Lab 9: geleidingssnelheid van zenuwen

objectieven

  1. het meten van de geleidingssnelheid in een menselijke reflexboog, met behulp van de achillespees als initiator van een reflex en contractie van de gastrocnemius-spier als reactie (extracellulaire registratie).
  2. het meten van de drempelwaarde, de geleidingssnelheid en de vuurvaste periode van de heupzenuw van een kikkerzenuw door het stimuleren van de zenuw en het meten van de respons door middel van externe opname-elektroden (extracellulaire opname).
  3. voor het meten van de drempelwaarde en de geleidingssnelheid van een aardwormreuzen axon door middel van externe registratieelektroden.
  4. voor het meten van de geleidingssnelheid van de menselijke heupzenuw door middel van externe registratieelektroden (extracellulaire opname).

geleidingssnelheid in zenuwen: Achtergrond

een neuron is een cel die gespecialiseerd is in de overdracht van zenuwimpulsen. Het axon is het deel van het neuron dat impulsen geleidt; het axon is meestal een lange uitgroei, of proces, dat impulsen weg van het cellichaam van een neuron naar doelcellen draagt.
een zenuwimpuls, ook wel een actiepotentiaal genoemd, is het signaal dat wordt overgedragen langs een axon dat zenuwcellen in staat stelt te communiceren en verschillende systemen in een organisme te activeren. Een actiepotentiaal kan ontstaan in de hersenen en resulteren in een bewuste beweging of ze kunnen betrokken zijn bij een reflexboog die onafhankelijk is van de hersenen. Een actiepotentiaal kan worden overgedragen aan een spiercel, waardoor spiercontractie.
neuronen hebben de eigenschap actiepotentialen te kunnen genereren. Het actiepotentieel wordt veroorzaakt door een verandering in de permeabiliteit van het neuronmembraan. Deze verandering in permeabiliteit resulteert in een verandering in distributie van ionen over het membraan. De verandering in distributie van ionen leidt tot een verandering in elektrische last (potentieel) over het membraan. Veranderingen in elektrische potentiaal kunnen experimenteel worden gedetecteerd als het actiepotentiaal langs het axon van het neuron gaat.
veranderingen in de elektrische potentiaal van het axon kunnen worden gedetecteerd en weergegeven op een registratieapparaat in het laboratorium met behulp van een van de twee basismethoden:

1. Intracellular registratie: twee elektroden worden geplaatst aan weerszijden van het membraan van het neuron, één binnen de cel en één buiten. Een verandering in potentieel verschil tussen de elektroden wordt geregistreerd aangezien de ionen zich in en uit de cel bewegen. Deze techniek wordt uitgevoerd op grote, geïsoleerde neuronen.
2. Extracellulaire opname: aan de buitenkant van het neuron wordt een paar elektroden geplaatst. Een verandering in potentieel tussen de twee elektroden wordt gemeten en geregistreerd als bifasisch AP aangezien het actiepotentieel langs het neuron overgaat. Deze methode meet geen ionenstroom maar het nettoverschil in potentieel aangezien het actiepotentieel eerst één elektrode en dan de andere elektrode overgaat. Deze methode heeft het duidelijke voordeel dat het kan worden gebruikt om de passage van een actiepotentieel (zoals in een spier) van het oppervlak van het lichaam te registreren en ook wordt gebruikt om actiepotentieel van gehele zenuwen te registreren (in tegenstelling tot het hebben om individuele neuronen te doorboren).

in het laboratorium van vandaag zult u extracellulaire opname gebruiken: in de kikker en de mens zult u opnemen vanuit een zenuw, een bundel neuronen met elk een eigen drempel, in plaats van vanuit een enkel neuron. In de regenworm, zal je opnemen van gigantische axonen. Je visualiseert niet alleen het actiepotentiaal, maar bepaalt ook de snelheid waarmee het actiepotentiaal zich in elk van deze organismen langs een zenuw verplaatst.

