Nocaute genético condicional

nocaute genético condicional em ratos são frequentemente usados para estudar doenças humanas porque muitos genes produzem fenótipos semelhantes em ambas as espécies. Nos últimos 100 anos, a genética laboratorial de ratos tem sido usada para isso porque os ratos são mamíferos que são fisiologicamente semelhantes o suficiente aos humanos para gerar testes qualitativos. Estes dois têm genes semelhantes que em 4000 genes estudados, apenas 10 foram encontrados numa espécie, mas não na outra. Todos os mamíferos partilhavam o mesmo ancestral comum há cerca de 80 milhões de anos.; tecnicamente falando, todos os genomas dos mamíferos são comparativamente similares. No entanto, em comparação entre ratos e humanos, suas regiões de codificação de proteínas dos genomas São 85% idênticas e têm semelhanças entre 99% de seus homólogos. Estas semelhanças resultam em fenótipos semelhantes a serem expressos entre as duas espécies. Seus genes são muito semelhantes aos dos humanos com 99% de homólogos sendo semelhantes. Juntamente com a produção de fenótipos semelhantes, bem como torná-los candidatos muito promissores para knockouts de genes condicionais. O objetivo do KOMP é criar mutações knockout nas células estaminais embrionárias para cada um dos 20.000 genes codificadores de proteínas em ratos. Os genes são eliminados porque esta é a melhor maneira de estudar a sua função e aprender mais sobre o seu papel em doenças humanas. Existem duas estratégias principais para o knockout genético condicional e essas são o direcionamento de genes ou recombinação homóloga e aprisionamento de genes. Ambos os métodos geralmente têm um vetor viral modificado ou um fragmento linear como o modo de transporte do DNA artificial para a célula-alvo ES. As células então crescem em uma placa de petri por vários dias e são inseridas nos embriões em estágio inicial. Por último, os embriões são colocados no útero da fêmea adulta, onde podem crescer até à sua descendência. Alguns alelos neste projeto não podem ser eliminados usando métodos tradicionais e requerem a especificidade da técnica de knockout do gene condicional. Outros métodos combinatórios são necessários para eliminar os últimos alelos restantes. O nocaute genético condicional é um procedimento demorado e existem projetos adicionais focados em eliminar os genes restantes do rato. O colaborador do projeto KOMP, Oliver Smithies, sem dúvida, forneceu o maior impacto científico sobre este gene alvo. Oliver recebeu o Prêmio Nobel de medicina devido a uma técnica que permite a capacidade de identificar funções nos genes e como usar o método “knockout” para excluir certos genes. Infelizmente, o pioneiro no gene targeting morreu aos 91 anos em 10 de janeiro de 2017. O KOMP projetado foi iniciado em 2006 e ainda está em andamento hoje. O repositório KOMP fornece incentivos para aqueles que participam nos projetos para retornar feedback para eles e aqueles que cumprem critérios específicos podem ser reembolsados 50% do custo de suas células de pesquisa.

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