9. labor: az idegek vezetési sebessége

célok

1. a vezetési sebesség mérése emberi reflexívben, az Achilles-ín, mint a reflex kezdeményezője és a gastrocnemius izom összehúzódása, mint válasz (extracelluláris felvétel).
2. a békaideg ülőideg küszöbértékének, vezetési sebességének és refrakter periódusának mérésére az ideg stimulálásával és a válasz mérésével külső rögzítő elektródákon keresztül (extracelluláris felvétel).
3. egy földigiliszta óriás axon küszöbértékének és vezetési sebességének mérésére külső rögzítő elektródákon keresztül.
4. az emberi ülőideg vezetési sebességének mérésére külső rögzítő elektródákon keresztül (extracelluláris felvétel).

vezetési sebesség az idegekben: háttér

a neuron olyan sejt, amely idegimpulzusok továbbítására szakosodott. Az axon az idegsejt azon része, amely impulzusokat vezet; az axon általában egy hosszú kinövés vagy folyamat, amely impulzusokat visz el az idegsejt sejttestétől a célsejtek felé.
az idegimpulzus, más néven akciós potenciál, az a jel, amelyet egy axon mentén továbbítanak, amely lehetővé teszi az idegsejtek számára, hogy kommunikáljanak és aktiválják a szervezet számos különböző rendszerét. Az akciós potenciál származhat az agyból, és szándékos mozgást eredményezhet, vagy részt vehet az agytól független reflexívben. Az akciós potenciál átterjedhet egy izomsejtbe, ami izomösszehúzódást okozhat.
a neuronok tulajdonsága, hogy képesek akciópotenciálokat generálni. Az akciós potenciált a neuron membrán permeabilitásának változása okozza. A permeabilitás ezen változása megváltoztatja az ionok eloszlását a membránon. Az ionok eloszlásának változása az elektromos töltés (potenciál) megváltozásához vezet a membránon. Az elektromos potenciál változásai kísérletileg kimutathatók, amikor az akciós potenciál áthalad az idegsejt axonján.
az axon elektromos potenciáljának változásait két alapvető módszer egyikével lehet kimutatni és megjeleníteni egy laboratóriumi felvevőkészüléken:

1. Intracelluláris felvétel: két elektróda helyezkedik el az idegsejt membránjának mindkét oldalán, az egyik a sejten belül, a másik pedig kívül. Az elektródák közötti potenciálkülönbség változását rögzítik, amikor az ionok a sejtbe kerülnek és onnan kifelé mozognak. Ezt a technikát nagy, izolált neuronokon végzik.
2. Extracelluláris felvétel: egy pár elektródát helyeznek a neuron külső oldalára. A két elektróda közötti potenciálváltozást kétfázisú AP-ként mérik és rögzítik, amikor az akciós potenciál áthalad az idegsejt mentén. Ez a módszer nem az ionáramot, hanem a nettó potenciálkülönbséget méri, mivel az akciós potenciál először az egyik elektródon, majd a másik elektródon halad át. Ennek a módszernek az az előnye, hogy felhasználható egy akciós potenciál (mint egy izomban) áthaladásának rögzítésére a test felszínéről, és az egész idegek akciós potenciáljának rögzítésére is használható (ellentétben azzal, hogy az egyes idegsejteket át kell szúrni).

a mai laboratóriumban extracelluláris felvételt fognak használni: a békában és az emberben egy idegből fognak felvételt készíteni, amely egy neuronköteg, amelynek mindegyikének saját küszöbértéke van, nem pedig egyetlen neuronból. A Földigilisztában óriási axonokból fogsz felvételt készíteni. Nem csak az akciós potenciált fogja megjeleníteni, hanem meghatározza azt a sebességet is, amellyel az akciós potenciál egy ideg mentén halad ezen organizmusok mindegyikében.

