az Embryo Project Encyclopedia
a Golgi festési technikát, amelyet a folt színe után feketereakciónak is neveznek, az 1870-es és 1880-as években fejlesztették ki Olaszországban, hogy az agysejteket (neuronokat) láthatóvá tegyék a mikroszkóp alatt. Camillo Golgi kifejlesztette a technikát, miközben dolgozottidegszövet, amely Golgi-nak mikroszkóp alatt meg kellett vizsgálnia a sejtszerkezetet.Golgi továbbfejlesztette a meglévő festési módszereket, lehetővé téve a tudósok számára, hogy első alkalommal teljes neuronokat tekintsenek meg, és megváltoztassák az emberek agysejtjeinek fejlődését és összetételét. A huszonötödik században Golgi festési módszere továbbra is tájékoztatta az idegrendszer kutatását,különös tekintettel az embrionális fejlődésre.
Golgi 1870 és 1872 között kezdett kutatásokat publikálni az idegrendszerről és annak sejtszerkezetéről, miközben Giulio Bizzozero laboratóriumában dolgozott a Paviai Egyetem általános patológiai Intézetében. Ezt követően Golgi lett a Pio Luogo degli Incurabili (kórház akrónikusan betegek számára) Abbiategrasso, Olaszország. Laboratóriumot építetta Kórház konyhájában, ahol új technikát fejlesztett ki a neurális szövetek rögzítésére. Korának festési módszere magában foglalta egy szerves szövet vörös karminnal vagy feketehematoxilinnel történő festését, majd reagensnek, például kálium-dikromátnak vagy krómsavnak való kitettségét, amely megkeményítette az egyes idegsejteket. Tudósokmajd izolálta az egyes sejteket mikroszkóp alatt elválasztvatűkkel. Mivel a neuronok más alakúak, mint a többia test sejtjei, a tudósok gyakran megtörték a vetületeket a sejtből, amikor megpróbálták elválasztani őket. Ezek a vetületek hálószerű dendriteket tartalmaztak, amelyek idegi impulzusokat fogadnak, és továbbítják azokat a sejttesthez, és a hosszú axon a sejttest másik oldalán, amely továbbítja ezeket az impulzusokat.
Golgi korai kísérletei a festés javítására a sejtek különböző fémekkel történő infúzióját jelentették, hogy teljes idegsejteket és más típusú szöveteket láthassanak nagyobb részletességgel. Miután kísérletezett a sejtek arany éshigany, Golgi ezüst-nitrátot használt. Az ezüst-nitrát folt lehetővé teszi, hogy teljes egészében láthassa az idegsejteket, feketévé téve őket a halványsárga háttér ellen. A festett neuronok fekete színe vezette őt, hogy megnevezze technikáját la reazione nera (a feketereakció). A festési folyamat a cellsper minta öt-tíz százalékát festette, lehetővé téve Golgi számára, hogy az egyes sejtstruktúrákat idegszövet tömegei között láthassa.
a Golgi festési technika mechanizmusai hasonlóak voltakkortársai. Először a lágy idegszövet megkeményedése érdekében Golgi negyvenöt napig merítette a mintákat 2,5 százalékos kálium-dikromát oldatban. Következő, áztatta a mintákat a 0.5-1% ezüst-nitrát oldat különböző időtartamokraa sejtek egy részét feketére festeni. Golgi ezután alkohollal dehidratálta a mintákat, és 100 mikronos időközönként felszeletelte őket, ami egy darab papír vastagságának felel meg, elég széles ahhoz, hogy egy neuronintaktust tartson. Golgi ezután leöblítette a szövetet terpentinben, majd egy átlátszó Damar gumival ellátott csúszdához rögzítette, hogy megőrizze. Ezen a ponton mikroszkóp alatt megvizsgált egy mintát.
