Prevalens og Noen Mulige Mekanismer For Kolistinresistens Blant Multidrugresistente Og Omfattende Legemiddelresistente Pseudomonas aeruginosa

Innledning

Pseudomonas aeruginosa (p. aeruginosa) er et opportunistisk patogen, som ofte finnes i miljø som jord, vann, planter og sykehusmiljø, med kjent iboende motstand mot mange antimikrobielle midler og evnen Til å å forårsake livstruende infeksjoner. Det regnes som den andre vanlige årsaken til sepsis i intensivavdelinger (Icu) og kan forårsake ventilatorassosiert lungebetennelse, sårinfeksjoner og urinveisinfeksjoner (UTI). Mange studier rapporterte økningen av dødelighet og morbiditet av infeksjoner assosiert Med p. aeruginosa, spesielt de som viste multi-resistensmønstre.1-3

fremveksten av multidrugsresistent (MDR) Eller omfattende legemiddelresistent (XDR) Eller pandrugsresistent (PDR) P. aeruginosa blir et betydelig folkehelseproblem som kan føre til forsinket antimikrobiell behandling eller svikt og økning i dødeligheten, spesielt med utseendet av karbapenemresistent p. aeruginosa. Så, oppmerksomhet er nødvendig fordi disse resistente stammene kan vise resistens mot alle tilgjengelige antimikrobielle stoffer eller viste følsomhet bare for giftige som kolistin eller polymyxiner, og gir ingen valg for helsevesenet i behandlingen av alvorlige infeksjoner forbundet med MDR P. Aeruginosa.4

nylig ble det observert resistens mot polymyksiner blant Visse arter Av Enterobacteriaceae som K. pneumoniae, E. coli, Enterobacter aerogenes og Enterobacter cloacae på grunn av sin brede bruk for å kontrollere infeksjoner i veterinærmedisin. Kolistinresistens har blitt en stor utfordring for behandling av livstruende infeksjoner, spesielt med sameksistensen av mcr-1-gener med andre multiple resistensgener som ESBL, MBL, NDM-gener med mulighet for fremveksten av pan-resistens.5,6

Kolistin, kjent som polymyxin E, er ett medlem av en familie av kationisk polypeptid kjent som polymyxiner. Denne antibiotiske familien er preget av tilstedeværelsen av en lipofil fettacylsidekjede. I dag er colistin gjeninnført i medisinsk terapi og betraktet som siste utvei for behandling av alvorlige infeksjoner forårsaket AV MDR og XDR flekker. Generelt avhenger virkningen av polymyxiner på bakterier hovedsakelig av den elektrostatiske samspillet mellom det positivt ladede antibiotika og den negativt ladede fosfatgruppen av lipid a lokalisert på ytre membran etter bindingen, diffunderer den gjennom ytre membran, periplasmisk rom og interagerer med den indre membran. Polymyxiner forårsaker destabilisering til ytre membran, poredannelse, økt permeabilitet, lekkasje til cytoplasmatisk innhold etterfulgt av cellelyse.7

Kolistinresistens oppstår hovedsakelig på grunn av den kjemiske modifikasjonen ved enzymatisk tilsetning av fosfoetanolamin ved 4ʹ-fosfatgruppen av lipid a-delen av lipopolysakkaridet som reduserer den netto-negative ladningen til den ytre membranen, noe som resulterer i redusert polymyksinaffinitet. Resistens mot kolistin kan skyldes kromosomkodet mutasjon som rapportert I K. pneumoniae eller horisontal overføring av resistens ved hjelp av plasmid som bærer kolistinresistent gen (mcr-1).8-11

