a kolloid ezüst In Vitro értékelése az Immunfunkcióról: Antilymphoproliferatív aktivitás

absztrakt

a kolloid ezüstöt (AgC) jelenleg az emberek használják, és belégzéssel, injekcióval, lenyeléssel és bőrrel való érintkezéssel internalizálható. Az immunológiai aktivitásról azonban korlátozott információ áll rendelkezésre; további vizsgálatokra van szükség kolloid ezüst felhasználásával. Jelen tanulmányban az AgC hatásai (17.Humán perifériás vér mononukleáris sejtjeit (pbmc) és makrofágjait (fagocitózis), valamint leukémia és lymphoma rákos sejtvonalakra gyakorolt citotoxicitását (1,75-17,5 ng/mL) alkalmazó immunológiai paramétereket (proliferáció és immunofenotipizálás) vizsgáltak. Az AgC szignifikánsan () csökkentette a phytohemagglutinin vagy a concanavalin A által indukált interleukin-2 (IL-2) termelést és proliferációt a PBMC-ben anélkül, hogy befolyásolta volna a sejt életképességét, de citotoxikus hatással volt a rákos sejtekre. Az IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, INF-ons és IL-17A citokinek termelését, valamint a CD3+, CD3−CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ és CD16+CD56+ PBMC fenotípusokat az AgC nem befolyásolta. Ez a tanulmány azt mutatja, hogy a kolloid ezüst ártalmatlan és nem mérgező az immunrendszer sejtjeire, és az a képessége, hogy mitogénekkel stimulálva csökkenti az immunválaszt a sejtproliferáció csökkentésével, bizonyította az AgC antilymphoproliferatív potenciálját.

1. Bevezetés

az anyagok Bioaktivitását átvilágították a tumorellenes vagy antiproliferatív hatással kapcsolatos tulajdonságok azonosítása érdekében . Az ilyen aktivitású termékeket a klinikai gyakorlatban rák vagy gyulladással kapcsolatos betegségek, például autoimmunitás kezelésére használták. Az ezüst termékeket évezredek óta használják higiéniára és antimikrobiális szerként. 1964 óta a kolloid ezüstöt (AgC) biocid anyagként regisztrálták az Egyesült Államokban ; Mexikóban az AgC-t általában víz-és élelmiszer-fertőtlenítőszerként használják emberi fogyasztásra . Általában ezek a termékek fémes nanorészecskék keveréke, amelyek oxidációs állapota nulla (Ag+0) és ezüstsók, amelyek oxidációs állapota Ag+1, +2 vagy +3 . Vannak olyan vizsgálatok, amelyek azt mutatják, hogy az antibakteriális és tumorellenes tulajdonságok az ezüst oxidációs állapotától függenek . Az ezüst nanorészecskék (AgNPs) és az ezüstionok (Ag+) különböző szintű toxicitást mutatnak a felületes töltéskölcsönhatások miatt. Az ezüstionok mérgezőbbek, mert kölcsönhatásba léphetnek a negatív fehérjecsoportokkal, szerkezeti változásokat eredményezve a sejtmembránon és a citoplazmatikus fehérjéken, míg az AGNP-k kölcsönhatásba léphetnek a DNS-sel, károsodást és szerkezeti blokkolást okozva; egyes tanulmányok azt javasolták, hogy ezek a nanostruktúrák fokozott toxicitást okozhatnak hosszú expozíciós időkben, mivel az AGNP-k vizes oldatokban oxidálhatják és felszabadíthatják az ezüstionokat; a kolloid ezüst oldatok sikeres alkalmazása ezzel a hatásmechanizmussal magyarázható . Az AgC rákellenes aktivitása az MCF – 7 rákos sejteken valószínűleg a laktát-dehidrogenáz csökkentésével és a szuperoxid-diszmutáz aktivitás növelésével indukált apoptózisnak köszönhető; ezzel szemben a PBMC-ben a laktát-dehidrogenáz aktivitás csökkent az AgC-vel, de nem korrelált a sejthalállal . Kevés tudományos információ áll rendelkezésre az emberek immunológiai és rákparamétereiről a kolloid ezüst hatásairól, mint a nanorészecskék és ionok keveréke, összehasonlítva az ezüst nanorészecskék kutatásával. Jelen tanulmány célja a kolloid ezüst antiproliferatív tulajdonságainak, valamint a celluláris immunfenotipizálásra, a citokinek termelésére és a PBMC fagocitózisára gyakorolt hatásának feltárása volt.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Kolloid ezüst (AgC)

