evaluarea in Vitro a argintului coloidal asupra funcției imune: activitatea Antilimfoproliferativă

rezumat

argintul coloidal (AgC) este utilizat în prezent de oameni și poate fi internalizat prin inhalare, injecție, ingestie și contact dermic. Cu toate acestea, există informații limitate despre activitatea imunologică; sunt necesare mai multe investigații folosind argint coloidal. În studiul de față, efectele AgC (17.5 ng/mL) asupra parametrilor imunologici (proliferare și imunofenotipare) utilizând celule mononucleare din sângele periferic uman (PBMC) și macrofage (fagocitoză) și citotoxicitate pe linii celulare canceroase de leucemie și limfom (1,75 până la 17,5 ng/mL) au fost investigate. S-a observat că AgC reduce semnificativ () producția de interleukină-2 (IL-2) și proliferarea indusă de fitohemaglutinină sau concanavalină a în PBMC fără a afecta viabilitatea celulară, dar cu efect citotoxic asupra celulelor canceroase. Producția de citokine IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, INF-XV și IL-17A și fenotipurile CD3+, CD3−CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ și CD16+CD56+ pbmc nu au fost afectate de AgC. Studiul de față demonstrează că argintul coloidal este inofensiv și netoxic pentru celulele sistemului imunitar, iar capacitatea sa de a interfera cu răspunsul imun prin scăderea proliferării celulare atunci când este stimulată cu mitogeni a demonstrat potențialul antilimfoproliferativ al AgC.

1. Introducere

bioactivitatea substanțelor a fost testată pentru a identifica proprietățile legate de acțiunea antitumorală sau antiproliferativă . Produsele cu această activitate au fost utilizate în practica clinică pentru tratamentul cancerului sau a bolilor legate de inflamații, cum ar fi autoimunitatea. Produsele din argint au fost folosite de mii de ani pentru igienă și ca agenți antimicrobieni. Din 1964, argintul coloidal (AgC) a fost înregistrat ca material biocid în Statele Unite ; în Mexic, AgC este utilizat în mod obișnuit ca dezinfectant al apei și alimentelor destinate consumului uman . În general, aceste produse sunt un amestec de nanoparticule metalice cu stare de oxidare de zero (Ag + 0) și săruri de argint cu stări de oxidare de Ag+1, +2 sau +3 . Există studii care indică faptul că proprietățile antibacteriene și antitumorale depind de stările de oxidare ale argintului . Nanoparticulele de argint (AgNPs) și ionii de argint (Ag+) au niveluri diferite de toxicitate datorită interacțiunilor lor superficiale de încărcare. Ionii de argint sunt mai toxici deoarece pot interacționa cu grupuri negative de proteine, producând modificări structurale pe membrana celulară și proteinele citoplasmatice, în timp ce AgNPs poate interacționa cu ADN-ul, provocând daune și blocări structurale; unele studii au propus că aceste nanostructuri pot produce toxicitate crescută la perioade lungi de expunere datorită faptului că AgNPs în soluții apoase poate oxida și elibera ioni de argint; utilizarea cu succes a soluțiilor de argint coloidal poate fi explicată prin acest mecanism de acțiune . Activitatea anticanceroasă a AgC asupra celulelor canceroase MCF-7 se datorează probabil apoptozei induse prin scăderea lactatului dehidrogenazei și creșterea activităților superoxid dismutazei; în schimb, în PBMC, activitatea lactatului dehidrogenazei a scăzut cu AgC, dar nu s-a corelat cu moartea celulară . Există puține informații științifice despre parametrii imunologici și de cancer la om cu privire la efectele argintului coloidal, ca amestec de nanoparticule și ioni, comparativ cu cercetarea nanoparticulelor de argint. Studiul de față a fost conceput pentru a explora proprietățile antiproliferative ale argintului coloidal și efectul său asupra imunofenotipării celulare, producției de citokine și fagocitozei asupra PBMC.