a Powerlab digitális 2 csatornás oszcilloszkópként fog működni. Az időt az X tengelyen, a feszültséget pedig az Y tengelyen rögzítik. Az idő és az érzékenység minden csatornán beállítható. A PowerLab hasznos tulajdonsága, hogy az operátor kezdeményezheti a képernyő söpörését (azaz a számítógép megkezdi a mintavételt). Ez az úgynevezett TRIGGER. A trigger lehetővé teszi az esemény utáni időszak rögzítését. Lehetőség van a számítógép “kiváltására”, az adatok gyűjtésére (söpörésre), az inger alkalmazásával egyidejűleg. Így mérhető a stimuláló esemény és az akciós potenciál megjelenésének ideje (késleltetés). A trigger ezen alkalmazásában a számítógép úgy van beállítva, hogy egyetlen sweepet generáljon az emberi achilles-ín, valamint a béka ideg stimulálásakor. Az idő az X tengelyen mérhető. Az 1.csatornát fogja használni, ahol a trigger megjelenik, valamint a 3. csatornát, ahol a válaszok rögzítésre kerülnek. A PowerLab beállítása kissé eltér a földigiliszta óriás axon felvételénél, de az elmélet hasonló.

az akciós potenciál vezetési sebességét úgy határozzuk meg, hogy megmérjük a megtett távolságot (az ideg hossza m-ben), és elosztjuk a reflexív befejezéséhez szükséges idővel (sec), Más néven latenciával.

vezetési sebesség = távolság (m)/idő (sec).

1. a távolság mérése viszonylag egyszerű. Meg lehet tenni egy vonalzó vagy egy mérőszalag segítségével.
2. az idő mérése bonyolultabb. Az akciópotenciálok nagyon gyorsan utaznak; ezért a mérendő idő nagyon kicsi, és kifinomultabb műszereket igényel. A PowerLab-tal ellátott számítógép, akárcsak az oszcilloszkóp, Ideális olyan események mérésére, amelyek nagyon rövid idő alatt történnek.

egy adott neuron vezetési sebessége korrelál az idegátmérővel és a mielinizációval. A mielin, egy lipidben gazdag anyag, szigetelésként működik, hogy növelje a gerinces neuronok vezetési sebességét. A gerinctelenekből hiányoznak a mielinizált neuronok, akciós potenciáljuk vezetési sebessége elsősorban a megnövekedett axonátmérő eredményeként növekszik. Sok gerinctelen rendelkezik speciális “óriás” axonokkal, mint például a földigiliszták, amelyek nagyon gyorsan vezetik az akciópotenciálokat.

táblázatok készítése a laboratóriumi jegyzetfüzetbe, hogy rögzítsék a béka és a földigiliszták (mediális és oldalsó Óriás Axon) akciós potenciáljának kiváltásához szükséges Küszöbfeszültséget. A három időzített kísérletből jegyezze fel az inger tárgy és az akciós potenciál közötti időt (késleltetés ms-ben), és mérje meg a távolságot a kézikönyvben leírtak szerint. Számítsa ki az emberi ülőideg, a béka ülőideg, valamint a földigiliszta mediális és laterális óriás axonjainak vezetési sebességét m/sec-ben, és írja be adatait az osztály adatlapjára. Számítsa ki mindegyik átlagos vezetési sebességét az osztályadatok felhasználásával.

vezetési sebesség az emberi Reflexívben

amikor az Achilles-ín megnyúlik, miután reflex kalapáccsal megérintették, az indukált akciós potenciál a lábon felfelé vezet a gerincvelőig, majd vissza lefelé, ahol a borjú (borjú) izom összehúzódását okozza. A vezetési sebesség meghatározásához meg kell mérni az akciós potenciál által megtett távolságot, valamint az ín megérintése és az izom összehúzódása közötti időt a PowerLab és az ADinstruments szoftver segítségével.

