksjon av resistens mot ofloxacin og sparfloxacin I Chlamydia trachomatis etter seriell passering av organismen i subinhibitory konsentrasjoner av disse stoffene (5). Antibiotikaresistens Er ennå ikke beskrevet For C. pneumoniae. Imidlertid Er MICs av tre isolater Av C. pneumoniae, hentet fra to pasienter med lokalt oppkjøpt lungebetennelse behandlet med azitromycin, økte firedoblet etter behandling, selv om de fortsatt var innenfor området som ble ansett som mottakelige for legemidlet (28). Det er ikke klart om det var en isolert hendelse eller tyder på en mulig utvikling av utholdenhet. Videre kan dosering med azitromycin en gang i uken resultere i langvarig eksponering for subinhibitoriske legemiddelnivåer, noe som fører til utvikling av resistens hos andre respiratoriske bakterier, spesielt Streptococcus pneumoniae (24, 26).
eksistensen av utholdenhet reiser også et eget viktig problem for behandling Av C. pneumoniae-assosierte sykdommer. Vedvarende former vanligvis ikke replikere eller har redusert aktivitet, og derfor kan ikke være utsatt for antibiotika. Det er ganske mulig at 20 til 30% av mikrobiologiske feil i rapporterte c. pneumoniae-behandlingsstudier (3, 16, 17, 18) og c. pneumoniaes evne til å overleve antibiotikabehandling i våre eksperimenter kan være direkte relatert til vedvarende tilstand.
C. pneumoniae kan stimulere produksjonen av cytokiner, kjemokiner og adhesjonsmolekyler i ulike endotel – og epitelcellelinjer(8, 9, 20, 25, 27). Disse immunologisk aktive molekylene er i stand til å indusere og opprettholde inflammatorisk prosess som kan spille en viktig rolle i patogenesen av aterosklerose (30). Foreløpige data viste høyere produksjon av noen cytokiner i den kontinuerlige infeksjonsmodellen sammenlignet med primærkulturer (27). I denne studien stimulerte c. pneumoniae signifikant produksjon AV IL-6 og IL-8 i de kontinuerlig infiserte HEp – 2-cellene. Disse cytokinene har blitt påvist i fibrøse plakk som tyder på deres engasjement i utviklingen av aterosklerose (31).
Makrolider og tetracykliner har vist seg å ha antiinflammatoriske egenskaper uavhengig av deres antimikrobielle aktivitet (19, 21, 32). Azitromycin og klaritromycin i konsentrasjoner på 1, 5 og 10 µ/ml har vist seg å påvirke PRODUKSJONEN AV IL-1Α, IL-1Β, IL-6, IL-10, kolonistimulerende faktor for granulocytt-makrofag og TNF-α av humane monocytter (21) i varierende grad. Mest bemerkelsesverdig var at azitromycin resulterte i en signifikant reduksjon AV IL-1A og TNF-α hos 100% av individene, og behandling med klaritromycin resulterte i en signifikant reduksjon AV IL-6 og TNF-α hos henholdsvis 60 og 86% av individene. Tilsvarende er det observert reduksjon i nivåene 6-keto-prostaglandin F1a, NO2, TNF-α, IL-1Β og IL-6 i murine makrofager behandlet med 5 til 80 µ azitromycin, klaritromycin, roksitromycin og erytromycin (19). Selv om behandlingen med ALLE tre antibiotika i denne studien reduserte NIVÅENE AV IL-6 og IL-8 i kontinuerlige kulturer, syntes denne effekten å være primært sekundær til antichlamydial aktivitet, da nivåene av cytokiner korrelerte med titrene Av C. pneumoniae.
