Kaspaasi-3-ohjelmoidun solukuoleman merkkiaine
Kaspaasit eli kysteiinistä riippuvaiset aspartaattispesifiset proteaasit ovat entsyymiperhe, joka on tärkeä apoptoosin käynnistämisessä ja toteuttamisessa solussa. Ympäristövihjeet ja solusignaalit käynnistävät ohjelmoidun solukuolemakaskadin pääasiassa kaspaasien proteolyyttisen aktivaation kautta (1). Yksi spesifinen efektori kaspaasi on kaspaasi-3, proteiini, joka pilkkoutuu ja aktivoituu apoptoosin alkaessa. Halkaistu kaspaasi-3 Lisää apoptoottista signaalia entsymaattisen aktiivisuuden kautta jatkokäsittelykohteissa, mukaan lukien poly ADP-riboosipolymeraasi (PARP) ja muut substraatit (2). Solubiologiassa kaspaasi-3-vasta-aineet, jotka havaitsevat sekä entsyymin sulamattoman että pilkkoutuneen version, ovat vahvoja solukuoleman induktion indikaattoreita. Esimerkiksi kaspaasi-3-vasta-aineita käytetään laajalti mahdollisten terapeuttisten aineiden sytotoksisen voimakkuuden ja tehokkuuden arviointiin. Eräässä tutkimuksessa, jossa tutkittiin taksaanin indusoiman apoptoosin molekyylimekanismeja, osoitettiin kaspaasi-3: n vasta-aineiden kohdalla läntisissä bloteissa, että kaspaasi-3: n pitoisuus laski dramaattisesti, kun taas kaspaasi-3: n aktivoidut muodot kasvoivat, kun ihmisen rintasyöpäsoluja hoidettiin paklitakselilla (2).
kaspaasi-3 toimii kanonisesti ohjelmoidun solukuoleman merkkiaineena, mutta viimeaikaiset todisteet osoittavat tämän proteaasin olevan keskeinen molekyyli eri syöpien ja hermoston rappeutumissairauksien patogeneesissä. Erityisesti jakautuneen kaspaasi-3: n on osoitettu korreloivan syövän etenemisen kanssa kasvainnäytteissä (3). Eräässä tutkimuksessa tutkijat osoittivat, että immunohistokemian käyttö kaspaasi-3: n vasta-aineiden kanssa lisäsi katkeavan kaspaasi-3: n pitoisuutta, mikä oli merkitsevästi yhteydessä syövän uusiutumisen lisääntymiseen ja elinajan lyhenemiseen syöpäpotilailla (3). Toinen Pittsburghin yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan tutkimusryhmä havaitsi, että kaspaasi-3: n häviäminen herkisti syöpäsoluja DNA: ta vaurioittaville terapeuttisille aineille (4). Tutkijat tuottivat kaspaasi-3-null-paksusuolen syöpäsoluja ja osoittivat, että käyttämällä immunofluoresenssia kaspaasi-3-vasta-aineiden kanssa syöpäsolut, joilta tämä entsyymi puuttui, olivat alttiita nekroottisille tapahtumille, kun niitä hoidettiin 5-fluorourasiilin kaltaisilla aineilla (4). Kaspaasi-3: lla on myös osoitettu olevan osansa Alzheimerin taudin (AD) voimistumisessa, taudille, jolle on ominaista amyloidi-beetaplakkien kertyminen aivoihin, mikä johtaa hermosolukuolemaan (5). Eräässä Massachusetts General Hospitalin tutkimuksessa osoitettiin caspase-3-vasta-aineiden avulla, että kaspaasi-3-aktivaatio edistää patogeenisten hermoproteiinien kertymistä AD: n etenemiseen (5). Yhdessä nämä löydökset osoittavat, että kaspaasi-3-vasta-aineilla voi olla kliininen merkitys taudin ennusteen ja etenemisen määrittämisessä sen lisäksi, että niitä käytetään yleisemmin apoptoottisten solujen tunnistamisessa.
Novus Biologicals tarjoaa Caspase – 3-reagensseja tutkimustarpeisiisi, mukaan lukien:
- Kaspaasi-3-vasta-aineet
- Kaspaasi-3-vasta-aineparit
- Kaspaasi-3-ELISA-sarjat
- Kaspaasi-3-lysaatit
- Kaspaasi-3-proteiinit
- Kaspaasi-3 RNAi
pmid