A Reflexív: A reflex ívet egy ín nyújtásával indítják el, amely stimulálja az izom nyújtási receptorait. Ezek a nyújtható receptorok úgy reagálnak, hogy akciós potenciált indítanak az érzékszervi neuronokban. Az akciós potenciál ezeken az érzékszervi neuronokon keresztül a gerincvelőbe jut, ahol közvetlenül szinapszisba kerülnek a motoros neuronokkal. A gerjesztés visszatér a gastrocnemius izomba, ahol az izom összehúzódását okozza. Így az eredetileg kifeszített ín összehúzódással visszatér eredeti hosszához, kitöltve a reflexívet.
az ilyen típusú reflexív funkciója a testtartás fenntartása. Az izmok folyamatosan nyújtózkodnak és visszatérnek eredeti hosszukba az agy beavatkozása nélkül. Vegye figyelembe, hogy ez a válasz monoszinaptikus. Az érzékszervi neuron közvetlenül szinapszisba kerül a gerincvelő motoros neuronjával; nincs benne interneuron.
az elektromiogram (EMG): egy izomösszehúzódás rögzítése, amelyet az izom feletti bőrből lehet venni. Az akciós potenciál egy idegen keresztül, egy ideg/izom csomóponton keresztül egy izomba jut. Az izomban az akciós potenciál az egész izomban elterjed, ami az izomrostok összehúzódását okozza. Az akciós potenciálok áthaladását az izom felett a bőrön elhelyezett elektródák érzékelhetik, amelyek erősítéskor (mint az EKG-ban) megjeleníthetők a számítógép képernyőjén.
a Reflex kalapács: a reflexek tesztelésére használt ütőkalapács. A kalapácsot, amelyet használni fog, úgy módosították, hogy amikor eléri az ínt, a kalapács bezárja az áramkört, és kis jelet generál. Ezt a jelet a számítógép söpörésének kiváltására használják.

kísérleti eljárás

1. helyezze az alanyot a laboratóriumi pad szélére úgy, hogy a lábai szabadon lógjanak. Csatlakoztasson két előzselézett elektródát a borjú (gastrocnemius) izom testéhez, kissé a középvonal bal vagy jobb oldalán. A két elektródát úgy kell elhelyezni, hogy külső éleik függőleges vonalban érintkezzenek az izommal (Lásd az alábbi ábrát). A harmadik földelő elektródot a bokacsontra kell helyezni. Csatlakoztassa a kábeleket a megfelelő elektródákhoz: zöld a talajhoz (a bokacsonton), fekete-fehér pedig a borjúizomhoz.

C

Fig. 9.1. A, egy reflexív diagramja egy emberben. Amikor a stretch receptor stimulálja a kalapács, az akciós potenciál utazik fel a szenzoros rostok a gerincvelő és szinapszisok a motoros rostok az akciós potenciál majd utazik vissza az ideg okoz az izom-összehúzódás megfigyeljük, mint egy reflex. B, két elektródát helyeznek a borjúra, az ábrán látható módon egymáshoz közel. A harmadik elektródot csontos felületre kell helyezni, például a térdvédőre vagy a bokára. C, LabChart 8 telepítő fájlok.

EMG Felvétel készítése:

1. nyissa meg a fájlt: “EMG tesztbeállítások”. Ha nem találja ezt a fájlt az asztalon, kérdezze meg oktatóját.
2. az EMG összegyűjtése: a tesztalanynak ülnie kell, és a lábát és a lábát lazítani kell. Nyomja meg a START gombot a képernyő jobb alsó sarkában. Óvatosan emelje fel az alany lábujjait, hogy megnyújtsa az Achilles-ínt a lábának hátsó részén, majd határozottan ütögesse az alany Achilles-ínét a kalapács fekete gumi részével. Rögzítsen több EMG-t úgy, hogy a kalapács fekete gumi részét az Achilles-ínre üti, és megfigyeli a reflexet a Ch-ben. 3. Addig ismételje, amíg 3 reprezentatív EMG-je nem lesz.
3. ha van egy jó sor 3 EMGs (Lásd az ábrát. 9.2), mérje meg az időt a kurzorral az inger kezdetétől (nullánál) az első csúcs közepéig. Ismételje meg a különböző felvételeket, átlagosan három.
4. rögzítse az adatokat a laboratóriumi kézikönyvben és az oktató által biztosított táblázatban.
5. a mérőszalaggal mérje meg a távolságot centiméterben az alany Achilles-ínjének ütközési pontjától a hozzávetőleges pontig, ahol a borda ketrec megfelel a gerincoszlopnak (azaz az érzékszervi ideg hossza), majd a gastrocnemius első elektródjáig (azaz a motoros ideg hosszáig). Lásd PowerPoint dia az oktató által biztosított diagramhoz, hogyan kell elvégezni ezt a mérést.
6. rögzítse a hosszúságot, majd kiszámolja és rögzíti a vezetési sebességet.