2. Materiale și metode

2.1. Argintul coloidal (AgC)

argintul coloidal stabilizat cu Grenetină a fost achiziționat de la MICRODYN (m Inquxico) ca soluție stoc 0,35%. S-a sterilizat prin filtrare (filtru 0,2 MMC, Millipore, SUA) și s-a diluat la o concentrație de 10,5 MMC/mL cu RPMI-1640, suplimentat cu 10% FBS pentru analize in vitro.

2.2. Reactivii

Fitohemaglutinina (utilizată în doze de 5%/ml) și concanavalina A (utilizată în doze de 5%/mL) au fost achiziționate de la Sigma-Aldrich (St.Louis, MO, SUA). Doxorubicina (LEMERY S. A. de C. V., M Inquxico) a fost depozitată sub formă de soluție stoc de 3,4 mM în RPMI 1640 la temperatura camerei și LPS (E. coli 0111:B4, Sigma-Aldrich) a fost preparată la 10 ng/mL pentru tratarea celulelor mononucleare din sângele periferic uman.

2.3. Caracterizarea AgC

morfologia argintului coloidal a fost investigată cu microscopul electronic de scanare cu emisie de câmp (sem) (Nova NanoSEM200 FEI). Soluția coloidală (50 XQL) a fost plasată pe o bandă de carbon și uscată la temperatura camerei. Măsurătorile dimensiunii și distribuției nanoparticulelor au fost determinate folosind o dispersie dinamică a luminii (DLS) efectuată de un nanosizer ns 90 Instrumente Malvern (Malvern Instruments, UK); distribuțiile de dimensiuni date de DLS au fost raportate ca procent de intensitate, iar rezultatele au fost prezentate ca valoare medie a cel puțin trei măsurători. Plasmonul de rezonanță măsurat prin UV-vis a fost observat într-un interval cuprins între 300 și 600 nm folosind spectrofotometrul NanoDrop 2000 (Thermo Fisher Scientific).

2.4. Izolarea celulelor mononucleare din sângele periferic (PBMC)

sângele de la voluntari umani sănătoși a fost obținut cu seringi heparinizate și plasat în tuburi sterile din polipropilenă. PBMC au fost izolate în continuare cu centrifugare Histopatică cu gradient de densitate 1.077 la 400 g timp de 30 min la 25 centimetric c (Sigma-Aldrich). PBMC au fost spălate de două ori cu mediu RPMI 1640 suplimentat cu 10% ser fetal bovin (FBS) și 1% soluție antibiotic-antimicotică (denumită mediu RPMI complet) la 250 g timp de 10 min la 25 C.

2.5. Viabilitatea celulară

PBMC a fost ajustată la 1 106 celule/mL în mediu RPMI complet și 17,5 ng/mL de argint coloidal a fost adăugat și incubat timp de 72 ore la 37 C și 5% CO2 atmosferă. Ulterior, supernatantul a fost îndepărtat prin centrifugare la 250 g. celulele au fost apoi spălate de două ori cu mediu RPMI complet. Viabilitatea celulară a fost determinată prin testul colorimetric de reducere a MTT, iar densitățile optice rezultate din producția de formazan au fost citite la 570 nm. Viabilitatea celulară a fost exprimată ca viabilitate procentuală în comparație cu martorul netratat. Rezultatele au fost date ca SD medie de treizeci de ani a trei experimente independente.

K562 (leucemie mieloidă cronică), MOLT-4 (leucemie limfoblastică acută), Ramos (limfom Burkitt) și l5178y (limfom) linii de celule canceroase au fost achiziționate de la American type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, SUA) și menținute în mediu RPMI complet. Celulele au fost cultivate la 37 C și 5% CO2 atmosferă. Liniile de celule canceroase (5% 103 celule/sondă) au fost placate pe plăci cu 96 de sonde și incubate timp de 24 de ore la 37% C în atmosferă de 5% CO2.

