anatomia & fysiologia

tämä tutkimus toteutettiin, ja siihen sisältyi eläintalon koe-eläinten hoitoa ja käyttöä koskevat säännöt ja määräykset, ja eläinten eettinen keskuskomitea hyväksyi kyseisen kokeen. 25 naaraspuolista sveitsiläistä albiinohiirtä, joiden keski-ikä oli 45 päivää ja paino 25-35gm, valittiin satunnaisesti Animal Housesta, eri pesimäyhdyskunnista. Nämä naaraat, jotka eivät olleet raskaana, parittelivat tarkoituksellisesti samaa lajiketta olevien uroshiirien kanssa tavoitteenaan saada 10 poikasta lisää. Muovisessa polykarbonaattihäkissä, jossa on ruostumattomasta teräksestä valmistetut päällysteet, yksi vahva ja stout heterotsygootti uros asetettiin yhden naaraan kanssa ilmakehään, joka pysyi jatkuvasti 20-25c: ssä ja 55±5%: n kosteudessa, 12 tuntia myöhemmin vaaleassa ja pimeässä syklissä. Naarashiiriltä tutkittiin emättimen ristitulppa ja hyvin visualisoidun tulpan esiintyminen merkittiin todetuksi raskaudeksi ja sille määrättiin päivä nolla raskausajasta. Tiineyden 7., 8. ja 9. päivänä naaraat tarkistettiin raskauden varalta vatsan tunnustelulla.

agnps: n Luonnehdinta

tutkimuksen hankintalähteistä saadut Hopeananohiukkaset arvioitiin niiden primaarikooniksi TEM: llä ja niiden agglomeroitumiseksi soluväliaineessa fotoniristikorrelaatiospektroskopialla (PCC) ja ultravioletilla näkyvällä (UV–Vis) spektroskopialla, dynaamisella valon Sironnalla ja Zeta-potentiaalilla. AgNps: n edustavia TEM: n kuvia näytettiin. TEM: n kuvat PVP-pinnoitetusta AgNps: stä hajaantuivat ja hyllytettiin 1.5m NaCl vahvisti valmistajien ilmoittaman primaarihiukkaskoon. Päällystämättömät hopeananopartikkelit löysivät heterogeenisen jakauman alueella 50-100 nm, joista suurin osa oli noin 71 Nm.

suspendoidun jauheen AgNps: n tapauksessa TEM-kuvat osoittivat, että vesiympäristössä hopeananohiukkaset paakkuuntuvat ja muodostavat suuria aggregaatteja, joista monet ovat suurempia kuin 50 nm. Tämä tulos on yhdenmukainen hydrodynaamisen kokojakauman tulosten kanssa, jotka saatiin dynaamisella valon sirontamenetelmällä (zeta sizer). EDX-analyysit vahvistivat, että sekä kolloidisissa että kuivissa jauhemaisissa AgNps-liuoksissa oli vain alkuainehopeaa. ICP-AES-tulosten mukaan Ag-ionien pitoisuudet kolloidisen ja suspendoidun jauheen AgNps: n happopitoisissa varastoissa olivat vastaavasti 1908.1 ja 447.2 MGL-1. Myös XRD-kuvion tulokset vahvistavat jauhemaisen agnps-tyypin kidevedellisyyden ja alkuainekiteistä hopeaa, myös muita faaseja, paitsi metallista hopeaa, ei ollut näytteessä. Lisäksi XRF-tulokset osoittivat, että jauhemaisen agnps-tyypin puhtaus oli 97,86%.

Agnps-kolloidiliuoksen altistus toistuvien oraalisten letkujen kautta

tiineille hiirille annettiin kantaja-aineena kaksinkertaisesti normaalin suolaliuoksen kanssa (Valekontrolli) ja annoksena 5, 10, 15, 20 mg/kg. Koe-eläimet, joilla on hoidettuja eläimiä ja käsittelemättömiä eläimiä, sisältyvät kokeeseen.

dissektio ja sisäelinten poisto

GD 18: ssa raskaana olevan äidin kohdun oikea ja vasen sarvi poistettiin vatsalaparotomian jälkeen syvässä eetteri – /kloroformipuudutuksessa ja 250 dissektiolla kerättyä tuoretta emoa pestiin vesijohtovedellä petrimaljan päällä veren ja lapsiveden poistamiseksi ja kuivattiin suodatinpaperilla ja kuivattiin 95-prosenttisessa alkoholissa 48 tunnin ajan, lopulta altistettiin 1-prosenttiselle KOH: lle konsistenssieristyksen ja alitsariinin värjäysprotokollan osalta.visualisointi luut joko normaali tai epänormaali.

