Effect van langdurige behandeling met azithromycine, claritromycine of Levofloxacine op Chlamydia pneumoniae in een continu-infectie Model | Jiotower
discussie
methoden die momenteel worden gebruikt voor het kweken van C. pneumoniae en in in vitro gevoeligheidsstudies zijn niet analoog aan de infectie aangezien deze in vivo optreedt. We stelden een in vitro model op van continue C. pneumoniae infectie met HEp-2 cellen die al meer dan 4 jaar aanhoudend geïnfecteerd waren zonder toevoeging van verse chlamydia of gastheercellen, toevoeging van cycloheximide of centrifugatie (23). Ultrastructurele studies van de continu geïnfecteerde cellen brachten de aanwezigheid aan het licht van een subpopulatie van abnormale insluitsels, die qua uiterlijk zeer vergelijkbaar waren met persisterende vormen geïnduceerd na behandeling met gamma interferon (22). Daarom kan dit model de interacties tussen chlamydia en gastheercellen nauwkeuriger weergeven en dus een beter model zijn voor in vitro gevoeligheidsstudies van C. pneumoniae.De resultaten van deze studie toonden aan dat langdurige behandeling met azithromycine, claritromycine en levofloxacine in concentraties die werden bereikt in de epitheliale vochtwand verminderde maar C. pneumoniae niet elimineerde uit continu geïnfecteerde gastheercellen.Galasso en Manire (7) waren de eerste onderzoekers die een continu-infectiemodel gebruikten voor het testen van antibioticaactiviteit. Zij gebruikten HeLa cellen continu besmet met Chlamydia psittaci om het effect van penicilline, tetracycline, en chlooramfenicol te bepalen. Ze vonden dat 500 U penicilline / ml onderdrukte de chlamydiale groei, maar zelfs langdurige behandeling voor 100 dagen niet om het organisme te elimineren. Meer dan 14 dagen behandeling met 10 µg tetracycline/ml of 21 dagen met 25 en 100 µg chlooramfenicol/ml was nodig om chlamydiale groei tot niet-detecteerbare waarden te onderdrukken. Dreses-Werringloer et al. (6) onlangs gemelde soortgelijke waarnemingen over het effect van ciprofloxacine en ofloxacine op vastgestelde (2 tot 3 dagen postinoculatie) C. trachomatis infectie. Zij stelden vast dat beide geneesmiddelen, in concentraties die de minimale bactericide concentratie (0,5 µg ciprofloxacine/ml, 1,0 en 2,0 µg ofloxacine/ml) overtroffen, C. trachomatis uit geïnfecteerde HEp-2-cellen niet konden uitroeien en ook persisterende infectie veroorzaakten die gekenmerkt werd door een laag aantal kleine afwijkende insluitsels die aanwezig waren gedurende 20 dagen kweek. Nadat ciprofloxacine 10 of 14 dagen na de infectie uit de media was verwijderd, keerde de aanhoudende chlamydia terug naar duidelijke groei.