după incubare, mediul de cultură a fost îndepărtat și s-a adăugat argint coloidal la concentrații cuprinse între 1,75 și 17,5 ng/mL. Plăcile au fost apoi incubate timp de 5 ore la 37 C și 5% CO2 atmosferă. Ulterior, supernatantul a fost îndepărtat și celulele au fost spălate de două ori cu mediu RPMI 1640. Viabilitatea celulară a fost determinată prin metoda de excludere a albastrului de trypan, iar citotoxicitatea a fost exprimată ca inhibare a creșterii celulare de 50% (LD50) și 100% (LD100), comparativ cu controlul netratat. Rezultatele au fost date ca SD medie de treizeci de ani a trei experimente independente.

2.6. Testul citokinelor

Supernatanții din PBMC tratați cu AgC au fost analizați pentru nivelurile de citokine. Citokinele umane de tip IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-inkt, TNF-inkt și IL-17A au fost determinate prin citometrie în flux (Accuri C6, bd Bioscience, ca, SUA), utilizând setul de citokine CBA Th1/Th2/Th17 bd INKT (bd Bioscience, Bedford, MA, SUA), urmând instrucțiunile producătorului. Analiza setului CBA Flex a fost efectuată utilizând software-ul FCAP array v1.0 (Soft Flow Inc., SUA). Valorile proteinelor au fost convertite în standarde de proteine NIBSC / OMS pentru comparații ulterioare.

2.7. Proliferarea și testul IL-2

PBMC au fost izolate prin centrifugare cu gradient de densitate Histopatică, spălate de trei ori cu PBS și omogenizate în diluantul C la 106 celule/mL. Suspensia celulară a fost apoi diluată cu același volum de stoc de colorant 2,5 mM PKH26 (Sigma, St.Louis, MO) preparat în diluant C, incubat timp de 3 minute la temperatura camerei, apoi adăugat la un volum egal de FBS și incubat la temperatura camerei pentru încă 2 minute pentru a opri etichetarea, conform “Rimaniol et al., 2003 .”Ulterior, PBMC-urile au fost ajustate la concentrații de 1 hectolitru 106 celule/mL, tratate cu argint coloidal la o concentrație de 17,5 ng/mL, PHA sau Con A, și incubate timp de 72 ore la 37 CTC și 5% CO2 atmosferă; proliferarea celulară a fost determinată prin citometrie în flux. Cantitățile de conținut de IL-2 din supernatanții PBMC au fost măsurate cu ajutorul kitului ELISA de înaltă sensibilitate Il-2 uman (limita de detecție 0,4 pg/mL) și utilizate conform instrucțiunilor producătorului (eBiosciences, Viena, Austria).

2.8. Determinarea producției de nitriți / nitrați

nivelurile de nitriți și nitrați au fost măsurate prin reacția colorimetrică Griess folosind nitrat reductază (Kit de testare colorimetrică nitrat/nitrit Cayman, SUA) conform instrucțiunilor producătorului. Concentrațiile serice de nitriți / nitrați au fost exprimate în nM / 200 ecqutl.

2.9. Analiza citometriei în flux a antigenelor de suprafață celulară

PBMC au fost ajustate la concentrații de 1% 106 celule/mL și tratate cu argint coloidal la concentrații de 17,5 ng/mL, iar plăcile au fost incubate timp de 72 ore la 37% C și 5% CO2 atmosferă. Ulterior, celulele au fost colectate prin centrifugare la 600 g timp de 10 minute și un set de anticorpi CD3+ FITC/CD8+, PE/CD45+ și PerCP/CD4 APC sau un alt set de anticorpi CD3+ FITC/CD16+, CD56 pe/CD45 și PerCP/CD19 APC (bd Multitest IMK Kit) au fost adăugate și incubate 15 minute la temperatura camerei în întuneric. Eritrocitele au fost apoi lizate prin adăugarea a 450 oktl de soluție de liză 1x bd FACS okts și incubarea 15 minute la temperatura camerei în întuneric. Probele au fost apoi gata să fie analizate pe Citometru. Achiziția a fost realizată pe instrumentul Accuri C6 bd utilizând software-ul BD Multiset cu software-ul bd Worklist Manager. Închiderea automată a fost utilizată pentru analiza ușoară a fiecărei populații de subset.