Fig. 9.2. A powerlab segítségével a számítógépen rögzített EMG mintája. A trigger jel az 1. bemeneten (Ch 1) van a 0.időpontban, az EMG pedig a 3. Ch-n (Raw jelnek hívják). Helyezze az “M” jelölőt az EMG első csúcsának tetejére. A megjelenített idő a trigger jel és a gastrocnemius válasz között eltelt időt jelzi, azaz azt az időt, amelyet az akciós potenciálok az ülőideg szenzoros neuronjai mentén a gerincvelőig, a motoros neuronok mentén pedig a gastrocnemius első (felső) elektródáig terjednek.

vezetési sebesség a béka Ülőidegében

a béka (Rana pipiens vagy Xenopus laevis) boncolt ülőidegében akciós potenciált indítanak stimulátor (pontos elektromos ingerek leadására szolgáló eszköz). Az akciós potenciál az ideg mentén halad, és két külső elektróda áthaladásakor észlelhető (a bevezetőben leírt 2.módszer szerint), és az észlelt válasz felerősödik és megjelenik a számítógép képernyőjén. Az inger és a válasz számítógépen lévő nyomát az inger váltja ki; mérjük az időt és a távolságot, majd kiszámítjuk a sebességet.

összetett akciós potenciál: az ideg sok idegsejt axonjainak gyűjteménye. Az axonok különböző vastagságúak lehetnek, ezért akciós potenciáljuk különböző méretű és sebességű lesz. Az ideg kívülről (extracellulárisan) rögzített akciós potenciálok összetett akciós potenciálként ismertek, és az egyes neuronok által kibocsátott akciós potenciálok összegét jelentik. (Lásd az ábrát. 9.3 A).

Fig. 9.3. A, egy kétfázisú akciós potenciál diagramja, mint egy ideg extracelluláris rögzítése. Az inger az ideg bal végére kerül. B, hátsó nézet a kitett béka bal hátsó végtagjáról és gerincoszlopáról.
az ülőideg a gerincvelőtől a gastrocnemius izomig terjedő nagy ideg. Mind szenzoros, mind motoros neuronokat tartalmaz (ez az ideg stimulálódik, amikor megnyújtja az emberi Achilles-ínt). Ebben a laborban a békát elaltatják, feláldozzák, és kettősre vágják (mind az agya, mind a gerincvelője megsemmisül). Lehet, hogy el kell távolítania a bőrt.

az ülőideg Boncolásához

1. ujjaival óvatosan válassza szét a hátsó combizmokat, és használjon tompa üvegszondát a fehér ülőideg és a kísérő erek feltárására (Lásd az ábrát. 9.3 B). Tompa üveghorog segítségével szabadítsa fel az ideget a comb környező szövetéből. Vágja el az izom-és kötőszövetet az ideg körül, miközben az ideget távol tartja az útból. Próbáld meg nem nyúlik az ideg, és ne érjen az ideg semmi fém, hogy ne károsítsa az ideg.
2. tartsa nedvesen az ideget kétéltű gyűrűkkel (olyan oldat, amely ionokat tartalmaz ugyanolyan koncentrációban, mint a béka vérében).
3. szorosan kössön egy szálat az ideg térd vége körül. Ezután vágja le az ideget a húr alatt, a lehető legközelebb a térdhez.
4. óvatosan emelje fel az ideget a szál felemelésével, majd boncolja az ideget a gerincvelőbe. Nagyon vigyázzon erre a boncolásra, különösen a medence területén. Tartsa az ideget nedvesen gyűrűkkel, amíg készen áll az idegkamrába helyezésre.

az Idegkamra beállítása

1. nyissa meg a frog CAP fájlt az asztalon. Óvatosan helyezze az ideget az első öt vagy hat elektróda fölé, kezdve a kamra bal oldalán (lásd oktató). A kamra bal oldalán lévő idegvégnek az ideg elülső végének kell lennie. Az ideg elülső és hátsó végei színkóddal vannak ellátva. Keresse fel oktatóját, ha nem biztos a színkódolásban.
2. fedje le az idegkamrát a műanyag fedéllel, és ellenőrizze, hogy az ideg még mindig érintkezik-e a vezetékekkel a fedél bezárása után. Csatlakoztassa a stimuláló és rögzítő elektródákat az alábbi képeken látható módon. A fénykép másolata a padon található Kék kötőanyagban is megtalálható. A folytatás előtt ellenőrizze az elektróda elrendezését az oktatóval.

