837. Colon-Directed levering van virale vectoren met behulp van Virus-Microbead conjugaten voor gentherapie van inflammatoire darmziekte
in de loop van de laatste jaren hebben we een nieuwe technologie voor genoverdracht ontwikkeld die een veilige en efficiënte levering van recombinante virale vectoren mogelijk maakt op doelplaatsen voor gentherapie-toepassingen. In deze technologie, zijn de virale deeltjes stabiel aan de oppervlakten van microbeads in bijlage en dan geleverd aan doelplaatsen in de vorm van virus-microbead conjugaten. Dergelijke conjugaten kunnen cellen infecteren bij efficiënties gelijk aan of zelfs groter dan vrije virale vectoren. In het bijzonder, kan de transductie van doelcellen, die slecht permissive aan besmetting door vrije virale vectoren zijn, aanzienlijk worden verbeterd, die de in bijlage opgenomen virale vectoren van breder tropisme verstrekken. Deze technologie van de genoverdracht wordt momenteel gebruikt om een strategie van de genoverdracht voor inflammatoire darmziekte (IBD) te ontwikkelen. Door een adenoviral vector te gebruiken die het gen voor een machtige anti – inflammatory factor, interleukin-10 (IL-10) draagt, vragen wij of de adenoviral vector aan ontstoken laesies in de dikke darm op intra-colonical toediening van virus-microbead conjugaten door klysma zou kunnen worden geleverd en of dit lokale il-10 niveaus in de dikke darm voor de verbetering van colitis zou kunnen verhogen. Wij hebben aangetoond door muizencolitis modellen te gebruiken dat intra-colonical beleid van adenoviral vectoren die het muis IL-10 gen in de vorm van virus-microbead conjugaten droegen verbeterde verbetering van colitis over dezelfde adenoviral vectoren die in vrije vorm werden beheerd. Deze grotere effectiviteit voor de verbetering van colitis is voornamelijk afgeleid van verbeterde transductie van dikke darmweefsel en daaropvolgende hoog niveau productie van IL – 10 lokaal in de ontstoken dikke darm. We hebben ook een studie gestart om te testen of adeno-geassocieerde virale vectoren (AAV) in de vorm van virus-microbead conjugaten kunnen worden gebruikt voor hun gerichte levering aan ontstoken laesies in de dikke darm. Experimenten met AAV die een markergen dragen suggereren dat het gebruik van virus-microbead conjugaten de transductie van darmweefsel door AAV in een muizencolitis model kan verbeteren. We vragen nu of intra-kolonische toediening van AAV die het muis IL-10 gen draagt in de vorm van virus-microbead conjugaten lokale IL-10 niveaus zou kunnen verhogen voor de verbetering van colitis door efficiënte transductie van de ontstoken dikke darm. Deze resultaten suggereren het potentieel voor deze technologie van de gentransfer om als efficiënte strategie van de gentherapie voor IBD te dienen. Een duidelijk voordeel van deze technologie ten opzichte van andere virus-gemedieerde genoverdracht strategieën voor de therapie van IBD, met inbegrip van die met systemische levering van virale vectoren, is dat de levering van virale vectoren en de daaropvolgende productie van IL-10 (of andere therapeutische proteã NEN) is gericht op ontstoken laesies. Bovendien, aangezien alle virale deeltjes stabiel aan microbeads zijn verankerd, moet de ongecontroleerde levering van virale vectoren aan en daaropvolgende transductie van andere organen tot een minimum worden beperkt. Deze kenmerken zouden niet alleen de therapeutische doeltreffendheid moeten maximaliseren maar ook de veiligheid van het gebruik van virale vectoren moeten verbeteren.