fremveksten av kolistinresistens i ulike land I Asia, Europa og Noen Land I Afrika har blitt en av de globale bekymringene. Colistinresistensformidling indikerer evnen til å overføre horisontalt ved konjugative plasmider eller vertikalt ved kromosomal mutasjon.12,13 også, å være colistin en av de siste linjene av behandlinger for alvorlige infeksjoner, noe som gjør fremveksten av colistinresistens isolerer truer verden ved utseendet av botemiddel smittsomme sykdommer.14 Påvisning av kolistinresistens I Egypt, som er et land kjent for sin høye byrde av smittsomme sykdommer og tilstedeværelsen av lav eller ingen begrensning på antimikrobiell bruk i både veterinær og medisin, noe som indikerer fremveksten av ubehandlede sykdommer i vårt område på grunn av muligheten for overføring av kolistinresistens mot svært resistente bakterier.15

i denne studien undersøker vi forekomsten av kolistinresistens blant MDR Og XDR P. aeruginosa isolert fra pasienter som lider av en rekke infeksjoner i intensivavdelingen (ICU) Av Minia universitetssykehus I Egypt.

Materialer Og Metoder

Innsamling Av Isolater

ett hundre og syttifem kliniske prøver av ulike kilder til infeksjoner ble samlet inn fra pasienter innlagt PÅ INTENSIVAVDELINGEN I minia universitetssykehus, Minia, Egypt som en del av rutinemessige sykehus-laboratorieprosedyrer. Alle kliniske prøver ble dyrket på trypticase soya agar (Lab M, STORBRITANNIA) ved 37°C og 42°C i 24 timer. En koloni ble sub-kultivert På MacConkey agar plater og cetrimide agar. Isolerte kolonier ble videre identifisert i henhold til kolonimorfologi, laktosefermentering, biokjemiske reaksjoner (inkludert sulfid–indolmotilitet, katalase, trippel sukkerjern, urease og oksidase tester), evne til å vokse på cetrimid agar og å vokse ved 42°C. 16 P. aeruginosa kolonier ble renset ved streaking, og rene kolonier ble lagret ved 4°C.

Sensitivitetstester For Antibiotika

Sensitivitet For Antibiotika Ved Kirby-Bauer Disc Diffusion Method

sensitiviteten for antibiotika mot forskjellige klasser av antibiotika ble testet Ved Kirby-Bauer disc diffusion method.17 Antibiotikum plater som ble brukt var amoxicillin/clavulanic (AMC) (20/10 µg), ampicillin/sulbactam (SAM) (20 µg), meropenem (MEM) (10 µg), imipenem (IPM) (10 µg), cefepime (FEB) (30 µg), cefoperazone (CEP) (75 µg), polymyxin B (PB) (300 µg), ciprofloxacin (CIP) (5 µg), levofloxacin (LEV) (5 µg), gentamicin (CN) (10µg), ceftazidim (CAZ) (30 µg), tigecycline (TGC) (15 µg), amikacin (AK) (30 µg), tobramycin (CF) (10 µg), aztreonam (ATM) (30 µg), piperacillin (PRL) (30 µg), carbenicillin (BIL) (100 µg) (Oxoid; Basingstoke, STORBRITANNIA). Isolater ble klassifisert som sensitive, intermediære Og resistente i henhold til inhibition zones ‘ interpretation standards Of Clinical Laboratory standards Institute (CLSI) 2018.18

Mic-Bestemmelse Av Kolistinantibiotikum

agar fortynningsmetode På Muller-Hinton agar ble brukt til å bestemme kolistin minimum hemmende konsentrasjon.19 Resistens mot kolistin ble vurdert dersom MIC er ≥4µ / mL i henhold TIL standard retningslinjer FOR CLSI.18

ifølge resultatene av antibiotikaresistens ble isolater klassifisert TIL MDR, XDR og PDR i henhold til kriteriene som tidligere ble rapportert.20

Kombinert Diskdiffusjonstest (CDT)

