Vrije radicalen aaseters van Cnidium officinale Makino en Ligusticum chuanxiong Hort. methanolzuurextracten | Jiotower
resultaten en discussie
verschillende pathologische voorvallen, zoals het ontstekingsproces, coronaire arteriële aandoeningen en verouderingsverschijnselen, worden geassocieerd met het ontstaan van ROS. Zo hebben we in deze studie aangetoond dat extracten van C. officinale en L. chuanxiong ook antioxiderende eigenschappen bezitten, omdat ze de cellen konden beschermen tegen oxidatieve schade en ook de aanmaak van ROS konden remmen.
voor de TEAC-test toont Tabel 1 de antiradicale capaciteit van C. officinale en L. chuanxiong in een waterig systeem, gemeten door de Abts-radicalen te testen. De Abts-test is gebruikt om de totale antioxidantactiviteit in plantaardige materialen te meten. Zoals gebruikt door Rice-Evans en Miller, weerspiegelt TEAC het relatieve vermogen van waterstof of elektron-donerende antioxidanten om de Abts radicale kation te vangen in vergelijking met die van Trolox. In deze studie, C. officinale en L. chuanxiong in het bereik van 0-150 µg/ml vertoonde antiradicale activiteit, en de antiradicale activiteit van deze monsters nam toe met toenemende concentratie van de extracten, wat erop wijst dat C. officinale en L. chuanxiong een afvangactiviteit van vrije radicalen vertoonden. Zoals in Tabel 1 te zien is, werd het opruimingsvermogen van C. officinale en L. chuanxiong op Abts-radicaalkation vergeleken met dat van ascorbinezuur. Bovendien vertoonde C. officinale een duidelijk opruimend effect op ABTS-katieradicalen vergeleken met dat van de standaard, ascorbinezuur, bepaald door TEAC.
Table 1
Antioxidant activities of methanol extracts of C. officinale and L. chuanxiong
TEAC (mM TE/g) | ORAC (mM TE/g) | DPPH (mM TE/g) | |
---|---|---|---|
CO | 2.022 ± 0.538 | 0.484 ± 0.162 | 2.942 ± 0.495 |
LC | 1.249 ± 0.224 | 0.260 ± 0.015 | 4.658 ± 1.183 |
AAa | 0.828 ± 0.010 | 0.030 ± 0.018 | 1.332 ± 0.027 |
de waarden zijn gemiddelden ± SD van drie metingen. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: ascorbinezuur, TEAC: Trolox-equivalent antioxidantvermogen, ORAC: Oxygen radical absorbance capacity, DPPH: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl
ook Tabel 1 toont de ORAC van monsters. Het sterk fluorescerende eiwit, beta-phycoerythrin (PE), afkomstig van talrijke soorten rode algen, is gebruikt als het doelwit van schade door vrije radicalen. Peroxylradicalen die door de thermische ontleding van AAPH worden gegenereerd doven de fluorescentie van phycoerythrin, terwijl de toevoeging van een antioxidant die snel met peroxylradicalen reageert het verlies van fluorescentieintensiteit remt en deze remming evenredig is met de antioxidantactiviteit. De eindresultaten kunnen worden berekend aan de hand van de verschillen in gebieden onder de phycoerythrin-vervalkrommen tussen de blanco en een monster en worden uitgedrukt in Troloxequivalenten. In deze studie toonden de resultaten aan dat C. officinale en L. chuanxiong een antioxidantcapaciteit hebben met een vergelijkbaar profiel. Bovendien toonde de ORAC-test een duidelijke verhoging aan van het antioxidantgehalte in het C. officinale-extract in vergelijking met het ascorbinezuur, als standaard.
het stabiele radicale model van DPPH is een veel gebruikte, relatief snelle methode voor de evaluatie van de activiteit van vrije radicalen. Het effect van plantaardige antioxidanten op dpph radicale aaseters wordt verondersteld te zijn te wijten aan hun waterstof donerende vermogen. De afname van de absorptie van dpph-radicalen veroorzaakt door antioxidanten vanwege de reactie tussen antioxidantmoleculen en radicalen, vordert, wat resulteert in het opruimen van de radicalen door waterstofdonatie. Tabel 1 illustreert een significante afname van de concentratie van dpph-radicalen als gevolg van het opruimingsvermogen van de extracten en standaard van zowel C. officinale als L. chuanxiong. De activiteit van vrije radicalen nam ook toe met toenemende concentratie. Deze resultaten toonden aan dat beide extracten een merkbaar effect hebben op het wegvagen van vrije radicalen. Het methanolextract van L. chuanxiong toonde een sterkere dpph aaseters activiteit dan het C. officinale methanol extract in vergelijking met standaard. We gebruikten ascorbinezuur als standaard.
