enciclopedia proiectului embrion

tehnica de colorare Golgi, numită și reacția neagră după culoarea petei, a fost dezvoltată în anii 1870 și 1880 în Italia pentru a face celulele creierului (neuronii) vizibile sub microscop. Camillo Golgi a dezvoltat tehnica în timp ce lucra cuțesutul nervos, care a necesitat Golgi să examineze structura celulară sub microscop.Golgi a îmbunătățit metodele existente de colorare, permițând oamenilor de știință să vadă neuroni întregi pentru prima dată și să schimbe modul în care oamenii au discutat despre dezvoltarea și compoziția celulelor creierului. În secolul al XXI-lea, metoda de colorare a lui Golgi a continuat să informeze cercetările asupra sistemului nervos,în special în ceea ce privește dezvoltarea embrionară.

Golgi a început să publice cercetări despre sistemul nervos și structura sa celulară între 1870 și 1872, în timp ce lucra în laboratorul lui Giulio Bizzozero la Institutul de patologie generală de la Universitatea Pavia din Pavia, Italia. Ulterior, Golgi a devenit medic șef la Pio Luogo degli Incurabili (Spitalul pentru bolnavii cronici) din Abbiategrasso, Italia. A construit un laborator înBucătăria spitalului, unde a dezvoltat o nouă tehnică pentru a păstra țesuturile neuronale. Metoda de colorare a timpului săua implicat colorarea unui țesut organic cu carmin roșu sau hematoxilină neagră și expunerea acestuia la un reactiv, cum ar fi dicromatul de potasiusau acid cromic, care a întărit neuronii individuali. Oamenii de științăapoi a izolat celulele individuale separându-le sub microscopcu ace. Deoarece neuronii au o formă diferită de alțiicelule ale corpului, oamenii de știință au rupt adesea proiecțiile din celulă atunci când încercau să le separe. Aceste proiecții au inclus dendrite de tip web care primesc impulsuri neuronale și le transmit corpului celular și axonul lung de cealaltă parte a corpului celular care transmite aceste impulsuri.

încercările timpurii ale lui Golgi de a îmbunătăți colorarea au implicat infuzarea celulelor cu diferite metale pentru a vizualiza neuronii întregi și alte tipuri de țesuturi în detalii mai mari. După ce a experimentat expunerea celulelor la aur șimercur, Golgi a folosit azotat de argint. Pata de azotat de argint i-a permis să vadă neuronii în întregime, transformându-i în negru împotrivaun fundal galben pal. Culoarea neagră a neuronilor colorați a condus-Oel să-și numească tehnica la reazione nera (reacția neagră). Procesul de colorare a vopsit cinci până la zece la sută din proba cellsper, permițând Golgi să vadă structurile celulare individuale în mijlocul maselor de țesut nervos.

mecanismele tehnicii de colorare Golgi au fost similare cu cele ale acestoradin contemporanii săi. În primul rând,pentru a întări țesutul neuronal moale, Golgi a scufundat probe timp de până la patruzeci și cinci de zile într-o soluție de dicromat de 2,5% potasiu. Apoi, a înmuiat probele într-un 0.5LA 1% soluție de azotat de argint pentru diferite cantități de timppentru a vopsi unele dintre celule negre. Golgi a deshidratat apoi probele cu alcool și le-a tăiat la intervale de 100 microni, echivalentul grosimii unei bucăți de hârtie, suficient de largă pentru a păstra un neuronintact. Golgi a clătit apoi țesutul în terebentină și l-a atașatla un diapozitiv cu gumă clară damar pentru ao păstra. În acel moment, heviewed o probă la microscop.

Golgi a publicat rezultatele procedurii sale de colorare într-o hârtie din 1873 intitulată “Sulla Struttura della sostanza Grigia del Cervello”(despre structura materiei cenușii a creierului). În Germania, Franz Bollau publicat note despre opera lui Golgi în reviste germane, care s-au răspânditștiri despre opera lui Golgi. Golgi a continuat să-și folosească tehnica de colorarepentru a examina țesuturile neuronale și, ulterior, a acumulat constatarea sa inSulla fina Anatomia degli Organi Centrali del Sistema Nervoso(despre anatomia fină a organelor centrale ale sistemului nervos)publicată în 1885. În acel an, Eugen Bleuler, psihiatru din Elveția, a folosit metoda de colorare a lui Golgi și a prezentat specimene de cortex cerebral al lui Rabbit Societății Medicale din Z Otrivrich.

în anii 1880, Albert von K Okticlliker, fiziolog în Elveția,a studiat dezvoltarea creierului, a căilor neuro-senzoriale și a dezvoltării organelor interne la mamifere folosind tehnica de colorare Golgi. A învățat tehnica sub îndrumarea lui Golgiîn 1887 și a publicat “Ueber Golgi’ s Untersuchungen, den FeinerenBau des Centralen Nervensystems Betreffend” (despre studiile lui Golgi referitoare la structura mai fină a sistemului nervos Central) mai târziu în acel an. K elclliker a lăudat tehnica de colorare a lui Golgi, determinându-i pe mai mulți oameni de știință să o adopte.

în 1887, Santiago RAM a modificat tehnica introducând azotatul de argint în țesut în două absorbții mai scurte,mai degrabă decât într-o înmuiere lungă. Această modificare a îmbunătățit culoarea șidetalii ale petei. Cercetătorii ca Golgi și Ram au folosit-o pe Cajalrezultate din astfel de studii de colorare pentru a ajuta la dezvoltarea neurondoctrinei, care a afirmat că neuronii erau celule individuale care transmiteau impulsuri electrice unul către și unul de la celălalt. Această teorietransformate teorii ale structurii și funcționalității sistemului nervos. Oamenii de știință au confirmatteoria prin utilizarea tehnicii de colorare Golgi pentru a arăta golurile sau sinapsele dintre neuroni. Golgi și Ram au împărțit Premiul Nobel pentru Fiziologie sau Medicină în 1906.

În 1917, Pío del Rio Hortega, de asemenea, adaptate Golgi este metoda byfixing țesuturile cu formol, cloralhidrat, andpotassium cromat, care a scăzut timpul necesar pentru absolvă de colorare. În secolul al XXI-lea, cercetătorii au folosit metoda lui delr hecto Hortega de a vopsi celulele creierului non-neuronale, cum ar fi neuroglia și celulele cerebelului. După o perioadă de acalmie în popularitate între războaiele mondiale, tehnica de colorare Golgi și-a recăpătat popularitatea în anii 1930, odată cu introducerea microscopului electronic.

oamenii de știință au folosit tehnica de colorare a lui Golgi pentru a explica mai bine formarea neuronilor, a creierului și a căilor senzoriale. Golgistainingul a ajutat,de asemenea,oamenii de știință să clasifice organele din celule, inclusiv organele celulare musculare care stochează și transportă calciu, numit reticul sarcoplasmic, și organismele care modifică proteinele din celulele numite aparatul Golgi. Tehnica de colorare Golgi a rămas o metodă primară de colorareîn secolul al XXI-lea.