Powerlab zal fungeren als een digitale 2-kanaals oscilloscoop. De tijd wordt geregistreerd op de x-as en de spanning op de Y. Tijd en gevoeligheid kunnen op elk kanaal worden aangepast. Een handige functie van PowerLab is dat de operator een sweep van het scherm kan starten (dat wil zeggen dat de computer begint met sampling). Dit staat bekend als de TRIGGER. Met de trigger kunt u de periode direct na een gebeurtenis vastleggen. Het is mogelijk om de computer te “activeren”, om te beginnen met het verzamelen van gegevens (te vegen), op hetzelfde moment als de stimulus wordt toegepast. Zo kan een verslag van de stimulerende gebeurtenis en het tijdstip waarop de actiepotentiaal verschijnt (latentie) worden gemeten. In deze toepassing van de trekker, is de computer ingesteld om een enkele sweep op stimulatie van de menselijke achillespees evenals de kikkerzenuw te genereren. Tijd kan gemeten worden op de x-as. U gebruikt kanaal 1, waar de trigger wordt weergegeven, en Kanaal 3, waar de reacties worden opgenomen. De PowerLab set up is iets anders voor de aardworm Reus Axon opname, maar de theorie is vergelijkbaar.

de geleidingssnelheid van de actiepotentiaal wordt bepaald door de afgelegde afstand (lengte van de zenuw in m) te meten en te delen door de tijd (sec) die nodig is om de reflexboog te voltooien, ook wel de latentie genoemd.

geleidingssnelheid = afstand(M) / tijd (sec).

  1. het meten van de afstand is relatief eenvoudig. Het kan worden gedaan met behulp van een liniaal of een meetlint.
  2. tijdmeting is ingewikkelder. Actiepotentialen reizen zeer snel; daarom zijn de te meten tijden zeer klein en vereisen meer verfijnde instrumentatie. De computer met PowerLab is, net als de oscilloscoop, bij uitstek geschikt om gebeurtenissen te meten die in een zeer korte tijd plaatsvinden.

de geleidingssnelheid van een bepaald neuron is gecorreleerd met zenuwdiameter en myelinatie. Myeline, een lipide-rijke stof, werkt als isolatie om de geleidingssnelheid van gewervelde neuronen te verhogen. Ongewervelde dieren missen gemyelineerde neuronen en de geleidingssnelheid van hun actiepotentialen neemt voornamelijk toe als gevolg van een verhoogde Axon-diameter. Veel ongewervelde dieren hebben gespecialiseerde “gigantische” axonen, zoals de regenworm, die actiepotentialen zeer snel uit te voeren.

maak gegevenstabellen in uw labo notebook om de drempelspanning vast te leggen die nodig is om een actiepotentiaal op te wekken bij de kikker en de regenworm (zowel mediale als laterale Reuzenaxon). Van de drie getimede proeven registreren de tijd tussen stimulus artefact en actiepotentiaal (latentie in ms) en meten de afstand zoals beschreven in de handleiding. Bereken de geleidingssnelheid in m / sec voor de menselijke heupzenuw, de kikkerzenuw en de mediale en laterale reuzenaxonen van de aardworm en voer uw gegevens in op het klassegegevensblad. Bereken de gemiddelde geleidingssnelheid voor elk van de klassengegevens.

Threshold.jpg
Geleidingssnelheidstabel v2.jpg

geleidingssnelheid in een menselijke reflexboog

wanneer de achillespees wordt uitgerekt nadat met een Reflexhamer is getikt, wordt de geïnduceerde actiepotentiaal over het been naar het ruggenmerg geleid en weer naar beneden geleid waar de gastrocnemius (kuit) spier samentrekt. Om de geleidingssnelheid te bepalen, wordt de afstand die het actiepotentiaal aflegt gemeten en wordt de tijd tussen het tikken van de pees en de samentrekking van de spier gemeten met behulp van PowerLab en ADinstruments software.

