Anatomy & Physiology

ezt a vizsgálatot az állatház laboratóriumi állatainak gondozására és felhasználására vonatkozó szabályokkal és szabályozással végezték el, és a vonatkozó kísérletet a központi állat Etikai Bizottság hagyta jóvá. 25 nőstény Svájci albínó egeret, átlagos életkoruk 45 nap és 25-35 GM volt, véletlenszerűen választottak ki az Állatházból, különböző tenyészkolóniákból. Ezeket a nőstény, nem terhes felnőtteket szándékosan kopulálták azonos fajtájú hím egerek azzal a céllal, hogy 10 további generációs kölyköt szerezzenek be. A műanyag polikarbonát ketrec rozsdamentes acél öntetek egyetlen erős és vaskos heterozigóta férfi helyeztük egyetlen nő a légkörben folyamatosan tartjuk 20-25c és 55 kb 5% Páratartalom, 12 óra után világos és sötét ciklus. A nőstény egereket hüvelyi keresztdugóra vizsgáltuk, és a well visualize dugó jelenlétét a terhesség megállapításának és a terhesség nulladik napjának jelöltük. A terhesség 7., 8. és 9. napján a bedugult nőstényeket hasi tapintással kockára tették a terhesség szempontjából.

az AgNps jellemzése

a kutatási beszerzési forrásokból származó ezüst nanorészecskék elsődleges méretét tem–Mel, sejtközegben történő agglomerációjukat foton keresztkorrelációs spektroszkópiával (PCC-k) és ultraibolya-látható (UV-Vis) spektroszkópiával, dinamikus fényszórással és Zéta-potenciállal értékelték. Az AgNps reprezentatív tem képeit mutatták be. A PVP bevonatú AgNps TEM képei szétszóródtak és felfüggesztettek 1.Az 5M NaCl megerősítette a gyártók által megadott elsődleges részecskeméretet. A bevonat nélküli ezüst nanorészecskék heterogén eloszlást találtak az 50-100 nm tartományban, legtöbbjük 71 nm körül volt.

a szuszpendált por AGNP-k esetében a TEM képek azt mutatták, hogy vizes környezetben az ezüst nanorészecskék összetapadnak és nagy aggregátumokat képeznek, amelyek közül sok nagyobb, mint 50 nm. Ez az eredmény összhangban van a dinamikus fényszórási módszerrel (Zeta sizer) kapott hidrodinamikai méreteloszlás eredményeivel. Az EDX elemzések megerősítették, hogy csak elemi ezüst került bemutatásra mind a kolloid, mind a száraz porított AgNps-ben. Az ICP-AES eredményei szerint az Ag ionok koncentrációja a kolloid és szuszpendált por agnps savval emésztett készleteiben 1908,1, illetve 447,2 mgl-1 volt. Az XRD minta eredményei szintén megerősítik a porított típusú AgNps kristályosságát, valamint az elemi kristályos ezüst jelenlétét, más fázisok is, a fémes ezüst kivételével, nem voltak jelen a mintában. Ezenkívül az XRF eredmények azt mutatták, hogy a porított típusú AgNps tisztasága 97,86% volt.

Agnps kolloid oldat expozíciója ismételt orális gyomorszondán keresztül

vemhes egereknek kétszer, normál sóoldattal (színlelt kontroll) adtuk vivőanyagként, 5, 10, 15, 20 mg/ttkg dózisban, ismételt orális gyomorszondán keresztül, 7-12 terhességi napon, tompa hegyű, ívelt tengelyű etetőtű és Van segítségével. A kezelt állatokkal és a kezeletlen állatokkal végzett kísérletekben a színlelt kontrollállatok szerepelnek.