összetett akciós potenciál rögzítése

1. ellenőrizze, hogy a fájl úgy van-e beállítva, hogy 0,05 V (impulzusmagasság) stimulációval induljon. Az ideg stimulálásához ebben a kezdeti beállításban nyomja meg a képernyő jobb alsó sarkában található start gombot.
2. most növelje az impulzusmagasság (inger) feszültségét 0,05 V-os időközönként a felfelé mutató nyílra kattintva. Ne változtassa meg a max. ismétlési sebesség (késleltetés) vagy impulzusszélesség (időtartam) értékek a kísérlet ezen részéhez. Csak az impulzus magasságát (feszültség) változtatja meg. Ha a felfelé mutató nyílra kattint, az amplitúdó minden egyes kattintással 0,01 V-kal növekszik, ezért erre a nyílra többször kell kattintania. Nyomja meg a start gombot, és figyelje meg a nyomkövetést a képernyőn. Folytassa a feszültség növelését 0-ban.05 V-os lépésekben.
3. végül a küszöbértéknél a vegyület akciós potenciáljának eltérésként kell megjelennie az alapvonalon.
4. jegyezze fel a küszöbfeszültséget (impulzusmagasság)
5. folytassa a feszültség fokozatos növelését (de soha ne növelje 1 V fölé), amíg az összetett akciós potenciál amplitúdója meg nem szűnik (jelezve, hogy az idegrostok maximális száma reagál) . Mivel az erősebb feszültségek további axonokat stimulálnak, az összetett akciós potenciál amplitúdóban növekszik.
6. ha két összetett akciós potenciálja van, amelyek ugyanazt a (szoros, ha finom) csúcs amplitúdót érik el, jegyezze fel a feszültséget.
7. válasszon egy feszültséget kissé a maximális érték alatt. Generáljon egyet akciópotenciál ezen a feszültségen. Mérje meg az időt a kurzorral az inger kezdetétől a kétfázisú válasz első csúcsának közepéig (lásd a 9.4.ábrát). Jegyezze fel ezt a késleltetést (az inger és az AP indítása közötti késleltetést) az Adattáblában. Generáljon még két akciós potenciált ugyanazon a feszültségen, és rögzítse azok késleltetési értékét.
8. ellenőrizze a második stimuláló elektróda és az első felvevő elektróda közötti távolságot (ennek a készüléknek körülbelül 5 mm-nek kell lennie). Ezt a távolságot és a rögzített késleltetési értékeket használva számítsa ki a vezetési sebességet mindhárom kísérletben, és átlagolja az eredményeket egy átlagos vezetési sebesség eléréséhez.

hogyan nőhet a válasz amplitúdója, ha az akciós potenciál “minden vagy semmi” tulajdonsággal rendelkezik?

ez az Osztályozott válaszjelenség szemlélteti az ideget alkotó különböző méretű rostok közötti küszöbérték-különbségeket. Ne feledje, hogy egy idegből, egy nagy neuronkötegből rögzít, mindegyik más-más küszöbértékkel rendelkezik. Ha az ingerfeszültség lassan és simán növekszik, akkor diszkrét ugrásokat figyelhet meg az összetett akciós potenciál amplitúdójában, mivel az idegrostok különböző küszöbosztályait “toborozzák”. Az amplitúdó növelésével több Neuron éri el a küszöböt, és hozzájárul az összetett akciós potenciál méretének növekedéséhez. Végül, az inger feszültségének növekedésével egy pont akkor érhető el, amikor az akciós potenciál hullámformája megáll. Ezen a ponton stimulálják az ideg összes rostját, amely képes reagálni az ingerre (9.4 ábra). Ez egy maximális válasz.

rögzítse és mentse az összes próbát az asztalon. Célszerű gyakran menteni az adatokat (a Fájl: Mentés másként menü alatt) –az asztal laboratóriumi tanfolyam mappájában). Győződjön meg róla, hogy az állat és a labor részt tartalmazza a fájlnévben.

