A Cnidium officinale Makino és a Ligusticum chuanxiong Hort szabad gyökös takarító tevékenysége. metanolos kivonatok | Jiotower
eredmények és megbeszélések
számos kóros esemény, például a gyulladásos folyamat, a koszorúér-betegség és az öregedési jelenségek kapcsolódnak a ROS generációjához. Így ebben a tanulmányban bebizonyítottuk, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong kivonatok antioxidáns tulajdonságokkal is rendelkeznek, mivel képesek voltak megvédeni a sejteket az oxidatív károsodástól, és gátolják a ROS képződését.
a TEAC-vizsgálat esetében az 1.táblázat a C. officinale és L. chuanxiong antiradikális kapacitását mutatja vizes rendszerben, az ABTS-gyökök vizsgálatával mérve. Az ABTS-vizsgálatot a növényi anyagok teljes antioxidáns aktivitásának mérésére használták. A Rice-Evans és Miller által használt TEAC tükrözi a hidrogén vagy elektron-adományozó antioxidánsok relatív képességét az ABTS radikális kation megsemmisítésére a Troloxéhoz képest. Ebben a tanulmányban C. officinale és L. a chuanxiong 0-150 Ft/ml tartományban antiradikális aktivitást mutatott, és ezeknek a mintáknak az antiradikális aktivitása a kivonatok koncentrációjának növekedésével nőtt, ami azt jelzi, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong a szabad gyökök scavenging aktivitását mutatta. Amint az az 1. táblázatban látható, a C. officinale és L. chuanxiong Abts radikális kationra gyakorolt koptató képességét összehasonlítottuk az aszkorbinsavéval. Továbbá, a C. officinale markáns tisztító hatást mutatott az ABTS kationgyökökre a standardhoz képest, aszkorbinsav, TEAC-on keresztül határozták meg.
Table 1
Antioxidant activities of methanol extracts of C. officinale and L. chuanxiong
TEAC (mM TE/g) | ORAC (mM TE/g) | DPPH (mM TE/g) | |
---|---|---|---|
CO | 2.022 ± 0.538 | 0.484 ± 0.162 | 2.942 ± 0.495 |
LC | 1.249 ± 0.224 | 0.260 ± 0.015 | 4.658 ± 1.183 |
AAa | 0.828 ± 0.010 | 0.030 ± 0.018 | 1.332 ± 0.027 |
az értékek azt jelenti, hogy három mérésből álló 6 SD. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: aszkorbinsav, TEAC: trolox ekvivalens antioxidáns kapacitás, ORAC: Oxigéngyök abszorbancia kapacitás, DPPH: 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil
az 1. táblázat a minták ORAC-ját is mutatja. Az erősen fluoreszcens fehérjét, a béta-phycoerythrint (PE), amely számos vörös algafajból származik, a szabad gyökök károsodásának célpontjaként használták. Az AAPH termikus bomlása során keletkező peroxilgyökök csillapítják a phycoerythrin fluoreszcenciáját, míg a peroxilgyökökkel gyorsan reagáló antioxidáns hozzáadása gátolja a fluoreszcencia intenzitásának elvesztését, és ez a gátlás arányos az antioxidáns aktivitással. A végeredményeket a vakpróba és a minta között a phycoerythrin bomlási görbék alatti területek közötti különbségek alapján lehet kiszámítani, és Trolox-ekvivalensben kell kifejezni. Ebben a tanulmányban az eredmények azt mutatták, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong hasonló profilú antioxidáns kapacitást mutatnak. Ezenkívül az ORAC vizsgálat a C. officinale kivonat antioxidáns tartalmának egyértelmű növekedését mutatta az aszkorbinsavhoz képest.
a stabil DPPH radikális modell széles körben alkalmazott, viszonylag gyors módszer a szabad gyökök eltávolításának értékelésére. Úgy gondolják, hogy a növényi antioxidánsok hatása a DPPH radikális megsemmisítésére hidrogénadományozó képességüknek köszönhető. Az antioxidánsok által okozott DPPH-gyök abszorbanciájának csökkenése az antioxidáns molekulák és a gyökök közötti reakció következtében előrehalad, ami a gyök hidrogénadományozással történő eltávolítását eredményezi. Az 1. táblázat a DPPH gyökök koncentrációjának jelentős csökkenését szemlélteti mind a C. officinale, mind az L. chuanxiong kivonatok és a standard tisztító képessége miatt. A szabad gyökök takarítási aktivitása szintén növekedett a koncentráció növekedésével. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy mindkét kivonat észrevehető hatással van a szabad gyökök eltávolítására. Az L metanol kivonata. chuanxiong erősebb DPPH tisztító aktivitást mutatott, mint a C. officinale metanol kivonat a standardhoz képest. Aszkorbinsavat használtunk standardként.