boncolás és kizsigerelés

a GD 18, jobb és bal szarv a méh a terhes anya volt exteriorized következő ventrális laparotomia alatt mély éter/kloroform érzéstelenítés és 250 friss gyűjtött gátak boncoláson keresztül mossuk csapvízzel Petri-csészébe, hogy távolítsa el a vér és a magzatvíz és szárított szűrőpapír és dehidratált 95% – os alkohol 48hrs végre kitéve 1% KOH konzisztencia kizsigerelés és Alizarin festési protokollt Petricsészében a csontok megfelelő megjelenítése normális vagy rendellenes.13

módszer (a csontváz diszmorfológiájának értékelése zsigerelés és Alizarin festés technikájával)-:

a csontváz diszmorfológiai vizsgálatát zsigerelés és Alizarin festés technikájával végezték. Az egyes csoportok összes mintáját ( 50 kölyköt) 95% alkoholban (finomított szesz) dehidratáltuk 48 órán keresztül, majd folyó csapvízzel eltávolítottuk, majd 1% KOH oldattal kizsigereltük (KOH 1GM+100ml d.w.). A ventrális laparotomia elvégzése után a létfontosságú szerveket eltávolítják. A mintákat alaposan 1% – os kálium-hidroxid (KOH) oldatba mártottuk legalább 2-4 napig, amíg a hús, az ín, az izmok és a zsigerek átlátszóak voltak & tiszta és feloldódott, majd a csontok és porcok kristálytiszta láthatósága következett. Minden nap az oldatot megváltoztatták, amikor elszíneződött és hulladékká vált.

a kristálytiszta csont és porc látható mintát ezután ugyanabba az 1% KOH-ba helyeztük, majd 6-8 csepp 1% Alizarin foltot adtunk hozzá a mély lilásvörös színezéshez. Az oldatot óvatosan rázzuk néhány alkalommal óránként. Ezután ugyanezt az eljárást folytattuk további 2-3 napig annak érdekében, hogy mély lilásvörös színű legyen a csont és a porc. A minták bármilyen festésének és simításának eltávolításához ugyanazt 40% – on, 80% – on (40 ml glicerin+60 ml desztillált víz, 80 ml glicerin+20 ml desztillált víz) és 1-2 kristály timolt adnak hozzá a hosszú távú megőrzéshez, végül 100% glicerinben tartják fenn, a fénykép & erőteljes kézi lencse megfigyeléséhez.

összesen 250 magzatot gyűjtöttek 25 anyától 1, 2, 3, 4 és 5 csoportból, amelyek közül az összes mintát csontváz diszmorfológiai kísérletnek tették ki. 60 magzatot figyeltek meg reszorpciót.

statisztika

a csontrendszeri malformáció százalékos arányát minden csoportból értékelték, és a diszmorfológiában részt vevő csontok száma alapján értékelték, végül a dózisfüggő teratogenitási faktor tekintetében összehasonlították a csoport és a csoporton belüli százalékokat. Az erre a célra használt Multi ANOVA és leíró statisztikai (post hoc analízis) teszt.

megfigyelések és megállapítások

a csontrendszeri diszmorfológia százalékos aránya magasabb és legmagasabb volt a 15 mg AgNps és 20 mg AgNps/ ttkg kezelt csoportban (1.táblázat).

az alacsonyabb dózisú AgNps kezelt csoportok (0,5 & 1 mg/ttkg.) a csontrendszeri anomáliák nagyon minimális százalékát figyelték meg, így ezeket a kezelt csoportokat szinte kontrollcsoport magzatoknak tekintették (1.ábra).

1. ábra kontroll magzat Alizarin folt dorsalis nézet (A) és oldalnézet (B).

az 5 mg AgNps/ ttkg kezelt csoport kölykei közül az egyik a szegycsonti sávból a nem szegycsonti 5. szegycsonti szegmenst és a nem szegycsonti Manumbrium szegmenst mutatta, amelyet szegycsonti hasadékként diagnosztizáltak. Más magzatok maxilláris és mandibularis hypoplasiát, nem fésült frontális, parietális és orrcsontot, a csípőcsont posterior szegmensének fúziós kudarcát, a 10,11 és 12.bordát a magzat bal oldalán kezdetlegesnek látták. A 6-12. borda középső tengelyének hiánya, valamint az egymást követő bordák közötti tér növekedése különböző csoportokból származó több magzatban volt jelölve, és megnövekedett szövettérként diagnosztizálták, a test hiánya & a gerinces folyamat az egészből látható mellkasi csigolya szegmensek, amelyeket szoros típusú idegcsődefektusként diagnosztizálnak az esetek 1% – ában ebből a kezelt csoportból magzatok. A csontrendszeri diszmorfológia százalékos aránya ebben a csoportban 32% volt (2.ábra).