Alle kolistinresistente isolater (MIC ≥4) ble testet ved bruk av 100 mM EDTA (Sigma-Aldrich; St. 268 Louis, MO, USA) for å hemme mcr-1-aktiviteten, da denne konsentrasjonen ikke viste antimikrobiell aktivitet. Bakteriestammene ble dyrket På Muller-Hinton agar (Lab M, UK) hvor tre plater ble brukt. En plate ble mettet med 10 µ PÅ 100 mM EDTA for å sikre at den BRUKTE konsentrasjonen AV EDTA ikke hemmet bakterieveksten. De to andre platene var 10µ kolistinskive og 10 µ kolistin pluss 10 µ 100 mM EDTA-plate. Isolatene ble observert for en økning av ≥3mm i hemmingssonediameteren til kolistin/EDTA-skiven sammenlignet med kolistinskiven.21

Endring Av Zeta-Potensial

mcr-genene koder for fosfoetanolamintransferaser enzymer som enzymatisk fester en fosfoetanolamin (PEtN) – del til lipid A i den ytre membranen Til Gram-negative bakterier som fører til reduksjon i netto negativ ladning som gir kolistinresistens.22

bakteriecellene har fått lov til å vokse i nærvær og fravær av 80 µ / mL EDTA. Deretter ble bakteriesuspensjonen sentrifugert ved 5000 rpm i 5 min ved 5°c, deretter ble pellets vasket to ganger, etter at pellets ble suspendert i 2 mL steril 1 mM NaCl-løsning justert til 0,5 McFarland standard løsning turbiditet. Prøver ble fortynnet til 1: 4 ved bruk av 1mM NaCl. Zeta potensial ble bestemt i 2 mL av den fortynnede prøven. Endringer Av Zeta potensial indusert AV EDTA ble beregnet Ut fra zeta potensiell ratio (RZP=ZP+EDTA/ZP-EDTA), HVOR ZP + EDTA og ZP-EDTA korresponderer Med zeta potensielle verdier oppnådd for bakterielle suspensjoner dyrket i nærvær eller fravær av henholdsvis 80µ/mL EDTA. Rzp av ≥ 2,5 verdi anses som kriterier for identifisering av mcr-1 positive stammer.21

DNA-Ekstraksjon

DNA-malen ble ekstrahert fra En overnattingskultur Av p. aeruginosa som tidligere beskrevet.23 en suspensjon av bakteriell pellet ble kokt i 10 min, deretter sentrifugert. Supernatant ble brukt direkte i PCR-analysen.

PCR-Analyse Av Testede Gener

Eksotoksin A er en viktig virulensfaktor (et cytotoksisk middel) Av p. aeruginosa ved kliniske infeksjoner. Denne faktoren hemmer proteinbiosyntese som fører til stor vev og organskade. ToxA-genet, en iboende genetisk sekvens som ligger på p. aeruginosa-kromosomet, brukes Til p. aeruginosa-bekreftelse VED PCR.

PCR ble utført i et totalt volum på 25 µ inneholdende 1x PCR-buffer, 1 µol/L av hver primer, 1 µ av genomisk DNA (approximately150 ng), 200@mol/l av dNTPs-blanding, 2 mmol/L Av MgCl2 og 0,05 U/µ taq DNA-polymerase. PCR-forsterkninger ble utført for toxA FW:CTGCGCGGGTCTATGTGCC, RV:GATGCTGGACGGGTCGAG i en automatisert termisk syklus (Eppendorf, Hamburg, Tyskland) under følgende forhold: 30 sykluser på 1 min ved 94°C, 1,5 min ved 63°C og 1 min ved 72°C. 24

genene mcr-1 og mcr-2 ble analysert ved konvensjonell PCR-teknikk ved bruk av følgende primere: mcr-1 FW (5 ‘- AGTCCGTTTGTTCTTGTGC-3′), BOBIL (5′-AGATCCTTGGTCTCGGCTTG-3’) og mcr-2 fw (5ʹ-atgacatcacatcactcttgg-3ʹ), Bobil (5ʹ-ttactggataaatgccgcgc-3ʹ).25,26 teknikkbetingelsene var 34 sykluser av 95°C i 1 min, 58°C for mcr-1 og 52°C i 30s, 72°C i 1 min etterfulgt av endelig forlengelse av 72°C i 5 min.