a GRENETIN-stabilizált kolloid ezüstöt a MICRODYN-től (M) vásárolták 0,35% – os törzsoldatként. Szűréssel sterilizáltuk (0,2 Ft-os szűrő, Millipore, USA), majd 10,5 Ft/mL-es koncentrációra hígítottuk RPMI-1640-gyel, in vitro vizsgálatokhoz 10% – os FBS-sel kiegészítve.

2.2. A

fitohemagglutinint (5 ~ g/mL dózisban) és a concanavalin A-T (5 ~ g/mL dózisban) a Sigma-Aldrich-től (St. Louis, MO, USA) vásárolták. A doxorubicint (LEMERY S. A. de C. V., M) 3,4 mM-es törzsoldatként tárolták rpmi 1640-ben szobahőmérsékleten, és az LPS-t (E. coli 0111:B4, Sigma-Aldrich) 10 ng/mL-en állítottuk elő humán perifériás vér mononukleáris sejtjeinek kezelésére.

2.3. AgC jellemzése

a kolloid ezüst morfológiáját terepi emissziós pásztázó elektronmikroszkóppal (sem) (Nova NanoSEM200 FEI) vizsgáltuk. A kolloid oldatot (50 ft) szénszalagra helyeztük és szobahőmérsékleten szárítottuk. A nanorészecskék méretének és eloszlásának mérését dinamikus fényszórás (DLS) alkalmazásával határoztuk meg, amelyet egy nanosizer ns 90 Malvern Instruments (Malvern Instruments, UK) végzett; a DLS által megadott méreteloszlásokat az intenzitás százalékában jelentették, és az eredményeket legalább három mérés átlagértékeként mutatták be. Az UV-vis-szel mért rezonancia plazmont 300 és 600 nm közötti tartományban figyelték meg a 2000-es NanoDrop spektrofotométer (Thermo Fisher Scientific) segítségével.

2.4. A perifériás vér mononukleáris sejtjeinek (Pbmc) izolálása

egészséges emberi önkéntesektől heparinizált fecskendőkkel nyerték a vért, és steril polipropilén csövekbe helyezték. A PBMC-t tovább izoláltuk Histopaque 1,077 sűrűséggradiens centrifugálással 400 g-on 30 percig 25 Kb-on (Sigma-Aldrich). A PBMC-t kétszer mossuk RPMI 1640 táptalajjal, kiegészítve 10% magzati szarvasmarha szérummal (FBS) és 1% antibiotikum-antimikotikus oldattal (a továbbiakban: teljes rpmi táptalaj) 250 g-on 10 percig, 25 Kb-n.

2,5. A sejtek életképessége

a PBMC-t teljes RPMI-táptalajban 1 ~ 106 sejt/mL-re állítottuk be, és 17,5 ng/mL kolloid ezüstöt adtunk hozzá, majd 72 órán át inkubáltuk 37 ~ C és 5% CO2 atmoszférában. Ezt követően a felülúszót 250 g-os centrifugálással távolítottuk el. a sejteket ezután kétszer mossuk teljes RPMI táptalajjal. A sejtek életképességét kolorimetriás MTT redukciós vizsgálattal határoztuk meg, és a formazán termelésből származó optikai sűrűséget 570 nm-en mértük. A sejtek életképességét százalékos életképességben fejezték ki a kezeletlen kontrollhoz képest. Az eredményeket három független kísérlet átlagos 6 SD-jeként adtuk meg.