Fig. 9.4. Példa a béka ülőidegéből rögzített összetett akciós potenciálokra (felső nyom) az inger erősségének növelésekor (alsó nyom) a 8.LabChart szoftver segítségével. A több felvételnek megfelelő nyomok egymásra helyezkednek. A nagyobb erősségű ingerek nagyobb amplitúdójú kétfázisú összetett akciós potenciált eredményeznek.

a refrakter periódus mérésére
amikor két ingert alkalmaznak az idegre nagyon gyorsan egymás után, az ideget alkotó neuronok egy része vagy mindegyike nem képes reagálni a második ingerre, mert a nátriumcsatornák inaktiválódnak. Ellenállnak a második ingernek.

1. nyissa meg a frog tűzálló fájlt. Az impulzusmagasság (inger amplitúdó/feszültség) ebben a fájlban előre be van állítva 0,5 V-ra, és a kísérlet ezen részében nem változik.
2. ellenőrizze, hogy az impulzusrés szélessége (a két inger impulzus közötti intervallum) 7 ms-ra van-e beállítva.
3. nyomja meg a start gombot.
4. két azonos magasságú, 7 ms-mal elválasztott akciós potenciálnak kell megjelennie (ábra. 9.5).
5. most a lefelé mutató nyílra kattintva csökkentse a két inger közötti impulzusrés szélességét (ingerintervallum) 0,5 ms-os lépésekkel. Amint csökkenti az ingerek közötti impulzusrés szélességét, a második akciós potenciál amplitúdója csökkenni kezd. Jegyezze fel a rés szélességét, amikor megfigyeli ezt a csökkenést. Ez a késés az ideg relatív refrakter periódusát jelenti. Mi történik?
6. folytassa az impulzusrés szélességének csökkentését. Vegye figyelembe, hogy előfordulhat, hogy kisebb időközönként csökkentenie kell, amikor az impulzusok közelebb kerülnek egymáshoz.
7. vegye figyelembe azt az időt, amikor a második akciós potenciál eltűnik, az összes Neuron refrakter a második ingerre.

ábra. 9.5. Az iker impulzusok által stimulált összetett akciós potenciálok bizonyítják a béka ülőidegének refrakter periódusát. A LabChart segítségével több felvételből nyert nyomok 8 egymásra vannak helyezve.

vezetési küszöb és sebesség a földigiliszták idegeiben

Megjegyzés: Az eljárás egyes részeit az ADInstruments munkatársai által írt protokoll alapján módosítják, és a PowerLab műszerek megvásárlásával biztosítják.
a közönséges földigilisztáknak óriási rostrendszerük van, amely egyetlen középső óriásszálból és Két oldalsó óriásszálból áll. A két oldalszálat számos keresztkötés köti össze, és egyetlen axonként működnek.

kísérleti beállítás

1. helyezze a földigilisztát egy Petri-csészébe, amely 10% etanolt tartalmaz földigiliszta sóoldatban. Hagyja a földigilisztát teljesen érzésteleníteni (azaz amíg meg nem áll, még akkor is, ha szondázzák); ellenőrizze 10 perc múlva, majd nagyon 5 perc múlva. helyezze a férget a boncoló tálcára, és érintse meg a fejét vagy a farkát, ha mozgást lát helyezze vissza a férget az érzéstelenítésbe.
2. ellenőrizze a vezeték csatlakozását (Lásd az ábrát. 9A)
3. helyezze a földigilisztát háti (sötét) oldalával felfelé a boncolótálcára. Helyezze a fej végét (a clitellummal együtt ) a tálca tetejére (9.6 ábra). Vigyázzon, ne nyújtsa túl messzire a földigilisztát, mert ez károsíthatja az idegzsinórt.
4. helyezzen két stimulátor csapot körülbelül 2 cm-rel a clitellum alá. Csatlakoztassa a stimulátor vezetékeket, amelyek az energialabor felől érkeznek a boncoló csapokhoz. A negatív ólomnak (katód, fekete) a pozitív ólom (anód, piros) mögött kell lennie.
5. a három rögzítőelektróda (G, R1, R2) klórozott ezüsthuzalok. Óvatosan helyezze be őket a féregbe az ábrán látható módon. 9.6B sorrendben G, R1, R2 a féreg testének középső szakaszában a negatív elektróda alatt. A csapok meglehetősen közel helyezhetők el egymáshoz. Helyezze az R2 elektródát körülbelül 0,5-1 centiméterrel az R1 elektróda mögé.
6. mérjük meg a második stimuláló elektróda (fekete katód) és az első felvevő elektróda (R1) közötti távolságot mm-ben, és jegyezzük fel ezt a mérést. Ez az a távolság, amelyet az akciópotenciál megtett a felvétel során.
7. előfordulhat, hogy a teljes földigilisztát időnként meg kell nedvesíteni a 10% – os etanol/sóoldattal egy szemcsepp segítségével. Törölje le a felesleges sóoldatot a féregből egy papírzsebkendővel.