Bestemmelse Av Efflukspumpehemming ved MIC-Reduksjon Ved Bruk Av Efflukspumpehemmer (CCCP)

agarfortynningsmetoden ble brukt til bestemmelse av Mic ved Bruk Av Kationjustert mueller-Hinton-buljong (Sigma-Aldrich, St Louis, USA). MICs AV CCCP (EPI) og colistin ble bestemt for de testede isolatene. Sub-MIC AV CCCP ble brukt for å bestemme dens effekt på colistin MIC; KONSENTRASJONEN AV CCCP (0,5× MIC) ble konstant holdt ved MIC-konsentrasjonene angitt ovenfor, mens konsentrasjonen av antibiotikumet ble økt serielt. Mics av isolatene til kolistin i fravær og nærvær AV CCCP ble bestemt ved bruk AV EN SUB-MIC AV CCCP (endelig konsentrasjon på 10 mg/L) som allerede beskrevet.27 de resulterende MIC fold endringer etter tillegg AV CCCP ble beregnet som forholdet MELLOM CCCP-fri antibiotika MIC nivå til AT AV CCCP-lagt antibiotika. Som Tidligere beskrevet Av Osei Sekyere, rapporterte Amoako28 som rapporterte at det positive kriteriet for tilstedeværelse av efflukspumper i isolater var en ≥8 ganger reduksjon i KOLISTIN MIC etter tilsetning AV CCCP.

Ytre Membranproteinmønster

en enkelt koloni av de testede P. aeruginosa-isolatene ble dyrket i 5 mL LB-buljong ved 37°C i 2 dager med risting ved 200 rpm. Cellene ble sentrifugert ved 8000 rpm i 5 minutter. Bakterielle pellets ble suspendert i 1 mL lysisbuffer (0,05 M Tris HCL, 2% SDS, 10% glyserol), oppvarmet til 95°C i 10 minutter. Deretter ble prøvene sentrifugert for 10.000 rpm for 30 min. Omtrent 50 µ ekstrahert protein ble blandet med prøvebuffer (4 mL avionisert vann, 1 mL 0,5 M Tris HCL, 1,6 mL 10% SDS, 0,4 mL 2-merkaptoetanol, 0,2 mL 1% (w/v) Bromfenolblå) (1: 1) og separert med 12% natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgel (SDS-SIDE).29

Lipopolysakkarid Sds-Polyakrylamid Gelprofil for Kolistinfølsomme Og Kolistinresistente Isolater

LPS av de testede isolatene ble ekstrahert og renset ved varm vandig fenolmetode ved Bruk Av Westphal, Jann30 og analysert det rensede materialet ved HJELP AV SDS-PAGE, etterfulgt av karbohydratspesifikk sølvfarging.31

Resultater

Pseudomonas aeruginosa Isolering Og Antibiotikaresistens

av 175 prøver hentet fra pasienter med ulike infeksjoner, var 75 prøver (42,8%) positive fenotypisk for P. aeruginosa og positiv for toxA-genet.

Antimikrobiell følsomhetstesting viste at den isolerte p. aeruginosa var fullstendig resistent mot amoksicillin / klavulansyre og høy resistens ble observert mot ampicillin / sulbactam (68%), ceftazidim (63%) og azetreonam (60%). Moderat resistens ble observert mot både tobramycin og tigecyklin (50% hver). Videre ble det vist lav resistens mot imipenem (6%) og meropenem (5,3%) (Figur 1). I henhold til antibiotikaresensitivitetsresultatene ble resistente isolater klassifisert TIL MDR (96%), XDR (87%) og INGEN isolat klassifisert SOM PDR. I tillegg ble det funnet at av 75-isolater viste 16-isolater (21,3%) resistens mot kolistinantibiotikum med MIC ≥ 4µ/mL (varierte fra 8 til 256 µ/mL).