K562 (krónikus mieloid leukémia), MOLT-4 (akut limfoblasztos leukémia), Ramos (Burkitt-limfóma) és L5178Y (lymphoma) rákos sejtvonalakat vásároltak az American Type Culture Collection-től (ATCC, Manassas, VA, USA), és teljes RPMI táptalajban tartották fenn. A sejteket 37 db C és 5% CO2 atmoszférában tenyésztettük. A rákos sejtvonalakat (5 db 103 sejt / kút) 96 lyukú lemezeken vontuk be, és 24 órán át inkubáltuk 37 db 6% – os CO2 atmoszférában.

inkubálás után a táptalajt eltávolítottuk, és 1,75-17,5 ng/mL koncentrációban kolloid ezüstöt adtunk hozzá. A lemezeket ezután 5 órán át inkubáltuk 37 6% – os C és 5% CO2 atmoszférában. Ezt követően a felülúszót eltávolítottuk, és a sejteket kétszer mossuk RPMI 1640 táptalajjal. A sejtek életképességét a trypan blue exclusion módszerrel határozták meg, és a citotoxicitást 50% – os (LD50) és 100% – os (LD100) sejtnövekedés gátlásban fejezték ki a kezeletlen kontrollhoz képest. Az eredményeket három független kísérlet átlagos 6 SD-jeként adtuk meg.

2.6. Citokinek vizsgálata

az AgC-vel kezelt PBMC Felülúszóit elemeztük a citokinek szintje szempontjából. Az IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-xhamsterre, TNF-xhamsterre és IL-17A humán citokineket áramlási citometriával határoztuk meg (Accuri C6, BD Bioscience, CA, USA), CBA Th1/Th2/Th17 citokin Kit bd (bd Bioscience, Bedford, MA, USA), a gyártó utasításait követve. A CBA Flex Set analízist FCAP array v1.0 szoftverrel (Soft Flow Inc., USA). A fehérjeértékeket további összehasonlítások céljából NIBSC/WHO fehérjeszabványokká alakítottuk át.

2.7. A proliferációt és az IL-2 vizsgálatot

PBMC-t Hisztopaque sűrűséggradiens centrifugálással izoláltuk, háromszor PBS-sel mostuk, és 106 sejt/mL-es C hígítóban reszuszpendáltuk. A sejtszuszpenziót ezután azonos térfogatú, 2,5 mM-es PKH26 festékkészlettel (Sigma, St. Louis, MO) hígítottuk C hígítóban, 3 percig inkubáltuk szobahőmérsékleten, majd egyenlő térfogatú FBS-hez adtuk, majd szobahőmérsékleten további 2 percig inkubáltuk a címkézés leállításához, a “Rimaniol et al., 2003 .”Ezt követően a PBMC-t 1 db 106 sejt/mL koncentrációban állítottuk be, kolloid ezüsttel kezeltük 17,5 ng/mL, PHA vagy Con a koncentrációban, és 72 órán át inkubáltuk 37 db C és 5% CO2 atmoszférában; a sejtproliferációt áramlási citometriával határoztuk meg. A PBMC felülúszóinak IL-2-tartalmának mennyiségét humán IL-2 nagy érzékenységű ELISA kit (kimutatási határ 0,4 pg/mL) segítségével mértük, és a gyártó utasításainak megfelelően használtuk (eBiosciences, Bécs, Ausztria).

2.8. A nitrit/nitrát termelés meghatározása

a nitriteket és a nitrátszinteket a gyártó utasításai szerint a nitrát-reduktáz (nitrát/nitrit kolorimetriás vizsgálati készlet Cayman, USA) alkalmazásával kolorimetriás Griess-reakcióval mértük. A szérum nitritet / nitrátot nM/200 6L-ben fejezték ki.

2.9. A

Pbmc sejtfelszíni antigének áramlási citometriás analízisét 1 db 106 sejt/mL koncentrációban korrigáltuk, és kolloid ezüsttel kezeltük 17,5 ng/mL koncentrációban, és a lemezeket 72 órán át inkubáltuk 37 db C és 5% CO2 atmoszférában. Ezt követően a sejteket 600 g-on 10 percen át tartó centrifugálással gyűjtöttük össze, majd egy CD3+ FITC/CD8+, PE/CD45+ és PerCP/CD4 APC antitestkészletet vagy egy másik CD3+ FITC/CD16+, CD56 PE/CD45 és PerCP/CD19 APC antitestkészletet (BD Multitest IMK Kit) adtunk hozzá, és 15 percig inkubáltuk szobahőmérsékleten sötétben. Az eritrocitákat ezután 450 6x bd FACS ~ lizáló oldat hozzáadásával lizáljuk, majd 15 percig szobahőmérsékleten, sötétben inkubáljuk. A mintákat ezután készen álltuk a citométeren történő elemzésre. Az akvizíciót Accuri C6 BD műszeren hajtották végre BD Multiset szoftverrel a BD Worklist Manager szoftverrel. Automatizált kapuzást használtunk az egyes részhalmazok populációjának egyszerű elemzéséhez.