ezenkívül célzott lehet a specifikus gyökök megsemmisítésének képessége. Mivel a különböző ROS-k különböző reakciómechanizmusokkal rendelkeznek, az antioxidáns aktivitás teljes meghatározásához a Ros széles skálájával szemben átfogóbb vizsgálatokat kell végezni. A szuperoxid anion (O2·–) gyök fontos tényező a biológiai rendszerekben. Annak meghatározására, hogy az NBT-redukció gátlása a szuperoxid-scavenger aktivitásnak köszönhető-e, nem enzimatikus szuperoxid-generációs rendszert használtunk. A PMS-NADH-NBT rendszerben a PMS-NADH kapcsolási reakciójából oldott oxigénből származó szuperoxid anion csökkenti az NBT-t. Az abszorbancia csökkenése 560 nm-nél antioxidánsokkal jelzi a szuperoxid anion fogyasztását a reakcióelegyben. A 2. táblázat a szuperoxid-gyök képződésének százalékos gátlását mutatja A C. officinale és L. chuanxiong metanol kivonatok 0-150/ml-rel az aszkorbinsavhoz képest. C. az officinale és az L. chuanxiong metanol kivonatok a szuperoxid gyökök dózisfüggő gátlását mutatták. Mind a C. officinale, mind az L. chuanxiong kivonatok erős szuperoxid-gyökös takarító hatással rendelkeznek (IC50 = 96,30 és 93,85 6G/ml). Figyelembe véve a kapott eredményeket, várható, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong metanol kivonatai antioxidáns aktivitással rendelkeznek, amit itt a szuperoxid gyök eltávolítása mutat. Mindezen kivonatok IC50-értékei nagyobbak voltak, mint az aszkorbinsavé, amelyben az IC50-et 8,76 6G koncentrációban érték el.
táblázat 2
a C. officinale és a L. chuanxiong metanol-kivonatainak szabadgyök-takarító és fémkelátképző tevékenysége (IC50 ~ g/ml)
O2 * | H2O2 | OH * | nem * | fém kelátképződés | |
---|---|---|---|---|---|
CO | 96.259 ± 8.024 | 136.280 ± 2.307 | 119.442 ± 7.444 | 57.252 ± 8.973 | 138.425 ± 13.292 |
LC | 93.848 ± 9.529 | 136.318 ± 2.626 | 113.107 ± 8.890 | 76.502 ± 3.033a* | 17.451 ± 5.858a* |
AAb | 8.762 ± 4.569 | 8.053 ± 3.677 | 3.034 ± 0.191 | 9.885 ± 0.478 | 43.235 ± 8.543 |
Values are means ± SD of three measurements. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: Ascorbic acid, O2·–: superoxide radical, H2O2: hydrogen peroxide, OH·: hydroxyl radical, NO·: nitric oxide radical
Scavenging H2O2 mind a kivonatok lehet tulajdonítani a fenolos, amely adományoz elektronok H2O2, így semlegesíti azt a víz. A H2O2 a két kivonat közötti takarító kapacitások elektronadományozó képességeiknek tulajdoníthatók. Mindkét kivonat azon képességét, hogy hatékonyan megsemmisítse a H2O2-t, a 2.táblázat mutatja, amelyben összehasonlítják az aszkorbinsavéval. A kivonatok képesek voltak a H2O2 koncentrációfüggő módon történő eltávolítására. C. officinale és L. a chuanxiong kivonatok (0-150 ~ g/ml) IC50 értéke 136,28, illetve 136,32 ~ g/ml volt, míg az aszkorbinsav 8,05 ~ g/ml volt. A C. officinale és az L. chuanxiong értékek közötti összefüggés statisztikailag nem szignifikáns. Bár maga a H2O2 nem túl reaktív, néha citotoxicitást okozhat azáltal, hogy hidroxilcsoportokat eredményez a sejtben. Így a H2O2 eltávolítása nagyon fontos az élelmiszer-rendszerekben.
a C. officinale és L. a chuanxiong metanol kivonatokat a dezoxiribóz degradációs vizsgálattal is értékelték a hidroxilgyökök megsemmisítésére való képességük szempontjából. Ebben a vizsgálatban az eredmények azt mutatták, hogy az összes minta képes volt gátolni a dezoxiribóz lebomlását (0-150 KB/ml), hasonló profillal. A biokémiai vizsgálatok azt mutatták, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong a dezoxiribóz lebomlásának koncentrációfüggő gátlását okozta. Az IC50 érték szintjén a C. officinale (119,44 KB/ml) és az L. chuanxiong (113,11%/ml) azonos potenciált mutatott . Az egyes extraktumok összes OH radikális tisztító képességét összehasonlítottuk az aszkorbinsavéval.