Figur 1 Antibiotikaresistens mønster av alle isolerte P. aeruginosa isolater.

Bestemmelse Av Mcr – 1-Og Mcr-2-Gener

Mcr-1-genet ble påvist fenotypisk i kolistinresistente isolater av CDT, hvor forskjellene mellom diametrene til inhiberingssonene til kolistin / EDTA-og kolistinskiver ble målt til å være ≥ 3 mm. resultatene viste at 6 isolater (37,5%) viste en økning i diameteren til kolistin/EDTA-skiven med 3 til 10 mm sammenlignet med kolistinskiven alene (Figur 2).

Figur 2 Fenotypisk deteksjon for mcr positive isolater ved kombinert diskdiffusjonstest (CDT). (A): mcr-1 positiv stamme viste en økning i sonediameteren på skiver med kolistin og EDTA ≥ 3mm sammenlignet med kolistin alene. (B): mcr-1 negativ isolat viste liten endring (1 mm) i hemmingssonediameteren til kolistin og EDTA-skive sammenlignet med kolistin alene.

Endring Av Zeta-Potensial

på den annen side ble endring Av zeta-potensialanalyse holdt som en fenotypisk deteksjon FOR MCR-gener, men resultatene viste ingen signifikant endring i zeta-potensialet unntatt i 2-isolater.

Påvisning Av Resistensgener

den genetiske påvisningen av mcr-gener ved bruk av konvensjonell PCR-teknikk viste at 8 (50%) isolater var positive for mcr-1, 6 av dem var positive FOR CDT, mens 100% (16 isolater) var negative for mcr-2.

Antibiotikaresistens Av Kolistinresistente Isolater

følsomheten av kolistinresistente isolater mot andre antibiotika ble bestemt Ved Kirby-Bauer diskdiffusjonsmetode, resultatene viste at 100% av isolatene var resistente Mot Amoksicillin/klavulan, mens resistensen mot Ampicillin/sulbactam, Cefepim og Tobramycin var henholdsvis 78,12%, 71,87% og 68,75%. De mest effektive stoffene var meropenem, imipenem og ciprofloxacin (Figur 3)

Figur 3 Antibiotikaresistensmønster av kolistinresistente isolater.

.

Bestemmelse Av Efflukspumpehemming ved MIC-Reduksjon Ved BRUK AV CCCP

ved å studere effekten av 0,5 MIC CCCP på mic-kolistin, ble det funnet at bare 3/16 isolater (P6, P8 & P16) (18,75%) viste en reduksjon I Mic av colistin ≥ 8 ganger (Tabell 1) i NÆRVÆR AV CCCP. Fra tidligere resultater, isolat nr. 16 ble funnet å ha efflux mekanisme og mcr – 1 gen.

Tabell 1 Kolistinresistente Isolater, Noen Mulige Mekanismer For Resistens mot Kolistin og Deres Følsomhet overfor Andre Antibiotika

Ytre Membran SDS-SIDEPROFIL

Tabell 2 og Figur 4 viser at fem bånd med molekylvekt på 66,7, 56,06, 47,8, 40,18 og 23.6 KDa var stabile i følsomme og resistente isolater, mens ett bånd med en molekylvekt på 21 KDa bare ble funnet I kolistinresistente stammer Som Var P1 (mcr-1 positive) Og P12 (mcr-1 negative).

Tabell 2 Molekylvekt og Mengde % Av Ekstraherte Ytre Membranproteiner Av Kolistinresistente Og Kolistinfølsomme P. Aeruginosa

Figur 4 Ytre membran SDS-SIDE av kolistinresistente og følsomme stammer. Lane 1: Proteinmarkør, Kjørefelt 2 og Kjørefelt 3: kolistinresistente stammer (P1 & P12), Kjørefelt 4-6: kolistinfølsomme stammer.