B

ábra. 9.6. A PowerLab beállítása a földigiliszták akciós potenciáljának rögzítésére B. A földigiliszta anatómiája és elektróda elhelyezése a földigilisztánon

a mediális és laterális axonok küszöbfeszültségének meghatározása, a vezetési sebesség kiszámítása , valamint az oldalsó óriás axon felvételének megfigyelése

1. nyissa meg a wormap fájlt a számítógép asztalán.
2. kattintson a start gombra. A hatókör egy sweep-et jelenít meg. Az elhajlást közvetlenül a sweep megkezdése után az inger feszültségének egy része a rögzítő elektródákra terjedése okozza. Ez az úgynevezett inger artifact.
3. növelje a kimenetet 0-val.05 volt az amplitúdó felfelé mutató nyílra kattintva. Panel.
4. ismételje meg a 2.és 3. lépést az amplitúdó 0,05 voltos növelésével minden kísérletnél, amíg meg nem jelenik a medián óriás axon válasza.
5. amikor a medián óriás axon válaszát látja (ábra. 9.7), jegyezze fel a küszöbértéket. Ha nem lát választ, és 1 V-nál nagyobb ingert használ, kérjen segítséget.
6. addig növelje az ingert, amíg egy második választ nem észlel hosszabb látens periódussal (ábra. 9.7). Kattintson a Stop gombra, és jegyezze fel ezt a küszöböt az oldalsó óriásszálakhoz.
7. mentse a fájlt az asztalra.
8. a vezetési sebesség kiszámításához helyezze a jelölőt az inger tárgy elejére, a hullámforma kurzort pedig az akciós potenciál csúcsára (ábra. 9.7). Olvassa el az időeltolódást a hatókör ablak felső részén.
9. osszuk el az inger és a rögzítőelektródák közötti (korábban mért) távolságot a csúcsok közötti időeltolódással, hogy meghatározzuk a vezetési sebességet mm/ms-ban, amely könnyen átalakítható m/s-ra.

Fig. 9.7. Elektrofiziológiai felvétel a földigiliszta ventrális idegzsinórjáról, akciós potenciált mutat a középső és oldalsó óriásrostokból.

10. Dobja el a fájlt, vagy helyezze a labor szakasz mappájába.

hozzárendelés

a labor anyagát a labor gyakorlati része tartalmazza (a labs 7 & 8 anyagával együtt) . Győződjön meg róla, hogy megértette a lefedett fogalmakat, számításokat, statisztikai teszteket és grafikonokat.

eredmények:
használja az egész osztály adatait a három vizsgált ideg átlagos vezetési sebességének összehasonlításához. Végezzen ANOVA-t, összehasonlítva az emberi, béka és földigiliszták idegeinek vezetési sebességét (m/s). A különbség szignifikáns a 0,05 valószínűségi szinten? Van-e különbség a vezetőképességben az ember, a béka és a földigiliszta idegeiben?

megbeszélés:
az ebben a laborban gyűjtött adatok összehasonlíthatók a gerinces és gerinctelen állatok sokféle idegének korábban dokumentált vezetési sebességével. Az Ön adatai összhangban vannak ezzel a szélesebb adathalmazzal?

Fig. 9.8. Az idegimpulzus vezetésének sebessége a szálátmérő függvényében különféle állatokban. Bullock és Horridge, 1965: a gerinctelenek idegrendszerének szerkezete és működése. W. H. Freeman és társai.

Egyéb laborok ebben a szakaszban

Lab 7: gerinces anatómia
Lab 8: gerinces keringés és légzés