2.10. FITC-dextrán felvétel

dendritikus sejteket (DCs) állítottak elő PBMC-ből, és hagyták, hogy tapadjanak 0,22 db-os szűrőfedeles tenyészlombikhoz (TPP, Németország). 2 óra elteltével, 37 6c-nél a nem-adherens sejteket eltávolítottuk, majd az adherens monocitákat 5 napon át tenyésztettük RPMI-1640-ben, 10% FBS-sel és 800 U/mL rhuGM-CSF-el (Peprotech, M) és 50 ng/mL IL-4-gyel (Peprotech, M) kiegészítve. Ezt követően a sejteket kolloid ezüsttel kezeltük 17,5 ng/mL koncentrációban, és 72 órán át inkubáltuk 37 6CC és 5% CO2 atmoszférában. A DCs endocitózist 1 db 106 sejt inkubálásával értékeltük 1 mg / mL FITC-dextránnal (BD) 30 percig 37 dB C. Mosás után a sejteket áramlási citometriával elemeztük. A kontrollok közé tartoztak a fitc-dextránnal inkubált tubusok 4CC-n, hogy gátolják az endocitikus folyamatot és a 0-időpontban végrehajtott bazális felvételt. A felvételt FACS-analízissel számszerűsítettük (10 000 sejt / pont) . Az életképességet a trypan blue kizárási technika határozta meg.

2.11. Statisztikai elemzés

az eredményeket ANOVA–val értékelték, és a kezelések közötti medián citokinszinteket Mann-Whitney teszttel hasonlították össze.

3. Eredmények

3.1. Kolloid ezüst jellemzése

a vízben és sejttenyésztő közegben oldott kolloid ezüst jellemzését dinamikus fényszórással (DLS) elemeztük; a vízben oldott kolloid ezüst átlagos mérete 100 nm volt, polidiszperzitási indexe 0,2; a sejttenyésztő közegben oldott kolloid ezüst átlagos mérete 155 nm volt, a polidiszperzitási indexe pedig 0,23 (1.A) és 1. b) ábra). A SEM kép 50 és 190 nm közötti részecskeméretű vízben oldott részecskepopulációt mutatott(1. C) és 1. d) ábra); a sejtkultúrában oldott kolloid ezüst nanorészecskék és bizonyos ezüstsók kombinációját mutatta(1.E) és 1. f) ábra); a DLS által kapott átlagos méret azonban korrelált a részecskék hisztogramjával és a jellegzetes plazmonrezonanciával(1. g), 1. h) és 1. i) ábra). A kolloid ezüst elemzése azt sugallja, hogy ez a megoldás félgömb alakú és heterogén populációval rendelkezik, amelyet nanorészecskék és ezüstsók által alkotott klaszter alkot. Miután az AgC-t jellemeztük, elkezdtük értékelni a különböző biológiai hatásokat.

ábra 1

a kolloid ezüst Méreteloszlása. a) a vízben oldott kolloid ezüst DLS átlagos mérete 100 nm volt, polidiszperzitási indexe 0,2 volt. B) sejtkultúrában oldott kolloid ezüst DLS-mérése, átlagos mérete 155 nm, polidiszperzitási indexe 0,23. (c, d) sem kép részecskék populációk vízben oldott. (e, f) sejttenyésztő közegben oldott kolloid ezüst SEM képe. (g, h) vízben oldott részecskék Hisztogramja, illetve táptalaj. I. a kolloid ezüst UV-vis spektruma. J) a tápközegben oldott kolloid ezüst mintáiban képződött ezüstsók. DLS, dinamikus fényszórás; sem, pásztázó elektronmikroszkópia; és a. u., tetszőleges egységek.