de resultaten van deze studie brengen enkele belangrijke kwesties naar voren met betrekking tot het gebruik van antibiotica, waaronder azithromycine, voor secundaire preventie van cardiale morbiditeit (1, 10, 13). De doseringen van azithromycine die worden gebruikt zijn 500 of 600 mg / dag gedurende 3 en 6 dagen gevolgd door wekelijkse doses van 500 tot 600 mg gedurende perioden van 3 maanden tot 1 jaar. Op basis van de hier gepresenteerde gegevens lijkt het onwaarschijnlijk dat deze doseringsschema ‘ s C. pneumoniae uit een intravasculaire focus zouden elimineren. De standaard ademhalingsdosering van 1.5 g azithromycine gedurende 5 dagen had slechts 70 en 83% werkzaamheid in het uitroeien van C. pneumoniae uit de nasofarynx van respectievelijk cultuurpositieve volwassenen en kinderen met buiten de gemeenschap verworven pneumonie (28). Gegevens zijn vergelijkbaar voor andere antibiotica. Block et al. (3) bleek dat een 10-daagse behandeling met erytromycine of claritromycine suspensie C. pneumoniae uit de nasofarynx uitroeide bij respectievelijk 86 en 79% van de cultuurpositieve kinderen met in de gemeenschap verworven pneumonie, ondanks het feit dat claritromycine in vitro vier keer actiever was (15). Uit de resultaten van twee onderzoeken naar longontsteking bij volwassenen, waarin levofloxacine en moxifloxacine werden geëvalueerd, bleek dat eradicatiepercentages van 70 tot 80% (16, 17) bedroegen. Dessus-Babus et al. onlangs beschreven de inductie van resistentie tegen ofloxacine en sparfloxacine in Chlamydia trachomatis na het herhaaldelijk overgaan van het organisme in subinhibitieve concentraties van deze geneesmiddelen (5). Antibioticaresistentie is nog niet beschreven voor C. pneumoniae. Echter, de MICs van drie isolaten van C. pneumoniae, verkregen bij twee patiënten met pneumonie die met azithromycine werden behandeld, namen na de behandeling verviervoudigd toe, hoewel ze nog steeds binnen het bereik lagen dat als gevoelig voor het geneesmiddel werd beschouwd (28). Het is niet duidelijk of het een geïsoleerde gebeurtenis was of een mogelijke ontwikkeling van doorzettingsvermogen suggereerde. Bovendien kan toediening van azithromycine eenmaal per week leiden tot langdurige blootstelling aan subinhibitieve geneesmiddelspiegels, wat leidt tot de ontwikkeling van resistentie bij andere respiratoire bacteriën, met name Streptococcus pneumoniae (24, 26).
het bestaan van persistentie werpt ook een apart belangrijk probleem op voor de behandeling van met C. pneumoniae geassocieerde ziekten. Persisterende vormen vermenigvuldigen zich over het algemeen niet of hebben een verminderde activiteit en zijn daarom mogelijk niet vatbaar voor antibiotica. Het is heel goed mogelijk dat de 20 tot 30% van microbiologische mislukkingen in gerapporteerde C. pneumoniae behandelingsstudies (3, 16, 17, 18) en het vermogen van C. pneumoniae om antibioticabehandeling in onze experimenten te overleven direct gerelateerd zijn aan de persistente toestand.
C. pneumoniae kan de productie van cytokines, chemokines, en adhesiemolecules in diverse endothelial en epithelial cellijnen bevorderen (8, 9, 20, 25, 27). Deze immunologisch actieve molecules kunnen ontstekingsproces veroorzaken en in stand houden dat een essentiële rol in de pathogenese van atherosclerose kan spelen (30). Voorlopige gegevens toonden een hogere productie van sommige cytokines aan in het continu-infectiemodel in vergelijking met primaire culturen (27). In deze studie stimuleerde C. pneumoniae een significante aanmaak van IL-6 en IL-8 in de continu geïnfecteerde HEp-2 cellen. Deze cytokines zijn aangetroffen in vezelachtige plaques die wijzen op hun betrokkenheid bij de ontwikkeling van atherosclerose (31).
macroliden en tetracyclinen hebben ontstekingsremmende eigenschappen, onafhankelijk van hun antimicrobiële activiteit (19, 21, 32). Van azitromycine en claritromycine in concentraties van 1, 5 en 10 µg/ml is aangetoond dat ze in verschillende mate de productie beïnvloeden van IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10, granulocyt-macrofaag koloniestimulerende factor en TNF-α door humane monocyten (21). Het opmerkelijkste is dat azithromycine resulteerde in een significante afname van IL-1a en TNF-α bij 100% van de individuen en dat behandeling met claritromycine resulteerde in een significante afname van IL-6 en TNF-α bij respectievelijk 60 en 86% van de individuen. Evenzo is een verlaging van de 6-keto-prostaglandine F1a -, NO2 -, TNF-α -, IL-1β-en IL-6-spiegels waargenomen bij muriene macrofagen die werden behandeld met 5 tot 80 µM azitromycine, claritromycine, roxitromycine en erytromycine (19). Hoewel in deze studie de behandeling met alle drie de antibiotica de niveaus van IL-6 en IL-8 in de continue culturen verlaagde, bleek dit effect Primair Secundair te zijn aan de antichlamydiale activiteit, aangezien de niveaus van cytokines correleerden met de titers van C. pneumoniae.