2.10. Absorbția FITC-Dextran

celulele dendritice (DCs) au fost generate din PBMC și li s-a permis să adere la flacoane de cultură cu capac filtrant de 0,22 mm (TPP, Germania). După 2 ore la 37 C, celulele neaderente au fost îndepărtate, iar monocitele aderente au fost ulterior cultivate timp de 5 zile în RPMI-1640 suplimentate cu 10% FBS și 800 U/mL rhuGM-CSF (Peprotech, m Xixxico) și 50 ng/mL IL-4 (Peprotech, m Xixxico). Ulterior, celulele au fost tratate cu argint coloidal la concentrații de 17,5 ng/mL și incubate timp de 72 ore la 37 C și 5% CO2 atmosferă. Endocitoza DCs a fost evaluată prin incubarea a 1 106 celule cu 1 mg/mL FITC-Dextran (BD) timp de 30 min la 37 C. După spălare, celulele au fost analizate prin citometrie în flux. Controalele au inclus tuburi incubate cu FITC-Dextran la 4 C pentru a inhiba procesul endocitar și o absorbție bazală efectuată la punctul 0-time. Absorbția a fost cuantificată prin analiza FACS (10.000 de celule pe punct) . Viabilitatea a fost determinată de tehnica de excludere trypan blue.

2.11. Analiza statistică

rezultatele au fost evaluate de ANOVA și nivelurile medii de citokine între tratamente au fost comparate folosind testul Mann–Whitney.

3. Rezultate

3.1. Caracterizarea argintului coloidal

caracterizarea argintului coloidal dizolvat în apă și mediu de cultură celulară a fost analizată prin împrăștiere dinamică a luminii (DLS); argintul coloidal dizolvat în apă a prezentat o dimensiune medie de 100 nm cu un indice de polidispersitate de 0,2; argintul coloidal dizolvat în mediu de cultură celulară a prezentat o dimensiune medie de 155 nm și un indice de polidispersitate de 0,23 (Figurile 1(a) și 1(b)). Imaginea SEM a arătat populația de particule dizolvate în apă cu dimensiunea particulelor între 50 și 190 nm [Figurile 1 (c) și 1 (d)]; argintul coloidal dizolvat în mediul de cultură celulară a prezentat o combinație de nanoparticule și unele săruri de argint (Figurile 1(e) și 1(f)); cu toate acestea, dimensiunea medie obținută prin DLS s-a corelat cu histograma particulelor și rezonanța plasmonică caracteristică (Figurile 1(g), 1(h) și 1(i)). Analiza argintului coloidal sugerează că această soluție are formă semisferică și populație eterogenă, formată din nanoparticule și cluster format din săruri de argint. Odată ce AgC a fost caracterizat, am procedat la evaluarea diferitelor efecte biologice.

Figura 1

distribuția mărimii argintului coloidal. (a) DLS de argint coloidal dizolvat în apă a prezentat o dimensiune medie de 100 nm cu un indice de polidispersitate de 0,2. (b) măsurători DLS ale argintului coloidal dizolvat în mediu de cultură celulară cu o dimensiune medie de 155 nm și un indice de polidispersitate de 0,23. (c, d) imaginea SEM a populațiilor de particule dizolvate în apă. (e, f) imaginea sem a argintului coloidal dizolvat în mediul de cultură celulară. (g, h) histograma particulelor dizolvate în apă și, respectiv, în mediul de cultură. (i) spectrele UV-vis ale argintului coloidal. (j) sărurile de argint formate în probe de argint coloidal dizolvate în mediu de cultură. DLS, împrăștiere dinamică a luminii; SEM, microscopie electronică de scanare; și a.u., unități arbitrare.

