837. Consegna colon-diretta di vettori virali utilizzando coniugati virus-Microbead per la terapia genica della malattia infiammatoria intestinale
Nel corso degli ultimi anni, abbiamo sviluppato una nuova tecnologia di trasferimento genico che consente la consegna sicura ed efficiente di vettori virali ricombinanti per indirizzare i siti per le applicazioni di terapia genica. In questa tecnologia, le particelle virali sono fissate stabilmente alle superfici delle microsfere e quindi consegnate ai siti bersaglio sotto forma di coniugati virus-microsfere. Tali coniugati possono infettare le cellule con efficienze equivalenti o addirittura superiori ai vettori virali liberi. In particolare, la trasduzione delle cellule bersaglio, che sono scarsamente permissive all’infezione da vettori virali liberi, può essere notevolmente migliorata, fornendo ai vettori virali attaccati un tropismo più ampio. Questa tecnologia di trasferimento genico è attualmente utilizzata per sviluppare una strategia di trasferimento genico per la malattia infiammatoria intestinale (IBD). Utilizzando un vettore adenovirale che trasportano il gene per un potente fattore anti – infiammatorio interleuchina-10 (IL-10), viene da chiedersi se il vettore adenovirale può essere consegnato per le lesioni infiammate nel colon su intra-colonical amministrazione di virus-microbead coniugati da clistere e se questo potrebbe aumentare locali livelli di IL-10 nel colon per il miglioramento della colite. Abbiamo dimostrato utilizzando modelli di colite murina che la somministrazione intra-colonica di vettori adenovirali che trasportano il gene IL-10 del topo sotto forma di coniugati virus-microbead ha fornito un miglioramento migliorato della colite rispetto agli stessi vettori adenovirali che sono stati somministrati in forma libera. Questa maggiore efficacia per il miglioramento della colite deriva, principalmente, da una maggiore trasduzione del tessuto del colon e dalla successiva produzione ad alto livello di IL – 10 localmente nel colon infiammato. Abbiamo anche avviato uno studio per testare se i vettori virali adeno-associati (AAV) potrebbero essere utilizzati sotto forma di coniugati virus-microbead per la loro consegna mirata alle lesioni infiammate nel colon. Esperimenti con AAV che trasportano un gene marcatore suggeriscono che l’uso di coniugati virus-microbead può migliorare la trasduzione del tessuto del colon da parte di AAV in un modello di colite murina. Ora stiamo chiedendo se la somministrazione intra-colonica di AAV che trasporta il gene IL-10 del topo sotto forma di coniugati virus-microbead potrebbe aumentare i livelli locali di IL-10 per il miglioramento della colite mediante trasduzione efficiente del colon infiammato. Questi risultati suggeriscono il potenziale per questa tecnologia di trasferimento genico per servire come strategia di terapia genica efficace per IBD. Un chiaro vantaggio di questa tecnologia rispetto ad altre strategie di trasferimento genico mediate da virus per la terapia della IBD, comprese quelle che comportano la consegna sistemica di vettori virali, è che la consegna di vettori virali e la successiva produzione di IL-10 (o altre proteine terapeutiche) è focalizzata sulle lesioni infiammate. Inoltre, poiché tutte le particelle virali sono ancorate stabilmente alle microsfere, la consegna incontrollata di vettori virali e la successiva trasduzione di altri organi dovrebbero essere ridotte al minimo. Queste caratteristiche dovrebbero non solo massimizzare l’efficacia terapeutica, ma anche migliorare la sicurezza dell’uso di vettori virali.