De Reflexboog: Een reflexboog wordt geïnitieerd door het strekken van een pees, een actie die stretchreceptoren in de spier stimuleert. Die rek receptoren reageren door het initiëren van een actiepotentiaal in sensorische neuronen. Het actiepotentieel reist door die sensorische neuronen naar het ruggenmerg waar ze direct synapsen met motorische neuronen. De excitatie gaat terug naar de gastrocnemius spier waar het samentrekking van de spier veroorzaakt. Aldus wordt de pees die aanvankelijk werd uitgerekt door samentrekking teruggebracht tot zijn oorspronkelijke lengte, die de reflexboog voltooit.
de functie van dit type reflexboog is het handhaven van de houding. Spieren strekken zich voortdurend uit en keren terug naar hun oorspronkelijke lengte zonder tussenkomst van de hersenen. Merk op dat deze reactie monosynaptisch is. Het sensorische neuron synaps direct met het motorische neuron in het ruggenmerg; er is geen interneuron betrokken.
het elektromyogram (EMG) is een opname van een spiercontractie die van de huid boven een spier kan worden genomen. Een actiepotentiaal reist langs een zenuw, door een zenuw / spierverbinding en in een spier. In de spier verspreidt het actiepotentieel zich door de spier waardoor de spiervezels samentrekken. De passage van de actiepotentialen kan worden waargenomen door elektroden geplaatst op de huid boven de spier, die wanneer versterkt (zoals in het ECG) kan worden weergegeven op een computerscherm.
de Reflexhamer: is een percussiehamer die wordt gebruikt om reflexen te testen. De hamer die je gaat gebruiken is zo aangepast dat wanneer hij de pees raakt, de hamer een circuit sluit en een klein signaal genereert. Dit signaal wordt gebruikt om een sweep door de computer te activeren.

experimentele Procedure

  1. plaats de proefpersoon op de rand van de laboratoriumbank zodat haar benen vrij hangen. Bevestig twee pre-jelled elektroden aan het lichaam van de kuitspier (gastrocnemius), een beetje links of rechts van de middellijn. De twee elektroden moeten zo worden geplaatst dat hun buitenranden elkaar in een verticale lijn op de spier raken (zie figuur hieronder). Een derde grondelektrode moet op het enkelbeen worden geplaatst. Bevestig de kabels aan de juiste elektroden: groen voor grond (op het enkelbeen) en zwart-wit aan de kuitspier.

111F11.HumanReflexArc.jpg
C

EMG kanaal instelling F15.pngEMG-bemonstering F15.png

Fig. 9.1. A, Diagram van een reflexboog in een mens. Wanneer de stretchreceptor wordt gestimuleerd door de hamer, gaat het actiepotentiaal via de sensorische vezels naar het ruggenmerg en synapsen op de motorische vezels.het actiepotentiaal gaat vervolgens terug naar de zenuw om de spiercontractie te veroorzaken die we als reflex waarnemen. B, twee elektroden worden geplaatst op de kuit, dicht bij elkaar zoals getoond. De derde elektrode moet op een benig oppervlak worden geplaatst, zoals de kniekap of enkel. C, LabChart 8 installatiebestanden.

om een EMG-opname te maken:

  1. Open het bestand: “EMG test settings”. Als u dit bestand niet kunt vinden op het bureaublad, vraag het dan aan uw instructeur.
  2. om een EMG te verzamelen: de proefpersoon moet zitten en haar benen en voeten ontspannen. Druk op START in de rechterbenedenhoek van het scherm. Til voorzichtig de tenen van het onderwerp om de achillespees op de achterkant van haar been te rekken, en stevig rap de achillespees van het onderwerp met het zwarte rubberen deel van de hamer. Neem meerdere EMG ‘ s op door het zwarte rubberen deel van de hamer op de achillespees te slaan en de reflex in Ch te observeren. 3. Herhaal tot je drie EMG ‘ s hebt.
  3. wanneer u een goede set van 3 EMG ‘ s hebt (zie Fig. 9.2), meet de tijd met de cursor vanaf het begin van de stimulus (op nul) tot het midden van de eerste piek. Herhaal op verschillende opnames en gemiddelde drie.
  4. Registreer gegevens in uw laboratoriumhandleiding en op de spreadsheet die door uw instructeur wordt verstrekt.
  5. meet met het meetlint de afstand in centimeters van het inslagpunt op de achillespees van de patiënt tot het punt waar de ribbenkast de wervelkolom raakt (d.w.z. de lengte van de sensorische zenuw) en vervolgens tot aan de eerste elektrode op de gastrocnemius (d.w.z. de lengte van de motorische zenuw). Raadpleeg de PowerPoint-dia van uw instructeur voor een diagram van hoe u deze meting kunt uitvoeren.
  6. Registreer de lengte en bereken vervolgens de geleidingssnelheid en registreer deze.