3.2. A sejtproliferáció és az IL-2 termelés meghatározása

először meghatároztuk, hogy az emlőrákos sejtekben korábban alkalmazott citotoxikus dózis befolyásolja-e a limfociták vagy a makrofágok működését. Az eredmények azt mutatták, hogy a kolloid ezüst kezelés nem befolyásolta szignifikánsan () a PBMC sejtproliferációját és sejtszámát, és a con A vagy PHA mitogénekkel végzett kezelések jelentősen () növelték a sejtproliferációt és a sejtszámot a kezeletlen kontrollhoz képest; érdekes módon az AgC/Con a vagy AgC/PHA kombinált kezelések jelentősen () csökkentették a PBMC sejtproliferációját és sejtszámát (2.és 3. ábra). Hasonló eredményeket figyeltek meg áramlási citometriával és fluoreszcens mikroszkópiával a pkh26 fluoreszcens festékkel (kontroll (94%), Con A (165%), PHA (156%), AgC (91%), AgC + Con A (80%) és AgC + PHA (77%)) (3., 4. és 5. ábra). Ezenkívül az AgC kezelés nem befolyásolta az IL-2 termelést a kontrollhoz képest (15 pg/mL) (), de az IL-2 termelés növekedését tapasztalták, amikor a PBMC-t Pha-val (176 pg/mL) vagy Con A-val (150 pg/mL) stimulálták, és az AgC + Con A-val (15 pg/mL) vagy AgC + PHA-val (13 pg/mL) végzett kezelések csökkentették az IL-2 termelést () (4.ábra).

ábra 2

kolloid ezüsttel és mitogénekkel kezelt PBMC sejt életképessége. PBMC (1 × 106 sejt/mL) kezeltek Con Egy (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con Egy (5 µg/mL), vagy AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), majd inkubáljuk 72 h a 37°C-on, 5% CO2 légkörbe. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal elemeztük. Az adatok három független kísérlet átlaga, a standard deviációja. . AgC, kolloid ezüst; PHA, fitohemagglutinin; és Con A, concanavalin A.

ábra 3

kolloid ezüsttel és mitogénekkel kezelt PBMC sejtszám. PBMC (1 × 106 sejt/mL) kezeltek Con Egy (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con Egy (5 µg/mL), vagy AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), majd inkubáljuk 72 h a 37°C-on, 5% CO2 légkörbe. A sejtszámot áramlási citometriával elemeztük. Az adatok három független kísérlet átlaga, a standard deviációja. . AgC, kolloid ezüst; PHA, fitohemagglutinin; és Con A, concanavalin A.

ábra 4

kolloid ezüsttel és mitogénekkel kezelt PBMC Sejtproliferációja és IL-2 termelése. PBMC (1 × 106 sejt/mL) kezeltek Con Egy (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), vagy AgC (17.5 ng/mL) + Con Egy (5 µg/mL), majd inkubáljuk 72 h a 37°C-on, 5% CO2 légkörbe. A PKH26 expresszióján alapuló sejtproliferációt áramlási citometriával elemeztük. Az IL-2 felülúszókat ELISA teszttel értékelték. Az adatok három független kísérlet átlaga, a standard deviációja. . AgC, kolloid ezüst; PHA, fitohemagglutinin; és Con A, concanavalin A.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

ábra 5

a pbmc sejtes proliferációja kolloid ezüst és mitogének. PBMC (1 × 106 sejt/mL) kezeltek (a) negatív kontroll, (b) ellenőrzés, (c) PHA (5 µg/mL), (d) az Elítélt A (5 µg/mL), (e) AgC (17.5 ng/mL), (f), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), vagy (g) AgC (17.5 ng/mL) + Con Egy (5 µg/mL) majd inkubáljuk 72 h a 37°C-on, 5% CO2 légkörbe. A sejtproliferációt mikroszkópos fluoreszcenciával elemeztük. AgC, kolloid ezüst; PHA, fitohemagglutinin; és Con A, concanavalin A.