3.2. Determinarea proliferării celulare și a producției de IL-2

în primul rând, am determinat dacă doza citotoxică utilizată anterior în celulele cancerului de sân afectează funcțiile limfocitelor sau macrofagelor. Rezultatele au arătat că tratamentul cu argint coloidal nu a afectat semnificativ () proliferarea celulelor PBMC și numărul de celule, iar tratamentele cu mitogeni Con A sau PHA au crescut semnificativ () proliferarea celulelor și numărul de celule, comparativ cu controlul netratat; interesant, tratamentele combinate cu AgC/Con A sau AgC/PHA au scăzut semnificativ () proliferarea celulelor și numărul de celule (figurile 2 și 3) ale PBMC. Rezultate similare au fost observate prin citometrie în flux și microscopie fluorescentă utilizând colorantul fluorescent PKH26 (control (94%), Con A (165%), PHA (156%), AgC (91%), AgC + Con A (80%) și AgC + PHA (77%)) (figurile 3, 4 și 5). În plus, tratamentul cu AgC nu a afectat producția de IL-2 în comparație cu martor (15 pg/mL) (), dar s-a constatat o creștere a producției de IL-2 atunci când PBMC au fost stimulate cu PHA (176 pg/mL) sau Con A (150 pg/mL), iar tratamentele cu AgC + Con A (15 pg/mL) sau AgC + PHA (13 pg/mL) au scăzut producția de IL-2 () (Figura 4).

Figura 2

viabilitatea celulară a PBMC tratată cu argint coloidal și mitogeni. PBMC (1 × 106 celule/mL) au fost tratați cu Un Con (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Un Con (5 µg/mL), sau AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) și se incubează timp de 72 h la temperatura de 37°C și 5% CO2 în atmosferă. Viabilitatea celulară a fost analizată prin testul MTT. Datele reprezintă media deviației standard a celor trei experimente independente. . AgC, argint coloidal; PHA, fitohemaglutinină; și Con A, concanavalin A.

Figura 3

Numărul celular de PBMC tratat cu argint coloidal și mitogeni. PBMC (1 × 106 celule/mL) au fost tratați cu Un Con (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Un Con (5 µg/mL), sau AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) și se incubează timp de 72 h la temperatura de 37°C și 5% CO2 în atmosferă. Numărul de celule a fost analizat prin citometrie în flux. Datele reprezintă media deviației standard a celor trei experimente independente. . AgC, argint coloidal; PHA, fitohemaglutinină; și Con A, concanavalin A.

Figura 4

proliferarea celulară și producția IL-2 de PBMC tratate cu argint coloidal și mitogeni. PBMC (1 × 106 celule/mL) au fost tratați cu Un Con (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), sau AgC (17.5 ng/mL) + Un Con (5 µg/mL) și se incubează timp de 72 h la temperatura de 37°C și 5% CO2 în atmosferă. Proliferarea celulară bazată pe expresia PKH26 a fost analizată prin citometrie în flux. Supernatanții IL-2 au fost evaluați prin testul ELISA. Datele reprezintă media deviației standard a celor trei experimente independente. . AgC, argint coloidal; PHA, fitohemaglutinină; și Con A, concanavalin A.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figura 5

proliferarea celulară a PBMC tratată cu argint coloidal și mitogeni. PBMC (1 × 106 celule/mL) au fost tratați cu (un) control negativ, (b) de control, (c) PHA (5 µg/mL), (d) Un Con (5 µg/mL), (e) AgC (17.5 ng/mL), (f) AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), sau (g) AgC (17.5 ng/mL) + Un Con (5 µg/mL) și incubate 72 de ore la 37°C și 5% CO2 în atmosferă. Proliferarea celulară a fost analizată prin fluorescență prin microscopie. AgC, argint coloidal; PHA, fitohemaglutinină; și Con A, concanavalin A.

