citokeratin 5/6 és citokeratin 8/18 expresszió hármas negatív emlőrákban: klinikopatológiai szignifikancia dél-ázsiai populációban

módszerek

összesen 150 TNBC esetet választottak ki a patológiai osztály archívumából. A műtéti minták módosított radikális mastectomiákat, egyszerű mastectomiákat és széles helyi kivágásokat tartalmaztak őrszem nyirokcsomó boncolással. Minden beteg műtéten esett át Liaquat Nemzeti Kórház, Karacsi 2008 januárjától 2013 decemberéig 6 év alatt. A vizsgálatot az intézmény kutatási és etikai felülvizsgálati Bizottsága hagyta jóvá, és a műtét idején minden betegtől tájékozott beleegyezést vettek. Hematoxilin és eozin festett tárgylemezeket és paraffin blokkokat gyűjtöttek, és szükség esetén új részeket vágtak le. Az összes eset diáját két vezető hisztopatológus vizsgálta felül, és olyan patológiai jellemzőket, mint a szövettani típus, tumor fokozat, T-stádium, N-stádium, limfovaszkuláris invázió, nekrózis, fibrózis, lymphocytás infiltráció (tumor infiltráló limfociták), az insitu komponens jelenléte, pagetoid terjedés és dermális nyirokinvázió értékelték. Az összes beteg klinikai feljegyzéseit az intézményi nyilvántartásokból is áttekintették a beteg életkorának, a sugár-és kemoterápiás kórtörténetnek, valamint a kiújulási állapotnak a értékelése céljából. Ezenkívül mindegyik eset reprezentatív blokkjait Kiválasztottuk, és ER, PR és Her2neu immunhisztokémiát végeztünk a hármas negatív állapot újbóli megerősítésére.

az ER, a PR, a Her2neu és a Ki67 IHC-t DAKO antitestekkel végeztük, az Envision GmbH flex, a gyártó protokollja szerinti magas pH DAKO kit alkalmazásával.

1. FLEX monoklonális nyúl anti-humán ösztrogén receptor alfa, klón EP1.

2. FLEX monoklonális egér anti-humán progeszteron receptor klón PgR 636.

3. poliklonális nyúl anti-humán C-erbB-2 onkoprotein.

4. FLEX monoklonális egér anti-humán ki67 antigén klón MIB-1.

az ER és PR Magfestése a rákos sejtek > 1% – ában pozitívnak tekinthető. A her2neu esetében az eseteket 1+, 2+ és 3+ ponttal értékelték a KAP iránymutatásai szerint. Kétértelmű esetekben (2+) a halakat Path Vysion Her2neu szondakészlettel végeztük a gyártó protokolljai szerint. Az eredményeket a her2neu jelek arányában fejeztük ki a CEP17 jelekhez képest az ASCO/CAP irányelvek szerint.

a ki67 immunfestést folyamatos változóként regisztrálták a pozitív festett rákos sejtek aránya alapján. Továbbá a Ki67 index alapján az eseteket < 15, 16-24, 25-44 és > 44% ki67 index kategóriákba sorolták.

a CK5/6 IHC-t FLEX monoklonális egér anti-humán citokeratin 5/6, D5/16 B4 klón alkalmazásával végeztük DAKO envision módszerrel a gyártói protokoll szerint. A sejtek több mint 10% – ában a közepes vagy erős citoplazmatikus és membrános festés pozitívnak tekinthető. A gyenge vagy közbenső festést < 10% – ban fokális pozitívnak tekintették, míg a festést nem tekintették negatívnak (1.kiegészítő fájl: S1 ábra).

a CK 8/8 IHC-t monoklonális egér anti-humán citokeratin 5/6, D5/16 B4 klón alkalmazásával végeztük, a DAKO envision módszer szerint. A sejtek több mint 50% – ában a közepes vagy erős citoplazmatikus és membrános festés pozitívnak tekinthető. A gyenge vagy közbenső festést (citoplazmatikus, a membrán reaktivitásának elvesztésével) 10-50% – ban fokális pozitívnak tekintették, míg a < 10% – ban nem volt festés vagy gyenge festés negatívnak (1.kiegészítő fájl: S1 ábra).

a kiújulás állapotát és a nyomon követést a kórházi orvosi feljegyzések áttekintésével értékelték. A teljes túlélést a műtéti kivágástól a halálig vagy az utolsó nyomon követésig eltelt időnek tekintették, a betegségmentes túlélést pedig a műtéti kivágás és a helyi kiújulás vagy távoli metasztázis, a halál vagy az utolsó utánkövetés közötti időként határozták meg.

a társadalomtudományi statisztikai csomagot (SPSS 21) használták az adatok összeállításához és elemzéséhez. A kvantitatív változók esetében az átlagot és a szórást számítottuk ki. A gyakoriságot és a százalékot kvalitatív változókra számítottuk. A chi négyzetet alkalmazták az egyesület meghatározására. Student T teszt vagy Mann whitney tesztet alkalmaztak a csoportok közötti átlagkülönbség összehasonlítására. P érték 0,05 mint jelentős. A túlélési görbéket Kaplan-Meier módszerrel ábrázoltuk, és a túlélési görbék közötti különbség jelentőségét log-rang arány alkalmazásával határoztuk meg. P-érték 0.05 jelentősnek tekinthető.