3.3. Az AgC citotoxikus hatása a limfoid és leukémiás rákos sejtvonalakra

eredményeink megerősítették az AgC antiproliferatív és citotoxikus tulajdonságait a leukémiás (Molt-4 és K562) és lymphoma sejtvonalakra (Ramos és L5178Y) dózisfüggő módon (1,75-17,5 ng/mL) () (6.ábra).

ábra 6

a kolloid ezüsttel és mitogénekkel kezelt rákos sejtvonalak sejt életképessége. A k562, a Molt-4, A Ramos és az L5178Y rákos sejtvonalakat (5 db 603 sejt/kút) több adag AgC-vel kezeltük, és 5 órán át inkubáltuk 37 db C és 5% CO2 atmoszférában. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal elemeztük. Az adatok három független kísérlet átlaga, a standard deviációja. . AgC, kolloid ezüst.

3.4. A citokin meghatározása

az AgC-kezelés mellett a kezeletlen kontrollhoz képest nem befolyásolta az IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-6, IL-17A (0 pg/mL) vagy TNF-6 (5, 84 pg/mL) termelődését. A pozitív kontrollként alkalmazott LPS-kezelés azonban az összes értékelt citokin magas termelését indukálta (1.táblázat).

3.5. A sejtfelszíni markerek fenotipizálása

eredményeink azt mutatták, hogy az AgC kezelés nem befolyásolta a CD3+ (79,7%), CD3−CD19+ (10,2%), CD3+CD4+ (52,2%), CD3+CD8+ (33,9%) és CD16+CD56+ (7,6%) sejtpopulációk expressziójának százalékos arányát a kontrollhoz képest () (2.táblázat).

3.6. Peroxinitritek és Fitc-dextrán felvétel

a kolloid ezüst kezelés (99%) nem befolyásolta a dendrites sejtek életképességét (7(A) ábra) vagy a vizsgált peroxinitritek szintjét (7(b) ábra), de növelte a fagocitózis százalékos arányát (7(c) ábra) a kontrollhoz képest ().

(a)

(b)

(c)

a)
b)
c)

ábra 7

az emberi makrofágok sejt életképessége, fagocitózis és peroxinitritek termelése. A humán makrofágokat (1 db 606 sejt) AgC-vel kezeltük, és 5 órán át inkubáltuk 37 db C és 5% CO2 atmoszférában. a) a sejtek életképességét trypan blue vizsgálattal elemeztük. b) A Fitc-dextrán makrofágok fagocitózisa áramlási citometriával értékelve. C) Griess-reakcióval meghatározott nitrát/nitrit (nitrát/nitrit kolorimetriás vizsgálati készlet); az LPS-t pozitív kontrollként használtuk. Az adatok három független kísérlet átlaga, a standard deviációja. . AgC, kolloid ezüst; FITC-dextrán, fluoreszcein izotiocianát-dextrán; és LPS, lipopoliszacharid.