EMG-Sample-F15.png

Fig. 9.2. Een monster van een EMG opgenomen op de computer met behulp van PowerLab. Het trigger signaal staat op Input 1 (Ch 1) op tijd 0 en de EMG staat op Ch 3 (RAW signaal genoemd). Plaats de markering ” M ” aan de bovenkant van de eerste piek van de EMG. De weergegeven tijd geeft de tijd aan die verstreken is tussen het triggersignaal en de gastrocnemius-respons, d.w.z. de tijd die nodig is voor de actiepotentialen om zich langs de sensorische neuronen van de heupzenuw naar het ruggenmerg en langs de motorische neuronen naar de eerste (bovenste) elektrode van de gastrocnemius te verspreiden.

geleidingssnelheid in een Kikkernikkelzenuw

een actiepotentiaal wordt in de ontleed nervus ischias van een kikker (Rana pipiens of Xenopus laevis) geïnitieerd door een stimulator (een apparaat voor het leveren van precieze elektrische stimuli). De actiepotentiaal reist langs de zenuw en wordt gedetecteerd als het twee externe elektroden passeert (volgens methode 2 beschreven in de inleiding) en de gedetecteerde reactie wordt versterkt en weergegeven op het computerscherm. Het spoor op de computer van stimulus en reactie wordt veroorzaakt door de stimulus; tijd en afstand worden gemeten en de snelheid kan dan worden berekend.

Compound Action Potential: een zenuw is een verzameling van de axonen van vele neuronen. De axonen kunnen verschillende diktes hebben en daarom zullen hun actiemogelijkheden verschillende maten en snelheden hebben. De actiepotentialen, geregistreerd van de buitenkant van de zenuw (extracellulair) is bekend als een samengestelde actiepotentiaal, en vertegenwoordigt de som van de actiepotentialen afgevuurd door individuele neuronen. (zie Fig. 9.3 A).

111F11.FrogNerve.jpg

Fig. 9.3. A, Diagram van een bifasisch actiepotentieel als een extracellulaire opname van een zenuw. De stimulus wordt toegepast op het linker uiteinde van de zenuw. B, dorsale weergave van blootgestelde kikker links achter ledemaat en wervelkolom.
de heupzenuw is de grote zenuw die van het ruggenmerg naar de gastrocnemius-spier loopt. Het bevat zowel sensorische als motorische neuronen (het is de zenuw die wordt gestimuleerd wanneer u de menselijke achillespees rekt). In dit lab zal de kikker zijn verdoofd, geofferd, en dubbel geveld (zowel de hersenen en het ruggenmerg zullen zijn vernietigd). Het kan nodig zijn om de huid te verwijderen. Om de heupzenuw te ontleden

  1. scheid de rugspieren van de dij voorzichtig met uw vingers en gebruik een stompe glazen sonde om de witte heupzenuw en de bijbehorende bloedvaten te onthullen (zie Fig. 9.3 B). Bevrijd de zenuw uit het omliggende weefsel in de dij met behulp van een stompe glazen haak. Snijd spier-en bindweefsel rond de zenuw weg als u de zenuw uit de weg houdt. Probeer de zenuw niet uit te rekken en vermijd het aanraken van de zenuw met iets metaal om te voorkomen dat beschadiging van de zenuw.
  2. Houd de zenuw vochtig met Amfibieringen (een oplossing die ionen bevat in dezelfde concentratie als in het bloed van de kikker).
  3. bind een draad strak om de knie van de zenuw. Snijd dan de zenuw onder de snaar en zo dicht mogelijk bij de knie.
  4. til de zenuw zachtjes op door de draad op te tillen en ontleed vervolgens de zenuw tot zijn oorsprong in het ruggenmerg. Zorg goed voor deze dissectie, vooral in het bekkengebied. Houd de zenuw vochtig met Ringers tot klaar om te worden geplaatst in de zenuwkamer.

opzetten van de Zenuwkamer

  1. Open het frog CAP-bestand op het bureaublad. Plaats de zenuw voorzichtig over de eerste vijf of zes elektroden aan de linkerkant van de kamer (zie instructeur). Het zenuwuiteinde aan de linkerkant van de kamer moet het voorste uiteinde van de zenuw zijn. De voorste en achterste uiteinden van de zenuw zijn kleur gecodeerd met string. Raadpleeg uw instructeur als u niet zeker bent van de kleurcodering.
  2. bedek de zenuwkamer met het plastic deksel en zorg ervoor dat de zenuw nog steeds in contact is met de draden nadat u het deksel hebt gesloten. Sluit de stimulerende en opnameelektroden aan zoals u ziet in de foto ‘ s hieronder. U heeft ook een kopie van de foto in de blauwe map op uw bank. Controleer uw elektrode arrangement met uw instructeur voordat u verder gaat.