Golgi 1873-ban publikálta festési eljárásának eredményeit “Sulla Struttura della sostanza Grigia del Cervello”címmel(a szürke agy anyagának szerkezetéről). Németországban Franz Bollközzétette Golgi munkájának jegyzeteit német folyóiratokban, amelyek elterjedtekhírek Golgi munkájáról. Golgi továbbra is alkalmazta festési technikájátaz idegszövetek vizsgálatára, majd később összegyűjtötte az insula Fina Anatomia degli Organi Centrali del Sistema nervoso(az idegrendszer központi szerveinek finom anatómiájáról)1885-ben megjelent megállapítását. Ebben az évben Eugen Bleuler, Svájc pszichiátere Golgi festési módszerét alkalmazta, és bemutatta a nyúl agykéregének mintáit A Z. A. D. D. orvosi Társaságának.
az 1880-as években Albert von K. O., Svájc fiziológusa tanulmányozta az agy fejlődését, a neuro-szenzoros utakat és a belső szervek fejlődését emlősökben a Golgi stainingtechnique segítségével. A technikát Golgi 1887-es tanítása alapján tanulta meg, és később abban az évben kiadta az “Ueber Golgi’ s Untersuchungen, den FeinerenBau des Centralen Nervensystems Betreffend” (Golgi tanulmányairól a központi idegrendszer finomabb szerkezetéről) című művét. K ons dicsérte Golgi festési technikáját,ami több tudóst vezetett be.
1887-ben a spanyolországi Santiago Ram Enterprises megváltoztatta a technikát azáltal, hogy ezüst-nitrátot vezetett be a szövetbe két rövidebb áztatással,nem pedig egy hosszú áztatással. Ez a változás javította a színt ésa folt részlete. Az olyan kutatók, mint Golgi és Ram Cajal, az ilyen festési vizsgálatok eredményeit használták fel a neurondoktrin kifejlesztéséhez, amely megállapította, hogy a neuronok egyedi sejtek, amelyek elektromos impulzusokat továbbítanak egymásnak és egymástól. Ez az elmélet átalakította az idegrendszer szerkezetének és működésének elméleteit. A tudósok megerősítettékaz elméletet a Golgi festési technika alkalmazásával mutatják be a neuronok közötti réseket vagy szinapszisokat. Golgi és Ram Cajal 1906-ban osztotta meg az Obel-díjat fiziológiából vagy orvostudományból.
1917-ben P. O. del R. Hortega tovább alkalmazta a Golgi-módszert azáltal, hogy a szöveteket formalinnal, klórhidráttal és kálium-kromáttal rögzítette, ami csökkentette a festés befejezéséhez szükséges időt. A huszonegyedik században a kutatók a delr evonno Hortega módszerét alkalmazták a nem neuronális agysejtek, például a neuroglia és a kisagy sejtjeinek festésére. A két világháború közötti Népszerűség alábbhagyása után a Golgi festési technika az 1930-as évek végén az elektronmikroszkóp bevezetésével visszanyerte népszerűségét.
a tudósok Golgi festési technikáját használták, hogy jobban megmagyarázzák a neuronok, az agy és az érzékszervi utak kialakulását. A Golgistaining segített a tudósoknak a sejteken belüli organellák osztályozásában,beleértve az izomsejt organellákat,amelyek tárolják és szállítják a kalciumot, az úgynevezett szarkoplazmatikus retikulumot, és a fehérje-módosító organellákat a sejtekben, az úgynevezett Golgi-apparátust. A Golgi festési technika továbbra is a festés elsődleges módszerea huszonegyedik századig.
Források
- Barker, LewellysFranklin. Az idegrendszer és alkotó neuronjai:Úgy tervezték, hogy az orvosok és aaz orvostudomány és a pszichológia hallgatói. New York: D. Appleton éscég, 1901.https://archive.org/details/nervoussystemits00barkuoft(Hozzáférésdecember 20, 2015).
- Bentivoglio, Marina. “Camillo Golgi élete és felfedezései.”Nobelprize.orghttp://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1906/golgi-article.html (hozzáférés December 20, 2015).