3.3. Efectul citotoxic al AgC asupra liniilor celulare limfoide și leucemice

rezultatele noastre au confirmat proprietățile antiproliferative și citotoxice ale AgC asupra liniilor celulare leucemice (Molt-4 și K562) și limfomului (Ramos și L5178Y) într-o manieră dependentă de doză (1,75 până la 17,5 ng/mL) () (Figura 6).

Figura 6

viabilitatea celulară a liniilor celulare canceroase tratate cu argint coloidal și mitogeni. Liniile de celule canceroase k562, Molt-4, Ramos și L5178Y (5% 103 celule/sondă) au fost tratate cu mai multe doze de AgC și incubate timp de 5 ore la 37% C și 5% CO2 atmosferă. Viabilitatea celulară a fost analizată prin testul MTT. Datele reprezintă media deviației standard a celor trei experimente independente. . AgC, argint coloidal.

3.4. Determinarea citokinelor

în afară de tratamentul cu AgC nu a afectat producția () de IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-uri, IL-17A (0 pg/mL) sau TNF-uri (5,84 pg/mL), comparativ cu martor netratat. Cu toate acestea, tratamentul cu LPS utilizat ca control pozitiv a indus o producție ridicată a tuturor citokinelor evaluate (Tabelul 1).

3.5. Fenotiparea markerilor de suprafață celulară

rezultatele noastre au demonstrat că tratamentul cu AgC nu a afectat procentul de exprimare a populațiilor celulare CD3+ (79,7%), CD3−CD19+ (10,2%), CD3+CD4+ (52,2%), CD3+CD8+ (33,9%) și CD16+CD56+ (7,6%), comparativ cu grupul de control () (Tabelul 2).

3.6. Peroxinitriți și absorbția determinărilor FITC-Dextran

tratamentul cu argint coloidal (99%) nu a afectat viabilitatea celulelor dendritice (Figura 7(A)) sau nivelurile de peroxinitriți evaluate (Figura 7(b)), dar a crescut procentul de fagocitoză (Figura 7(c)), comparativ cu martor ().

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)
(c)

Figura 7

viabilitatea celulară a macrofagelor umane, fagocitoza și producția de peroxinitriți. Macrofagele umane (1 celule 106 de la sută) au fost tratate cu AgC și incubate timp de 5 ore la 37 de la sută C și 5% CO2 în atmosferă. (a) viabilitatea celulară a fost analizată prin testul trypan blue. (b) fagocitoza macrofagelor FITC-Dextran evaluată prin citometrie în flux. (c) nitrat/nitrit determinat prin reacția Griess (kit de analiză colorimetrică nitrat/nitrit); LPS a fost utilizat ca martor pozitiv. Datele reprezintă media deviației standard a celor trei experimente independente. . AgC, argint coloidal; FITC-Dextran, izotiocianat de fluoresceină-Dextran; și LPS, lipopolizaharidă.