Kikkerzenuw Setup.jpg

om een samengestelde actiepotentiaal

  1. vast te leggen, moet u controleren of het bestand is ingesteld om te beginnen met een stimulatie van 0,05 V (pulshoogte). Om de zenuw bij deze begininstelling te stimuleren, drukt u op de startknop rechtsonder op het scherm.
  2. verhoog nu de pulshoogtespanning (stimulus) met intervallen van 0,05 V door op de pijl naar boven te klikken. Verander de max niet. waarden voor de herhaalsnelheid (vertraging) of de pulsbreedte (duur) voor dit deel van het experiment. Het enige wat je zal veranderen is de pulshoogte (spanning). Wanneer u op de pijl Omhoog klikt, zal de amplitude met 0,01 V toenemen met elke klik, dus u zult deze pijl meerdere keren moeten klikken. Druk op start en observeer het spoor op het scherm. Ga door met het verhogen van de spanning in 0.Stappen van 05 V.
  3. uiteindelijk moet bij de drempelwaarde de samengestelde actiepotentiaal verschijnen als een afbuiging in de basislijn.
  4. Registreer de drempelspanning (pulshoogte)
  5. blijf de spanning geleidelijk verhogen (maar verhoog deze nooit boven 1 V) totdat de amplitude van de samengestelde actiepotentiaal niet meer toeneemt (wat erop wijst dat de maximale # van zenuwvezels reageert) . Naarmate sterkere spanningen extra axonen stimuleren, zal het compound actie potentieel groeien in amplitude.
  6. wanneer u twee samengestelde actiepotentialen hebt die dezelfde piekamplitude bereiken (dichtbij als fijn), noteer dan de spanning.
  7. Kies een spanning die iets onder het maximum ligt. Genereer één actiepotentiaal bij deze spanning. Meet de tijd met de cursor vanaf het begin van de stimulus tot het midden van de eerste piek van de bifasische respons (zie figuur 9.4). Noteer dit als de latency (de vertraging tussen een stimulus en de initiatie van een AP) in uw gegevenstabel. Genereer nog twee actiepotentialen bij dezelfde spanning en registreer hun latentiewaarde.
  8. controleer de afstand tussen de tweede stimulerende elektrode en de eerste registratieelektrode (moet bij dit apparaat ongeveer 5 mm bedragen). Met behulp van deze afstand en uw geregistreerde latency waarden, bereken de geleidingssnelheid voor alle drie de proeven en gemiddelde uw resultaten om een gemiddelde geleidingssnelheid te verkrijgen.

Hoe kan de respons in amplitude toenemen wanneer een actiepotentiaal” alle of geen ” eigenschappen heeft?

dit gesorteerde responsfenomeen illustreert de verschillen in drempel die bestaan tussen de verschillende grootte van vezels waaruit de zenuw bestaat. Onthoud, je neemt op vanuit een zenuw, een grote bundel neuronen, elk met een andere drempel. Als de stimuluspanning langzaam en soepel wordt verhoogd, kunt u discrete sprongen in de amplitude van het compound action potential waarnemen als verschillende drempelklassen van zenuwvezels worden “gerekruteerd”. Naarmate je de amplitude verhoogt, bereiken meer neuronen hun drempel en dragen ze bij aan de toename van de grootte van het compound action potential. Uiteindelijk, als de stimuluspanning wordt verhoogd, zal een punt worden bereikt wanneer de golfvorm van het actiepotentiaal stopt met veranderen. Op dit punt worden alle vezels in de zenuw die kunnen reageren op de stimulus gestimuleerd (Fig 9.4). Dit is een maximale reactie.

Record en sla al uw proeven op het bureaublad. Het is een goed idee om regelmatig gegevens op te slaan (Onder het bestand: opslaan als menu) –in de lab course folder op het bureaublad). Zorg ervoor dat uw dier en lab sectie op te nemen in uw bestandsnaam.