a növényi kivonatokat megmérték és összehasonlították a nitrogén-monoxid-gyökökkel szembeni szabad gyököket. A C. officinale és az L. chuanxiong metanol kivonatok no· scavenging aktivitását SNP-vel, NO· donorként vizsgáltuk. Az SNP-ből felszabaduló NO oxigénnel reagálva nitrit keletkezik. Egyetlen hulladékgyűjtő sem versenyez az oxigénnel abban, hogy reagáljon az SNP-oldatból PBS-ben felszabaduló NO· – val. Ebben a tanulmányban a C. officinale és az L. chuanxiong nem mutatott * scavenging kapacitást, bár néhány különbséget észleltek. Nem * a C. officinale takarító tevékenysége szignifikánsabb volt, mint L. chuanxiong. Ez a gátlás az NO· kivonatok általi közvetlen eltávolításának eredménye is lehet. C. officinale volt a legnagyobb aktivitás, hogy oltsa nem radikális. Az IC50 értékek a C. officinale és az L. chuanxiong esetében sorrendben 57,25, illetve 76,50 ~ g/ml voltak.
a vasionok C. officinale és L. chuanxiong kivonatok általi kelátképzését becsülték meg, amelyben a ferrozin mennyiségileg komplexeket képez Fe2+ – val. Kelátképző szerek jelenlétében ennek a komplexnek a képződése megszakad, ezáltal gátolva a komplex által közvetített vörös szín kialakulását is. Ennek a színváltozásnak a mérése tehát lehetővé teszi az egyidejűleg létező kelátképző aktivitásának becslését. Ebben a vizsgálatban mind a kivonatok, mind a standard antioxidáns vegyület megzavarta a vas–ferrozin komplex képződését, ami arra utal, hogy kelátképző aktivitással rendelkeznek, megragadva a vasionot, mielőtt komplexet képezhet ferrozinnal. Amint azt a 2. táblázat mutatja, a Fe2+–ferrozin komplex képződése nem teljes a C. officinale és az L. chuanxiong metanol kivonatok jelenlétében, ami azt jelzi, hogy mindkét kivonat kelátot képez a vasban. A Fe2+ -ferrozin komplex abszorbanciája lineárisan, dózisfüggő módon csökkent (0-150 6G/ml). A különbség a C. officinale és a L. chuanxiong kivonatai és a kontroll között statisztikailag szignifikáns volt. A C. officinale és L. chuanxiong metanolkivonatainak, valamint az aszkorbinsavnak a fém kelátképző képessége (mindegyik IC50 KB/ml-nél) 138,43, 17,45 és 43 volt.24, ami jelentős különbségnek bizonyult a kivonatok és a kontrollok között.
a C. officinale és az L. chuanxiong sejt életképességre gyakorolt hatásának meghatározásához az N2a sejteket C. officinale és L. chuanxiong-nak (50-500 ~ g/ml) tették ki 1 órás inkubációs idő alatt. az 1.ábrán a C. officinale-lel végzett 1 órás inkubálás utáni MTT-teszt nem mutat szignifikáns életképességi különbséget a kezelt N2a sejtkultúrákban a kontrollhoz képest. MTT-teszttel 1 óra után L. chuanxiong-tal, az életképesség jelentős növekedését figyelték meg L-ben. chuanxiong 500g/ml kezelt N2a sejtek a kontrollhoz képest. Amint az a 2. ábrán látható, nem végeztek meghatározást 1 óra inkubálás után C. officinale és L. chuanxiong jelenlétében (50-500 Ft/ml). Az L. chuanxiong-kezelés nem csökkentette szignifikánsan a No felszabadulását a kontrollhoz képest, de az 500 Ft/ml C. officinale jelentősen csökkentette a NO felszabadulását. Ebből az eredményből arra lehet következtetni, hogy a C. officinale és a L. chuanxiong metanolos kivonatainak az alkalmazott dózisokban nincs toxicitási hatása.
a C. officinale és az L. chuanxiong metanolos kivonatok hatása a sejtek életképességére az N2a sejtekben. Az értékek azt jelenti, hogy három mérésből álló 6 SD. * P < 0, 05 A kezeletlen normálhoz képest (ANOVA/Tukey)
C. officinale és L. chuanxiong metanolos kivonatok nitrogén-monoxid felszabadulásáról N2a sejtekben. Az értékek azt jelenti, hogy három mérésből álló 6 SD. * P < 0, 05 A kezeletlen normálhoz képest. (ANOVA / Tukey)