4. Discuție

se știe că mai mulți agenți chimioterapeutici utilizați în tratamentul cancerului (ciclofosfamidă, vinblastină, vincristină, bleomicină și cisplatină) au efecte antiproliferative și citotoxice; dar la doze mici pot stimula răspunsul imun . Efectul asupra sistemului imunitar al oricărei substanțe ar trebui testat, deoarece orice deteriorare a acestui sistem ar putea afecta homeostazia corpului. În studiul de față analiza argintului coloidal sugerează prezența unei populații eterogene de nanoparticule și clustere formate din săruri de argint, probabil provenite din interacțiunile cu proteinele conținute în mediul de cultură complet. A fost raportat efectul de agregare al particulelor de argint în fluidele biologice datorită prezenței proteinelor și lipidelor . În plus, rezultatele noastre au arătat că AgC (17,5 ng/mL) poate inhiba producția de IL-2 indusă de mitogeni. Prin urmare, imunosupresia indusă în PBMC ar putea fi mediată de inhibarea eliberării IL-2. Activitatea imunosupresoare a unor medicamente, cum ar fi ciclosporina și azatioprina, a fost coroborată de inhibarea proliferării limfocitelor și a producției de citokine (INF-XV, IL-2, RANTES, TGF-XV și TNF-XV), atunci când limfocitele sunt stimulate de reactivi precum PHA, Con A sau mitogen pokeweed . IL-2 este un factor de creștere autocrin pentru celulele T și producția sa a fost inhibată selectiv prin tratamentul cu imunosupresoare tacrolimus (FK506) sau acid micofenolic . Se știe că agenții imunosupresori (corticosteroizi) sunt utilizați pentru tratamentul malignităților limfoide, deoarece induc apoptoza celulelor limfoide maligne . Am demonstrat proprietățile antiproliferative și citotoxice ale AgC (155 nm) (doze cuprinse între 1,75 și 17,5 ng/mL) pe liniile celulare leucemice și limfomatoase, în ciuda rapoartelor anterioare care au menționat că particulele de argint în intervalul 10-100 nm de diametre sunt mai citotoxice decât particulele de dimensiuni mai mari . Este necesar să se cunoască mecanismul de selectivitate între PBMC și celulele canceroase de origine mieloidă și limfoidă, iar studiile viitoare ar trebui dezvoltate în zona apoptozei mediate de receptor, cum ar fi discutate de “Vega și de Maio, 2005 .”Din cauza rezistenței la glucocorticoizi în tratamentul limfomului, celulele tumorale își continuă expansiunile în prezența glucocorticoizilor . Din acest motiv, AgC ar putea oferi o nouă opțiune clinică care trebuie luată în considerare, dar sunt necesare mai multe studii legate. Pe de altă parte, rezultatele noastre indică faptul că producția de citokine și procentul markerilor de suprafață exprimați de celulele T, B și NK nu sunt afectate ca răspuns la AgC (17,5 ng/mL), opus altor imunosupresoare, cum ar fi rapamicina sau sorafenul, pentru care efectul imunosupresor este atribuit interferenței unei căi de semnalizare și metabolismului acizilor grași . Mai mult, există dovezi că celulele sistemului imunitar pot fi activate ca răspuns la biomateriale, deși căile de semnalizare induse de MHC/peptidă/TCR nu sunt așteptate. Cu toate acestea, căile alternative noncognate pot duce la activarea prin glicoproteine de legătură încrucișată pe suprafața membranei plasmatice, cum ar fi proliferarea limfocitelor induse de mitogen . În ceea ce privește peroxinitriții, argintul coloidal (17,5 ng/mL) nu a indus producerea acestora, dar activitatea fagocitozei a crescut probabil datorită absorbției argintului coloidal într-o manieră nespecifică. Alți autori au descris faptul că nanoparticulele de argint într-un interval de 5, 10, 15 și 100 nm cresc speciile reactive de oxigen care afectează funcția mitocondrială și că fagocitoza particulelor de argint blochează ciclul celular în faza S și stimulează semnalizarea inflamatorie prin generarea de specii reactive de oxigen, urmată de secreția de TNF-XV, care a scăzut viabilitatea celulelor hepatice de șobolan .

în concluzie, studiul de față demonstrează netoxicitatea argintului coloidal asupra celulelor sistemului imunitar și capacitatea sa de a interfera cu răspunsul imun prin scăderea proliferării celulare atunci când este stimulată cu mitogeni, sugerând că argintul coloidal poate fi considerat ca un agent imunosupresor, dar trebuie efectuate mai multe studii pentru a stabili eficacitatea și mecanismul său de acțiune.

interese concurente

autorii declară că nu există niciun conflict de interese în ceea ce privește publicarea acestei lucrări.

Recunoasteri

acest studiu este sustinut de laboratorul de Imunologie si Virusologie, Facultatea de Stiinte Biologice, Universitatea Autonoma din Nuevo Leon, San Nicolas Oktcs de los Garza, NL, Mexic, in colaborare cu “Red tem Oktica de Inmunolog Oktava en C Oktbt y enfermedades Infectiosas” cu Registrul nr. 253053, CONACYT.