Method (Assessment of skeletal dysmorphology by the technique of evisceration and Alitsarine staining) -:

Skeletal dysmorphology study was doed by the technique of evisceration and Alitsarine staining. Jokaisen ryhmän kaikki yksilöt (50 poikasta) kuivatettiin 95-prosenttisessa alkoholissa ( puhdistetussa alkoholissa) 48 tunnin ajan, minkä jälkeen ne poistettiin ja pestiin juoksevalla vesijohtovedellä, minkä jälkeen ne suolistettiin 1-prosenttisella KOH-liuoksella (KOH 1GM+100ml d.w.). Ventraalisen laparotomian tekemisen jälkeen tärkeät elimet poistetaan. Näytteet kastettiin huolellisesti runsaaseen 1-prosenttiseen kaliumhydroksidiliuokseen (KOH) vähintään 2-4 päivän ajan, kunnes liha, jänne, lihakset ja sisäelimet olivat läpinäkyviä & selkeitä ja hajosivat, minkä jälkeen luut ja rustot näkyivät kristallinkirkkaasti. Joka päivä ratkaisu muutettiin, kun se tulee värjäytynyt ja jätteet.

kristallinkirkas luu – ja rustonäyte laitettiin sitten samaan 1% KOH: iin ja sen jälkeen lisättiin 6-8 tippaa 1% Alitsariinitahraa, jotta se värjättiin syvän purppuranpunaiseksi. Liuosta ravistettiin kevyesti muutaman kerran tunnissa. Sitten samaa menettelyä jatkettiin vielä 2-3 päivää, jotta luuhun ja rustoon saatiin syvä purppuranpunainen väri. Mahdollisten värjäytymien poistamiseksi ja näytteiden silottamiseksi sama aine johdetaan 40%: n, 80%: n (40 ml glyserolia+60 ml tislattua vettä, 80 ml glyserolia+20 ml tislattua vettä) ja 1-2 kidetymolia lisätään pitkäaikaissäilöntään, joka lopulta säilytetään 100%: ssa glyserolia, joka tarjoillaan valokuvaa & varten.

yhteensä 250 sikiötä kerättiin 25 äidiltä 1, 2, 3, 4 ja 5 ryhmästä, joista kaikki näytteet altistettiin luustodysmorfologisille kokeille. 60 sikiöitä havaittiin resorptiota.

tilastot

luuston epämuodostumien prosenttiosuus arvioitiin kustakin ryhmästä ja arvioitiin dysmorfologiaan osallistuneiden luiden lukumäärän perusteella.lopuksi prosenttilukuja verrattiin ryhmän välillä ja ryhmän sisällä annoksesta riippuvan teratogeenisuustekijän osalta. Tähän tarkoitukseen käytetty Multi ANOVA-ja deskriptiivinen tilastotesti (post hoc-analyysi).

havainnot ja löydökset

luustodysmorfologian osuus todettiin suuremmaksi ja suurimmaksi 15 mg AgNps: lla ja 20 mg AgNps: lla painokiloa kohti (Taulukko 1).

pienemmällä AgNps-annoksella hoidetut ryhmät (0, 5 & 1 mg painokiloa kohti.) luustoanomalioiden osuus oli hyvin pieni, joten näitä hoidettuja ryhmiä pidettiin lähes verrokkiryhmän sikiöinä (Kuva 1).

Kuva 1 kontrolli sikiö Alitsariini tahra dorsaalinäkymä (A) ja sivusuunnassa näkymä (B).

yksi 5mg AgNps/ kg b.w. käsitelty ryhmä pentu osoitti unossified 5th rintalastan segmentin rintalastan bar ja unossified Manumbrium segmentti, joka on diagnosoitu rintalastan halkeama. Muilla sikiöillä todettiin yläleuan ja alaleuan hypoplasia, etu -, päälaen-ja nenäluu, lonkkaluun takaosan fuusion epäonnistuminen, 10,11 ja 12.kylkiluu, jotka olivat alkeellisia yhden sikiön vasemmalla puolella. Puuttuminen keskiakselin 6-12. kylkiluun sekä lisätä tilaa peräkkäisten kylkiluut merkittiin useita sikiöitä eri ryhmistä ja diagnosoitu lisääntynyt web-tilaa, puuttuminen kehon & spinous prosessi nähdään koko rintakehän nikamalohkojen joka on diagnosoitu hermostoputken vika lähellä tyypin 1% tapauksissa tämän käsitellyn ryhmän sikiöitä. Luustodysmorfologian prosentuaalinen osuus tässä ryhmässä oli 32% (kuva 2).