Lipopolysakkarid (LPS) SDS-SIDE

Lipopolysakkarid sølvfarget Sds-SIDE viste at kolistinresistente mcr – 1 negative isolater (P3, P6 Og P10) ikke viste NOE LPS-båndmønster (O-antigen-repetisjoner eller lps-kjerne) som avslørte muligheten for tap og motstanden av disse isolatene til kolistin. På den annen side viste Kolistinresistent mcr-1 positiv stamme o-antigenrepetisjoner (Figur 5, Lane 5) som skiller Seg fra o-antigen gjentar mønster Av Kolistinfølsom belastning (Figur 5, Lane 4) mens begge viste LPS-kjerne. Disse resultatene kan indikere tilstedeværelse av modifiserte LP-er i den positive mcr-1-stammen.

Figur 5 lps band mønster. Felt 1, 2 & 3: kolistinresistente mcr-1 negative stammer (henholdsvis p3, p6 & p10), Felt 4: Kolistinfølsomme stammer og Felt 5: Kolistinresistente mcr-1 positive stammer (P1). O-antigen repetisjoner er eske og pil refererer TIL lps kjerne.

Diskusjon

nylig forekommer multiresistente patogene bakteriestammer der de fleste tilgjengelige antibiotika ikke er effektive mot dem.6,32-36 polymyxinene betraktet som siste utvei for behandling av multiresistente bakterielle infeksjoner, så det var et must å studere fremveksten av kolistinresistent. Polymyxiner viste sin aktivitet gjennom deres elektrostatiske interaksjon mellom dem og de negativt ladede delene på lipid A Av Gram-negative bakterier som resulterte i destabilisering av ytre membran og lekkasje av cytoplasmatisk innhold og lysis.37,38

Det ble funnet at den vanligste årsaken til polymyksinresistens ER lps-modifikasjon ved tilsetning av 4-amino-4-deoksy-l-arabinose (Lara4N) og fosfoetanolamin (kodet av mcr-type gener) eller galaktosamin til lipid a AV LPS-kjerne. Som et resultat påvirker en reduksjon i netto-negativ ladning av fosfatrester affiniteten av polymyxin til membranen eller på grunn av effekten av to-komponent reguleringssystemer (TCSs) pmrA/pmrB og phoP/phoQ.39

i vår studie oppdaget vi kolistinresistens i henhold til Resultatene Av MICs etterfulgt av deres testing for nærvær av mcr-1 fosfoetanolamintransferase ved bruk av fenotypiske metoder og påvisning av mcr-1gen. Fenotypiske metoder avhenger av at mcr – 1 fosfoetanolamin er sinkmetalloprotein. Så, enhver reduksjon i sink vil redusere MICs av kolistin i isolater positive for mcr-1. Å være mcr-1-kodende enzym, tillater et sinkmetalloprotein BRUK AV EDTA som metallkelator for å redusere sink i media og påvirke kolistinmiks og zeta-potensialene til mcr-1 positive isolater.40

vår studie viste høy forekomst Av p. aeruginosa (42,8%). MDR p. aeruginosa tilsvarte 96% av de totale isolatene og 87% VAR XDR. Høy prevalens Av kolistinresistent p. aeruginosa (21.3%) ble påvist som kan være et resultat av utilstrekkelig smitteverntiltak og misbruk av bakteriedrepende antibiotika i intensivavdelingene i vårt lands sykehus. I tillegg Er Colistin mye brukt i våre land i vekstfremme av matproduserende dyr, spesielt i fjærfeindustrien mens karbapenemer brukes i nødstilfeller.15 så viste karbapenemer observerbar aktivitet mot de testede organismer i forhold til kolistin. På den annen side ble våre resultater observert å være høyere enn de som ble rapportert Av Liassine et al25 som rapporterte at ett isolat av 300 isolater av forskjellige bakteriearter ble identifisert Som p aeruginosa som viste resistens mot kolistin og hadde mcr-1-gen.