bovendien kan het vermogen om specifieke radicalen op te vangen worden gericht. Omdat verschillende ROS verschillende reactiemechanismen hebben, om de antioxidantactiviteit tegen een brede waaier van ROS volledig te bepalen, moet een uitgebreidere reeks analyses worden uitgevoerd. Superoxide anion (O2* -) radicaal is een belangrijke factor in biologische systemen. Om te bepalen of de remming van de NBT-reductie te wijten was aan de activiteit van superoxide-aaseters, werd een niet-enzymatisch systeem van superoxide-generatie gebruikt. In het PMS-NADH-NBT-systeem vermindert het superoxideanion, afgeleid van opgeloste zuurstof uit de koppelingsreactie van PMS-NADH, NBT. De afname van de absorptie bij 560 nm met antioxidanten duidt op de consumptie van superoxide anion in het reactiemengsel. Tabel 2 toont de procentuele remming van de vorming van superoxide-radicalen met 0-150 µg / ml van methanolextracten van C. officinale en L. chuanxiong in vergelijking met die van ascorbinezuur. C. officinale en L. chuanxiong methanol extracten vertoonden een dosisafhankelijke remming van superoxide radicalen. Zowel de extracten van C. officinale als L. chuanxiong hebben een sterke superoxide radical scavenging activiteit (IC50 = 96,30 en 93,85 µg/ml). Rekening houdend met de verkregen resultaten kan worden verwacht dat de methanolextracten van C. officinale en L. chuanxiong een antioxiderende werking hebben, hetgeen hier wordt aangetoond door het wegvagen van superoxide-radicalen. De IC50-waarden van al deze extracten waren hoger dan die van ascorbinezuur, waarin de IC50 werd bereikt bij een concentratie van 8,76 µg.
Tabel 2
Vrije radicalen en metalen chelerende activiteiten (IC50 µg/ml) methanol extracten van C. officinale L. chuanxiong
O2· | H2O2 | O· | GEEN· | Metalen chelatie | |
---|---|---|---|---|---|
CO | 96.259 ± 8.024 | 136.280 ± 2.307 | 119.442 ± 7.444 | 57.252 ± 8.973 | 138.425 ± 13.292 |
LC | 93.848 ± 9.529 | 136.318 ± 2.626 | 113.107 ± 8.890 | 76.502 ± 3.033a* | 17.451 ± 5.858a* |
AAb | 8.762 ± 4.569 | 8.053 ± 3.677 | 3.034 ± 0.191 | 9.885 ± 0.478 | 43.235 ± 8.543 |
Values are means ± SD of three measurements. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: Ascorbic acid, O2·–: superoxide radical, H2O2: hydrogen peroxide, OH·: hydroxyl radical, NO·: nitric oxide radical
het wegvagen van H2O2 door beide extracten kan worden toegeschreven aan hun fenolen, die elektronen aan H2O2 kunnen doneren, waardoor het aan water wordt geneutraliseerd. De H2O2-opruimcapaciteiten tussen de twee extracten kunnen worden toegeschreven aan hun elektronendonatiecapaciteiten. Het vermogen van beide extracten om H2O2 effectief af te vangen wordt weergegeven in Tabel 2, waarin het wordt vergeleken met die van ascorbinezuur als standaard. De extracten waren in staat om H2O2 op een concentratie-afhankelijke manier op te vangen. C. officinale en L. Chuanxiong-extracten (0-150 µg/ml) vertoonden IC50 van respectievelijk 136,28 en 136,32 µg/ml, terwijl ascorbinezuur 8,05 µg/ml vertoonde. De correlatie tussen de waarden van C. officinale en L. chuanxiong was statistisch niet significant. Hoewel H2O2 zelf niet erg reactief is, kan het soms cytotoxiciteit veroorzaken door hydroxylradicalen in de cel te veroorzaken. Het verwijderen van H2O2 is dus heel belangrijk in voedselsystemen.
de C. officinale en L. Chuanxiong methanol extracten werden ook geëvalueerd op hun vermogen om hydroxyl radicalen op te vangen met behulp van de deoxyribose degradatie assay. In deze studie toonden de resultaten aan dat alle monsters deoxyribose degradatie (0-150 µg/ml) konden remmen, met een vergelijkbaar profiel. De biochemische studies toonden aan dat C. officinale en L. chuanxiong een concentratie-afhankelijke remming van deoxyribose degradatie veroorzaakten. Bij de IC50-waarde vertoonden C. officinale (119,44 µg/ml) en L. chuanxiong (113,11 µg/ml) dezelfde potentie . De totale o-radicaalverzamelingscapaciteiten van elk extract werden vergeleken met die van ascorbinezuur.