eredmények

a vizsgálatban részt vevő betegek átlagos életkora 48,9 év volt, a leggyakoribb korcsoport pedig 31-50 év volt. A betegek többsége a T2 stádiumban magas átlagos ki67 indexgel, azaz 46,9% – kal jelentkezett. Az esetek 42,7% – ában nodális metasztázis volt. Bár az esetek 84% – a hagyományos invazív ductalis carcinoma volt, NST; az esetek jelentős része azonban metaplasztikus szövettan volt (9,3%). Az esetek többsége magas fokú volt (86,7% III. A legtöbb daganat lymphocytás infiltrációt és nekrózist mutat. A legtöbb daganat hiányzik insitu komponens (61%). Az esetek 17,8% – ában lokális kiújulást vagy késői távoli metasztázist figyeltek meg (1.táblázat).

pozitív (> 10%) CK5/6 expressziót figyeltek meg a TNBC 8% – ában (12 eset), míg 2,4% (4 eset) fokális pozitív (< 10%) és 89,3% (134) negatív volt a CK5/6 esetén. A CK8/18 expresszió teljes elvesztése 4,7% – ban (7 esetben), míg 32,7% – ban (49 esetben) a ck8/18 fokális elvesztése, és 62,7% – ban (94 esetben) a ck8/18 ép normál expressziója mutatkozott. Nem figyeltek meg szignifikáns összefüggést a CK5/6 és a CK8/18 különböző klinikai patológiai paraméterekkel (2.és 3. táblázat). Hasonlóképpen nem volt szignifikáns összefüggés a CK 5/6 és CK8/18 között a betegek kiújulási státusával (2.Kiegészítő fájl: S2 ábra).

Vita

ebben a tanulmányban egy bazális (CK5/6) és egy luminális marker (CK8/18) expresszióját vizsgáltuk a TNBC-ben a populációnkban, és azt találtuk, hogy a TNBC 8 és 2,7% – a mutatott pozitív és fokális pozitív expressziót a CK5/6, illetve 4,7 és 32.A TNBC 7% – a a CK 8/18 expresszió teljes, illetve fokális elvesztését mutatta ki. Azokban az esetekben, amikor ck8/18 fokális veszteséget észleltek, a membrán reaktivitása Elveszett, míg a citoplazmatikus festés kevés sejtben megmaradt. Azonban nem figyeltek meg szignifikáns összefüggést a citokeratinok ezen abnormális expressziós mintái és a TNBC különböző klinikai patológiai és prognosztikai paraméterei között a mi populációnkban. Az emlőrák az egyik leggyakoribb rosszindulatú daganat a dél-ázsiai populációban, különösen fiatal korban .

a génexpressziós profilozás meghatározza a bazális emlőrákot, mint azokat, amelyek olyan gének bazális klasztereit mutatják, mint az EGFR, a bazális citokeratin 5/6, a C–kit, a proliferációs klaszter és a Her2neu és a hormonreceptorokhoz kapcsolódó gének alacsony expressziója . A bazális emlőrák azonban nem egyetlen entitás, és számos altípust tartalmaz, köztük két bazális szerű altípust (BL1 és BL2), mesenchymális, mesenchymális szárszerű, immunmoduláló és luminalis androgén altípust . Ezen kívül interferonban gazdag és claudin-alacsony altípusokat is meghatároztak . Az ASCO/CAP nem javasolja a bazális emlőrák altípusát. A CK 5/6 expresszió a TNBC-ben 24-72% között változik, amint azt a korábbi vizsgálatok jelentették . Más kutatók a CK 5/6 prognosztikai jelentőségét is javasolták csomópont negatív emlőrákban . Nielson et al. azt javasolta, hogy a ck5/6 pozitív emlőrák prognózisa rosszabb legyen, függetlenül a tumor fokozatától, a T-stádiumtól és a hormonális/Her2neu státusztól . Hasonlóképpen egy másik tanulmányban azt javasolták, hogy a CK5 / 6 a rövidebb betegségmentes túlélés markere, függetlenül az emlőrák egyéb prognosztikai tényezőitől . Inanc et al. jelentett 50.A CK5/6 5% – os expressziója a ck5/6 TNBC pozitív korrelációjával a nodális metasztázissal és a tumor méretével . Ezekkel a tanulmányokkal ellentétben azonban a ck5/6 expresszió alacsony expresszióját találtuk a TNBC-ben vizsgált populációnkban, ami a TNBC eltérő genomiális profilját jelentheti populációnkban, amelyet további vizsgálatok során meg kell vizsgálni. A CK5/6 prognosztikai szerepét javasolták a test más rákjaiban .

a CK8/18 egy luminalis citokeratin, amely főként az emlő epitheliumában expresszálódik hártyás és citoplazmatikus mintázatban. Cimpean et al. meghatározta a ck8/18 különböző mintáit emlőrákban; diffúz citoplazmatikus, membrános és kombinált citoplazmatikus és membrános .Egyes kutatók azt javasolták, hogy a ck8/18 expresszió elvesztése/az alacsony CK8/18 a rosszabb prognózissal és a metasztázis magas kockázatával jár . Azonban nem találtunk prognosztikai jelentősége elvesztése ck8/18 expresszió különböző prognosztikai faktorok és kiújulás TNBC.

megállapítottuk, hogy a TNBC 32,7% – a mutat fokális expressziós veszteséget CK8/18. Mindezekben az esetekben a ck8/18 membrán reaktivitása Elveszett, míg a citoplazmatikus festés kevés sejtben megmaradt. Aiad et al. egy 70 emlőrákos esetet érintő tanulmányban a Ck8/18 (citoplazmatikus) abnormális expresszióját találták az egyiptomi emlőrák 70% – ában, ami sok heterogenitásra utal az emlőrák citokeratin expressziójában a világ különböző részein .