Frog APs for manual.jpg

Fig. 9.4. Een voorbeeld van compound action potentials (upper trace) bij toenemende stimulus sterkte (lower trace) opgenomen van de ischias zenuw van een kikker met behulp van de software LabChart 8. Sporen die overeenkomen met meerdere opnames worden over elkaar heen gelegd. Stimuli van grotere sterkte produceren bifasische samengestelde actiepotentialen van grotere amplitude.

om de refractaire periode
te meten wanneer twee stimuli in zeer snelle opeenvolging op de zenuw worden aangebracht, kunnen sommige of alle neuronen waaruit de zenuw bestaat niet op de tweede stimulus reageren omdat de natriumkanalen geïnactiveerd zijn. Ze zijn ongevoelig voor de tweede stimulus.

  1. Open het frog refractory-bestand. De pulshoogte (stimulusamplitude/spanning) is in dit bestand vooraf ingesteld op 0,5 V en zal tijdens dit gedeelte van het experiment niet worden gewijzigd.
  2. Controleer of de pulsspleetbreedte (het interval tussen de twee stimulipulsen) is ingesteld op 7 ms om te starten.
  3. druk op start.
  4. twee actiemogelijkheden van dezelfde hoogte, gescheiden door 7 ms (Fig. 9.5).
  5. verlaag nu de (pulse gap width (stimulus interval) tussen de twee stimuli met stappen van 0,5 ms door op de pijl-omlaag te klikken. Naarmate u de pulsspleetbreedte tussen de stimuli verlaagt, begint de amplitude van het tweede actiepotentiaal te verminderen. Noteer de spleetbreedte wanneer u deze afname waarneemt. Deze vertraging vertegenwoordigt de relatieve refractaire periode van de zenuw. Wat gebeurt er?
  6. blijf de pulsgapbreedte verkleinen. Merk op dat het nodig kan zijn om met kleinere intervallen te verminderen als de pulsen dichter bij elkaar komen.
  7. Noteer het moment waarop het tweede actiepotentiaal verdwijnt, alle neuronen zijn ongevoelig voor de tweede stimulus.

kikker RP voor handleiding.jpg

Fig. 9.5. Samengestelde actiepotentialen gestimuleerd door tweelingpulsen tonen de vuurvaste periode in de heupzenuw van een kikker. Sporen verkregen uit meerdere opnames met LabChart 8 worden over elkaar gelegd.

Geleidingsdrempel en snelheid bij Aardwormzenuwen

opmerking: Delen van deze procedure zijn gewijzigd op basis van een protocol dat is opgesteld door personeelsleden van een instrument, en voorzien van de aankoop van de PowerLab-instrumenten.
regenwormen hebben een reuzenvezelsysteem bestaande uit één enkele mediane reuzenvezel en twee laterale reuzenvezels. De twee laterale vezels zijn verbonden door talrijke dwarsverbindingen en functioneren als een enkel axon.

experimentele opzet

  1. Plaats uw regenworm in een petrischaaltje met 10% ethanol in regenworm zoutoplossing. Laat de aardworm volledig verdoofd worden (dat wil zeggen totdat het stopt met bewegen, zelfs wanneer gesondeerd); controleer na 10 minuten en zeer 5 minuten daarna. plaats de worm op de ontleedbak en raak de kop of staart aan, als je beweging ziet plaats de worm terug in de anaethesie.
  2. controleer de draadverbinding (zie Fig. 9A)
  3. plaats de regenworm dorsaal (donker) naar boven op uw ontleedbak. Plaats het kopstuk (met het clitellum ) aan de bovenkant van het bakje (fig 9.6). Wees voorzichtig om de regenworm niet te ver uit te rekken, omdat dit het zenuwkoord kan beschadigen.
  4. plaats twee stimulatorpennen ongeveer 2 cm onder het clitellum. Verbind de stimulatorkabels die van het machtslaboratorium aan de het ontleden spelden komen. De negatieve lood (kathode, zwart) moet achter de positieve lood (anode, rood).
  5. de drie opnameelektroden (G, R1, R2) zijn gechloreerde Zilverdraden. Steek ze voorzichtig in de worm zoals aangegeven in Fig. 9.6B in de Orde van G, R1, R2 in het centrale deel van het lichaam van de worm onder de negatieve elektrode. De pinnen kunnen vrij dicht bij elkaar worden geplaatst. Plaats de R2-elektrode ongeveer 0,5 tot 1 centimeter achter de R1-elektrode.
  6. meet de afstand in mm tussen de tweede stimulerende elektrode (zwarte kathode) en de eerste registratieelektrode (R1) en registreer deze meting. Dit is de afstand die de actiepotentiaal reisde tijdens de opname.
  7. het kan nodig zijn om de hele regenworm periodiek te bevochtigen met de 10% ethanol/zoutoplossing met behulp van een pipet. Dep overtollige zoutoplossing uit de worm met een papieren Weefsel.