- Bleuler, Eugen. “A Ganglienzellendes Gehirns die Methode von Golgi.” . Approprientenz-Blatt F GmbH 16: 155. https://babel.hathitrust.org/cgi/pt?id=osu.32436001035177;view=1up;seq=171(Hozzáférés Február 28, 2017).
- Boll, Franz C. “C. Golgi, Sulla strutturea della sostanza grigia del cervello. Megelőző kommunikáció.” .Centralblatt F die Medicinischen Wissenschaften . 11 (1873):806–07. https://archive.org/stream/centralblattfrd17unkngoog#page/n810/mode/2up(Hozzáférés Február 28, 2017).
- Del R Oncho-Hortega, P. “Technikai megjegyzések.Hírek egy új és egyszerű módszer a laneuroglia és a kötőszövet színezésére.” .A biológiai kutatólaboratórium munkája . 15 (1917):367–78.
- Golgi, Camillo. “Sulla Struttura della sostanza Grigiadel Cervello.” . Gazzetta Medica Italiana-Lombardia 33 (1873): 244-6.https://books.google.com/books?id=cydbAAAAcAAJ(Hozzáférés December20, 2015).
- Golgi, Camillo. “Az agy szürke anyagának szerkezetéről.”A Golgi Centennial Symposium: Perspectives Ineurobiology, Szerk. és Ford. Santini Úr, 647-50. New York:Holló, 1975.
- Golgi, Camillo. Sulla Fina Anatomia degli OrganiCentrali del sistema Nervoso. . Reggio Emilia: Tipografiadi Stefano Calderini e Figlio, 1885.https://archive.org/details/b21978724(Elérhető December 20, 2015).
- szerző: K. “Golgi vizsgálatairól a központi idegrendszer finomabb felépítéséről.” . Session jelentések a fizikai-Orvosi Társaság W Alternitrsburg. (1887)1–7.
- “a fiziológiai vagy orvostudományi Nobel-Díj 1906”.Nobelprize.org. Nobel Media AB 2014.http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1906/(Hozzáférés December 30, 2015).
- Pannese, Ennio. “A Feketereakció.”Brain Research Bulletin 41 (1996): 343-9.
- Pennese,Ennio. “Camillo Golgi hozzájárulása a Megértésünkhezaz idegrendszer szerkezetéről.”Archives Italiennes deBiologie (2007): 111-15.http://www.architalbiol.org/aib/article/view/145111/782(Elérhető December 20, 2015).
- Ram Enterprises, Santiago. Manuális dehistologus (dehistologus), normál y t, Mikrográf (Micrograph), stb. (Normálhisztológia és mikrográfiai technika kézikönyve). Valencia : Libreria dePascual Aguilar, 1889. https://archive.org/details/b20392941(Hozzáférés Március 5, 2017).
- Rao, B. S. Shankaranarayana és TrichurR. Raju. “A Golgi technika a neuronok festésére.”In Brainand viselkedés, Szerk. Trichur R. Raju, Bindu M. Kutty, Talakad N. Sathyaprabha és B. S. Shankaranarayana Rao, 108-11. Bangalore: Nemzeti Mentális Egészségügyi és Idegtudományi Intézet, 2004.
- Stirling, William. “Rudolph Albert von K. D., M. D., anatómia professzor a W. A.-i Egyetemen.”Az Éves Jelentés az Igazgatóság Regents a Smithsonian Intézet mutatja theOperations, kiadások és feltétele az intézmény foreign év véget június 30, 1905, 557-62. Washington: Kormánynyomtatási Hivatal, 1905.https://archive.org/details/annualreportofbo1905smitfo(Elérhető December 20, 2015).
- Verkhratsky, Alekszej, Vlagyimir Parpura és Joz. “Ahol a gondolatok laknak: a neuronális–glia “diffúz Idegháló” fiziológiája.”Agykutatási Vélemények66 (2011): 133-51.