plantenextracten werden gemeten en vergeleken voor hun activiteiten om vrije radicalen op te vangen tegen stikstofmonoxideradicalen. De no· scavenging activiteit van C. officinale en L. chuanxiong methanol extracten werd onderzocht met SNP als NO * donor. Geen vrijkomend uit SNP reageert met zuurstof om nitriet te produceren. Geen scavenger concurreert met zuurstof in reactie met NO * vrijgegeven uit SNP-oplossing in PBS. In dit onderzoek zijn uittreksels uit C. officinale en L. chuanxiong toonde geen * scavenging capaciteit, hoewel enkele verschillen werden opgemerkt. NO· scavenging activiteit van C. officinale was significanter dan L. chuanxiong. Deze remming kan ook het gevolg zijn van directe verwijdering van NO· door extracten. C. officinale had de grootste activiteit om geen radicale te blussen. De IC50-waarden waren 57,25 en 76,50 µg / ml voor respectievelijk C. officinale en L. chuanxiong.
de chelatie van ferroionen door extracten van C. officinale en L. chuanxiong werd geschat, waarbij ferrozine kwantitatief complexen vormt met Fe2+. In aanwezigheid van chelaatvormers wordt de vorming van dit complex verstoord, waardoor ook de vorming van de rode kleur wordt belemmerd die door het complex wordt verleend. Het meten van deze kleurverandering maakt het daarom mogelijk om de chelaatvormende activiteit van de coëxisterende chelator te schatten. In deze analyse, interfereerden zowel de extracten als de standaardantioxidantverbinding met de vorming van ijzer–ferrozinecomplex, die suggereren dat zij chelatieactiviteit hebben, die het ijzerion vangen alvorens het een complex met ferrozine kan vormen. Zoals blijkt uit Tabel 2 is de vorming van het Fe2+–ferrozinecomplex niet volledig in aanwezigheid van de methanolextracten C. officinale en L. chuanxiong, wat erop wijst dat beide extracten het ijzer cheleren. De absorptie van Fe2+ -ferrozinecomplex nam lineair af op een dosisafhankelijke manier (0-150 µg/ml). Het verschil tussen zowel de extracten van C. officinale en L. chuanxiong, en de controle was statistisch significant. De metaalchelatiecapaciteiten van methanolextracten van C. officinale en L. chuanxiong en ascorbinezuur (alle bij IC50 µg/ml) waren 138,43, 17,45 en 43.24, die een aanzienlijk verschil bleek te zijn tussen de extracten en de controles.
om de effecten van C. officinale en L. chuanxiong op de levensvatbaarheid van de cellen te bepalen, werden de N2A-cellen blootgesteld aan C. officinale en L. chuanxiong (50-500 µg/ml) gedurende een incubatietijd van 1 uur. in Figuur 1 wijst de MTT-test na 1 uur incubatie met C. officinale niet op een significant verschil in levensvatbaarheid in behandelde N2a-celculturen in vergelijking met de controlegroep. Bij MTT-test na 1 uur met L. chuanxiong werd een significante toename van de levensvatbaarheid waargenomen bij L. chuanxiong 500 µg / ml behandelde N2a-cellen in vergelijking met de controlegroep. Zoals getoond in Figuur 2, werd na 1 uur incubatie geen bepaling uitgevoerd in aanwezigheid van C. officinale en L. chuanxiong (50-500 µg/ml). Behandeling met L. chuanxiong verminderde de afgifte van NO niet significant in vergelijking met de controlegroep, maar 500 µg/ml C. officinale verminderde significant de afgifte van NO. Uit dit resultaat kan worden geconcludeerd dat de methanolextracten van C. officinale en L. chuanxiong in de gebruikte doses geen toxische effecten hebben.
Effect van methanolextracten van C. officinale en L. chuanxiong op de levensvatbaarheid van de cellen in N2a-cellen. De waarden zijn gemiddelden ± SD van drie metingen. * P < 0,05 vergeleken met onbehandeld normaal (ANOVA / Tukey)
Effect van C. officinale en L. Chuanxiong methanolic extracten op stikstofmonoxide release in N2A cellen. De waarden zijn gemiddelden ± SD van drie metingen. * P < 0,05 vergeleken met onbehandeld normaal. (ANOVA / Tukey)