Een Worm PowerLab-Instelling.jpg
BWormelektrodeopstelling 1.jpg

Fig. 9.6. Een powerlab setup om aardworm actiepotentiaal B vast te leggen. Anatomie van de regenworm en plaatsing van de elektrode op de regenworm

bepaling van de drempelspanning voor de mediale en laterale axonen, berekening , geleidingssnelheid en observatie van de werving van het laterale reuzenaxon

  1. Open WormAP-bestand op het bureaublad van de computer.
  2. klik op start. Scope zal één sweep tonen. De vervorming net na het begin van de sweep wordt veroorzaakt door de verspreiding van een deel van de stimulus spanning naar de opname elektroden. Het wordt het stimulus-artefact genoemd.
  3. verhoog de output met 0.05 volt door op de Amplitude pijl omhoog in de Stim te klikken. Paneel.
  4. Herhaal stap 2 en 3 waarbij de Amplitude met 0,05 volt wordt verhoogd bij elk onderzoek totdat u een respons van het mediane reuzenaxon ziet.
  5. wanneer u een respons ziet van het mediane reuzenaxon (Fig. 9.7), noteer de drempelwaarde. Als u geen reactie ziet en u een stimulus van meer dan 1V gebruikt, vraag dan om hulp.
  6. verhoog de stimulus totdat u een tweede reactie met een langere latente periode waarneemt (Fig. 9.7). Klik op Stoppen en noteer deze drempel voor de laterale reuzenvezels.
  7. Sla uw bestand op het bureaublad op.
  8. om de geleidingssnelheid te berekenen, plaatst u de Marker aan het begin van het stimulusartefact en de Golfvormcursor op de actiepotentiaalpiek (Fig. 9.7). Lees het tijdsverschil in het bovenste gedeelte van het Scope-venster.
  9. deel de (eerder gemeten) afstand tussen de stimulus en de registratieelektroden door het tijdsverschil tussen de pieken om de geleidingssnelheid in mm/ms te bepalen, die gemakkelijk in m/s kan worden omgezet.

WormAPa2.jpg
Fig. 9.7. Elektrofysiologische opname van het ventrale zenuwkoord van de aardworm, met actiepotentialen van de mediane en laterale reuzenvezels.

10. Gooi uw bestand weg of plaats het in de map voor uw lab-sectie.

opdracht

materiaal in dit laboratorium zal worden opgenomen in het lab practical (samen met het materiaal uit labs 7 & 8) . Zorg ervoor dat u begrijpt de concepten, berekeningen, statistische tests, en grafisch behandeld.

resultaten:
gebruik gegevens uit de hele klasse om de gemiddelde geleidingssnelheden van de drie vandaag onderzochte zenuwen te vergelijken. Voer een ANOVA het vergelijken van de snelheid van geleiding (m / s) van de zenuwen van de mens, kikker, en regenworm. Is het verschil significant op het 0,05 waarschijnlijkheidsniveau? Lijkt er een verschil in geleidbaarheid te zijn in de zenuwen van de mens, kikker en regenworm?

discussie:
gegevens verzameld in dit laboratorium kunnen worden vergeleken met eerder gedocumenteerde geleidingssnelheden van de zenuwen van een grote verscheidenheid aan gewervelde en ongewervelde dieren. Zijn uw gegevens consistent met deze bredere dataset?

FiberDiameter.jpg

Fig. 9.8. Snelheid van zenuwimpulsgeleiding als functie van vezeldiameter bij verschillende dieren. Gewijzigd van Bullock en horror, 1965, structuur en functie van het zenuwstelsel van ongewervelde dieren. W. H. Freeman and Company.

andere laboratoria in deze sectie

Lab 7: anatomie van vertebraten
Lab 8: circulatie en ademhaling van vertebraten

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.