Kombinert diskdiffusjonstest (CDT) og endring av zeta-potensial indusert AV EDTA ble brukt som fenotypiske metoder41, 42 for påvisning av mcr – 1-gen. Resultatene viste at ingen isolater var positive for mcr-2 og 8 (50%) isolater av kolistinresistente isolater var mcr-1 positive, mens 2 isolater av disse isolatene viste RZP > 2,5. Av 8 mcr-1 positive isolater var 6 isolater positive for CDT mens to mcr-1 positive (stamme Nr. P15 Og P16) var negative FOR CDT, noe som kan skyldes samproduksjon av ytterligere mekanisme for kolistinresistens som forstyrrer EFFEKTEN AV EDTA.21 Som det ble funnet som isolerer nr. P16 (mcr-1 positiv og CDT negativ) var positiv for effluks.21,43 – 45 i tillegg kan kolistinresistente isolater som var negative for mcr-1 ha mutasjoner på grunn av langvarig bruk av antimikrobielle midler.

videre testet vi kolistinresistente isolater for tilstedeværelse av effluksmekanismer ved BRUK AV CCCP (en efflukspumpehemmer) og forskjellen i ytre membranprotein og LPS SDS-SIDEPROFIL mellom følsomme og resistente isolater. Våre resultater viste tilstedeværelsen av efflux mekanisme blant 3 isolater mens en av dem var mcr-1 positiv. Ytre membranproteinprofil viste ett bånd med en molekylvekt på 21 KDa i de resistente isolatene P1 (mcr-1 positiv) og P12 (kolistinresistent mcr-1 negativ). I tillegg ble det funnet at kolistinresistente mcr-1 negative stammer viste ingen LPS bånd mønster (O-antigen gjentar eller lps kjerne), men mcr-1 positive (P1) og kolistin sensitive isolater viste LPS kjerne, men forskjellig o-antigen gjentar mønster. Machado et al20 studerte rollen av efflux pumpe i kolistinresistens I Acinetobacter baumanni og fant at efflux aktivitet bidrar til heteroresistansen Av A. baumanni i fravær av mutasjon. Marjani et al43 viste at 22,5% av De isolerte p. aeruginosa var resistente mot kolistin som er nær våre resultater, og mer enn 50% av kolistinresistente isolater var positive for efflukspumper.

selv om den nøyaktige mekanismen for bakteriedrap av kolistin eller polymyksiner ikke er klart kjent, er det kjent at deres binding til de positivt ladede peptidene og det negativt ladede Lipid A er et kritisk trinn. Så vi testet DERES lps SDS-SIDEPROFIL og en signifikant forskjell blant de testede stammene ble observert. I en studie utført Av Moffatt et al,46 ble det rapportert at tapet AV LPS resulterte i fremveksten Av a. baumanii kolistinresistent som oppstår på grunn av inaktivering av lipid a-biosyntesegener (lpxA, lpxC eller lpxD). Ytre membranproteinmønstre viste tilstedeværelse av et bånd av molekylvekt som er 21 KDa i kolistinresistente isolater som kan tilsvare OprH i henhold til Det som er rapportert Av Nicas og Hancock47 som rapporterte At oprh-ekspresjon spiller en rolle i Pseudomonas resistens mot polymyksiner og EDTA fordi OprH erstatter divalente kationer i den ytre membranen som resulterer i blokkering av polycationic antibiotikumopptak. Den forrige funn kan forklare hvorfor belastning nei. P1 (mcr-1 positiv) var negativ for CDT.

Konklusjoner

denne studien viste en høy prevalens AV MDR Og XDR p. aeruginosa som viste kolistinresistens blant PASIENTER innlagt PÅ INTENSIVAVDELINGEN som lider av ulike infeksjoner. Det viste også tilstedeværelsen av forskjellige mekanismer som kan resultere i kolistinresistens. Dette indikerer det presserende behovet for å endre antibiotika-behandlingsstrategier for både mennesker og dyr.