2. ábra 5 mg AgNps kezelt csoport magzat Alizarin folt dorzális nézet (A) és (B), oldalnézet (C) ventrális nézet (D) és dorzális nézet (E)

a 10 mg AgNps kezelt magzatok csontváz diszmorfológiát mutattak az ágyéki és a szakrális csigolya hiányában, a csípőcsontok hiányában, a súlyosan degenerált bordák porcok nélkül, a frontális és a parietális csont nem mutatott és fejletlen, scoliosis figyelhető meg a mellkasi és az ágyéki régióban az egyik magzatban, a nyakcsigolya hiánya látható, maxilláris hypoplasia, a sagittális csont felfedése koronális varratok is láthatók. Fejletlen alsó végtagi csontok láthatók az egyik magzat mindkét oldalán. A csontrendszeri diszmorfológia százalékos aránya ebben a csoportban 44% volt (3.ábra).

ábra 3 10 mg AgNps kezelt csoport magzat Alizarin folt háti nézet (A, B).

a 15 mg AgNps kezelt 8. csoport kölykei között megfigyelték a nyaki csigolyák hiányát a 12. borda hiányában, a csigolyák többi részét pedig fejletlen gerinces folyamatot figyeltek meg, a metatarsalis hasadék az egyik magzat lábának háti nézetén is látható, a ventrális nézetben nem csontozott csípőcsont a szegmens hiánya & fibrosis is látható, nem csontozott temporális csont, amely a koponya oldalnézetén fibrózisban található,az innominált csont proximális szegmensének hiánya, a gerincoszlop anomáliája a kezdetleges 6. és a 9. borda és a 10., 11. és 12. hiánya figyelhető meg az egyik magzat bordái, a nem vágott parietális csont is látható volt, a scoliosis csigolyákkal rendelkező anencephalia az L1-L5-ben volt látható az egyik magzatban, a csípőcsont nem volt látható, a magzat egyik hátsó nézetében mindkét oldal nem vágott scapulae volt látható, a porc hiánya a 6.-12. borda az egyik magzatban. A csontrendszeri diszmorfológia százalékos aránya ebben a csoportban 60% volt (4.ábra).

4. ábra 15 mg AgNps kezelt csoport magzat Alizarin folt dorzális nézet (A, B) és ventrális nézet (C)

a 20 mg/ ttkg. Az AgNps-szel kezelt Csoportos magzatokat mutatták be a csontváz diszmorfológiájának legnagyobb százaléka (76%). Gerincferdülés volt látható az ágyéki régióban az egyik a magzat, egy magzat mutatott unossified occipital csont, unossified scapula és a csípő csont, nagy fibrózis figyelhető meg a maxilla, frontális és parietális csontok, ugyanez is megfigyelhető a második-hatodik szegmens a szegycsont., hasadék figyelhető meg a bokaízületben, megnövekedett tér figyelhető meg az egyik magzat bal oldalának 1.és 2. bordája és 5. -8. bordája között, szintén hasadék figyelhető meg az egyik magzat symphisis pubis ízületében , a Nem méretezett mandibularis hypoplasia, a hullámos bordákkal járó spinális folyamat hiánya is megfigyelhető, egy magzatban a 2. -8. nyaki csigolyák teljes fúzióját figyeltük meg, amely egyértelműen megkülönböztethető az 1. nyaki csigolyák többi részétől. Azt is megfigyeltük, enyhe gerincferdülés és unossified occipitalis és parietális csont és hiánya scapula a jobb oldalon az egyik magzat, hypo műanyag csigolyák is látható (5.ábra).

ábra 5 20 mg AgNps kezelt csoport magzat Alizarin folt háti nézet.