4. Vita

ismert, hogy a rák kezelésében alkalmazott számos kemoterápiás szer (ciklofoszfamid, vinblasztin, vinkrisztin, bleomicin és ciszplatinum) antiproliferatív és citotoxikus hatással rendelkezik; de alacsony dózisokban stimulálhatják az immunválaszt . Bármely anyag immunrendszerre gyakorolt hatását meg kell vizsgálni, mivel a rendszer bármilyen károsodása befolyásolhatja a test homeosztázisát. Jelen tanulmányban a kolloid ezüst analízise az ezüstsók által alkotott nanorészecskék és klaszterek heterogén populációjának jelenlétére utal, amely valószínűleg a teljes tápközegben található fehérjékkel való kölcsönhatásból származik. Beszámoltak az ezüst részecskék biológiai folyadékokban való aggregációs hatásáról a fehérjék és lipidek jelenléte miatt . Ezenkívül eredményeink azt mutatták, hogy az AgC (17,5 ng/mL) gátolhatja a mitogének által indukált IL-2 termelését. Ezért a PBMC-ben indukált immunszuppressziót az IL-2 felszabadulás gátlása közvetítheti. Egyes gyógyszerek, mint például a ciklosporin és az azatioprin immunszuppresszív hatását alátámasztja a limfociták proliferációjának és a citokinek termelésének gátlása (INF-CAC, IL-2, RANTES, TGF-CAC és TNF-CAC), amikor a limfocitákat reagensek, például PHA, Con A vagy pokeweed mitogén stimulálják . Az IL-2 A T-sejtek autokrin növekedési faktora, termelését a takrolimusz (FK506) vagy mikofenolsav immunszuppresszánsokkal végzett kezelés szelektíven gátolta . Ismert, hogy immunszuppresszív szereket (kortikoszteroidokat) alkalmaznak a limfoid rosszindulatú daganatok kezelésére, mivel ezek a rosszindulatú limfoid sejtek apoptózisát indukálják . Kimutattuk az AgC (155 nm) antiproliferatív és citotoxikus tulajdonságait (1,75-17,5 ng/mL dózis) leukémiás és lymphomatous sejtvonalakon, annak ellenére, hogy a korábbi jelentések megemlítették, hogy a 10-100 nm átmérőjű ezüst részecskék citotoxikusabbak, mint a nagyobb méretű részecskék . Szükséges ismerni a pbmc és a myeloid és lymphoid eredetű rákos sejtek közötti szelektivitás mechanizmusát, és a jövőben vizsgálatokat kell kidolgozni a receptor által közvetített apoptózis területén, amint azt a “Vega and De Maio, 2005 .”A limfóma kezelésében a glükokortikoid rezisztencia miatt a tumorsejtek glükokortikoidok jelenlétében folytatják terjeszkedésüket . Ezért az AgC új klinikai lehetőséget kínálhat, amelyet figyelembe kell venni, de további vizsgálatokra van szükség. Másrészt eredményeink azt mutatják, hogy a citokinek termelése és a T, B és NK sejtek által kifejezett felületi markerek százalékos aránya nem befolyásolja az AgC-t (17,5 ng/mL), szemben más immunszuppresszorokkal, mint például a rapamicin vagy a szoraphen, amelyeknél az immunszuppresszor hatás a jelátviteli út interferenciájának és a zsírsavak metabolizmusának tulajdonítható . Továbbá bizonyíték van arra, hogy az immunrendszer sejtjei aktiválódhatnak a biológiai anyagokra adott válaszként, bár MHC/peptid/TCR indukált jelátviteli utak nem várhatók. Az alternatív, nem felismert utak azonban aktiválódáshoz vezethetnek a glikoproteinek térhálósításával a plazmamembrán felületén, például mitogén indukálta limfocita proliferáció . A peroxinitritek tekintetében a kolloid ezüst (17,5 ng/mL) nem indukálta termelésüket, de a fagocitózis aktivitása valószínűleg a kolloid ezüst nem specifikus felvétele miatt nőtt. Más szerzők leírták, hogy az ezüst nanorészecskék 5, 10, 15 és 100 nm tartományban növelik a mitokondriális funkciót befolyásoló reaktív oxigénfajokat, és hogy az ezüst részecskék fagocitózisa blokkolja a sejtciklust az S-fázisban, és stimulálja a gyulladásos jelátvitelt a reaktív oxigénfajok generációján keresztül, majd a TNF-ons kiválasztását, ami csökkentette a patkány májsejtek életképességét .

összefoglalva, ez a tanulmány bemutatja a kolloid ezüst nem toxikus hatását az immunrendszer sejtjeire, és azt a képességét, hogy mitogénekkel stimulálva csökkenti a sejtproliferációt, ami arra utal, hogy a kolloid ezüst immunszuppresszív szernek tekinthető, de további vizsgálatokat kell végezni annak hatékonyságának és hatásmechanizmusának megállapításához.

versengő érdekek

a szerzők kijelentik, hogy nem áll fenn összeférhetetlenség a cikk közzétételét illetően.

Köszönetnyilvánítás

ezt a tanulmányt a Nuevo Leon Autonóm Egyetem Biológiai Tudományi Karának immunológiai és virológiai laboratóriuma támogatja, San Nicol ons de los Garza, NL, Mexikó, együttműködve a “Red temet Inmunologica de Inmunologgal, a 253053-as nyilvántartással, CONACYT.