kuva 2 5 mg agnps käsitelty ryhmä sikiö alitsariinitahra selkänäkymä (A) ja (B), sivusuuntainen näkymä (C) ventraalinen näkymä (D) ja selkänäkymä (E))

10 mg agnps-hoidetuilla ryhmäsikiöillä osoitettiin luuston dysmorfologiaa lannerangan ja ristinikaman puuttumisen muodossa, lonkkaluiden puuttumisen muodossa, vakavasti degeneroituneet kylkiluut ilman rustoa, etu-ja päälaenluu osoitti unossifiedin ja kehittymättömän, skolioosi havaitaan rintakehän ja lannerangan alueella yhdessä sikiössä, kaulanikaman puuttuminen nähdään, yläleuan hypoplasia, sagittalin paljastuminen myös koronasaumat näkyvät. Kehittymättömät alaraajaluut näkyvät toisen sikiön molemmin puolin. Luustodysmorfologian prosentuaalinen osuus tässä ryhmässä oli 44% (kuva 3).

kuva 3 10 mg agnps käsitelty ryhmä sikiö Alitsariini tahra dorsal view (A, B).

niistä 15 mg AgNps käsitelty ryhmä 8 pennut havaittiin ilman kaulanikamien ilman 12. kylkiluu ja loput nikamien havaittiin kehittymätön spinous prosessi, jalkapöydän halkeama näkyy myös dorsaalinäkymässä jalka yhden sikiön, unossified lonkkaluu ventraalinäkymässä ilman segmentin & fibroosi näkyy myös, unossified ohimoluu, joka löytyy fibrosed lateral näkymä kallo, ei proksimaalinen segmentti innominate luun,selkärangan anomalia nähtiin alkeellisilla 6. ja 9. kylkiluu ja 10., 11. ja 12. puuttuminen havaitaan kylkiluut yhdessä sikiössä, unossified parietaaliluu oli myös nähty, anencephaly skolioosi nikamien nähtiin L1-L5 yhdessä sikiössä, unossified lonkkaluu nähtiin, unossified lapaluut molemmin puolin nähtiin dorsal view yhden sikiön, puuttuminen rusto nähtiin 6. -12. kylkiluu yhdessä sikiössä. Luustodysmorfologian prosentuaalinen osuus tässä ryhmässä oli 60% (Kuva 4).

Kuva 4 15 mg agnps käsitelty ryhmä sikiö alitsariinitahra selkänäkymä (A, B) ja ventraalinen näkymä (C)

20 mg / kg painokiloa kohti AgNps-hoitoa saaneiden ryhmän sikiöiden luustodysmorfologia oli suurin (76%). Skolioosi havaittiin lannerangan alueella yksi sikiö, yksi sikiö osoitti unossified takaraivoluu, unossified lapaluu ja lonkkaluu, iso fibroosi on havaittu yläleuan, otsaluun ja päälaen luut, sama on havaittu myös toisen ja kuudennen segmentin rintalastan., halkeama havaitaan nilkkanivelen, lisääntynyt tila havaitaan 1. ja 2. kylkiluun ja 5. ja 8. kylkiluut vasemman puolen yhden sikiön, myös halkeama on havaittu symphisis pubis yhteinen yhden sikiön, unossified alaleuan hypoplasia, puuttuminen spinous prosessi aaltoileva kylkiluut on myös havaittu, yhdessä sikiössä havaitsimme täydellinen fuusio 2. ja 8. kaulanikamien joka on selvästi erotettu muusta 1. kaulanikamien. Havaitsimme myös lievän skolioosin ja unossified takaraivon ja päälaenluun ja puuttuminen lapaluut oikealla puolella yhden sikiön, hypo muovi nikamien näkyy myös (kuva 5).

kuva 5 20 mg agnps käsitelty ryhmä sikiö Alitsariini tahra selkänäkymä.