Sperimentali e Terapeutici della Medicina

Introduzione

lupus eritematoso Sistemico (LES) e rheumatoidarthritis (RA) sono malattie autoimmuni sistemiche che possono attaccare thebody cellule e tessuti, con conseguente infiammazione e tissuedamage. I processi e i meccanismi di sviluppo di SLE e RA sononon ben stabiliti. A causa della somiglianza dei sintomi (1,2), ildifferenziale diagnosi e trattamento di queste due malattie èallenante. Clinicamente, i test di laboratorio possono essere eseguiti utilizzandovari marcatori sierici (3,4).

Sono state osservate alcune differenze nella patogenesi, nei sintomi clinici e nei cambiamenti autoanticorpi tra LES e RA (5). Questi indicano chei marcatori di siero sono in grado di riflettere le differenze tra i duemalattie in una vasta gamma di aspetti. Nell’attuale studio, al fine di illustrare il ruolo dei marcatori sierici nella diagnosi differenziale e nella valutazione dell’attività della malattia di LES e RA, e per elaborare i diversi meccanismi patogeni, abbiamo studiato i colori dei complementi C3 e C4 e CRP, che sono strettamente associati alla risposta infiammatoria.

Materiali e metodi

Popolazione di pazienti

Un totale di 347 pazienti con LES e 382 pazienti con AR sono stati selezionati casualmente tra gli individui trattati nel secondo ospedale affiliato della Harbin Medical University (Harbin, Cina)tra il 2009 e il 2012. Tutti i pazienti hanno fornito il consenso informato econformato con l’American College of Rheumatology 1990 criteriper la classificazione del lupus eritematoso sistemico (6,7). Lo studio è stato approvato dal Consiglio di ricerca istituzionale dell’Università medica di Harbin. L’acquisizione dei dati clinici e la valutazione dell’attività di diagnosi e malattia sono state eseguite dallo stesso medico. Il gruppo di controllo comprendeva 66 pazienti eritema nodosumpazienti.

Valutazione dell’attività e del corso della malattia

Le valutazioni dell’attività della malattia del LES sono state eseguite con il sistema di valutazione del Lupus eritematoso sistemico ActivityIndex (SLEDAI). Secondo i criteri di Gladmanet al (8), le valutazioni eranocome segue: 0-9 per una leggera attività dei pazienti con LES, 10-14 per un’attività moderata dei pazienti con LES e ≥15 per un’attività grave dei pazienti con LES. Sono state eseguite le valutazioni dell’attività della malattia RA con il sistema di classificazione DAS28 (9),che ha le seguenti valutazioni: <3,2 per attività lieve,3,2–5.1 per attività moderata e >5.1 per attività grave. Sulla base della progressione della malattia, la febbre e l’affaticamento sono stati determinaticome sintomi precoci, il dolore articolare e l’eruzione della farfalla sono stati determinati come sintomi di metafase e le ulcere orali sono state determinate come sintomo tardivo.

Campioni di siero

I campioni di siero sono stati prelevati dai pazienti.C3, C4 e CRP sono stati misurati mediante nefelometria potenziata con lattice utilizzando saggi ad alta sensibilità sull’analizzatore Behring (BN100nephelometer; Dade Behring, Marburg, Germania). La concentrazione diCRP era normalmente inferiore a 5 mg / l. Gli intervalli normali dei complementi C3 e C4 erano rispettivamente 0,9–1,8 g/l e 0,1-0,4 g/l.

Analisi statistica

Utilizzo di SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA), le differenze nei livelli dei complementi C3 e C4 e CRP tra i gruppi sono state confrontate con il t-test di uno studente. La correlazione dell’attività della malattia con C3, C4 e CRP è stata analizzata mediante analisi di correlazione lineare. I dati sono presentati come media ± SD.P< 0,05 è stato considerato indicante un risultato statisticamente significativorisultato.

Risultati

Variazioni di C3, C4 e CRP nel LES e nei rapaci

Dai dati clinici e dai titoli dei marcatori sierici,abbiamo osservato che i livelli di complementi C3 e C4 nei pazienti con LES erano inferiori a quelli di individui normali e pazienti con RA (P < 0,05; Fig. 1 BIS). TheCRP livello nei pazienti con RA era superiore a quelli del gruppo di controllo e pazienti LES (P<0,05; Fig. 1 TER).

Diagnosi differenziale di SLE e AR Conc3, C4 e CRP

Sono stati raccolti i dati clinici dei pazienti di controllo, SLE e AR, inclusi sesso, età, durata della malattia, valutazione das28, valutazione SLEDAI, complemento C3, complemento C4 e CRP(Tabella I). Sono stati effettuati confronti tra pazienti LES e AR con sintomi simili. I risultati hanno mostrato che nei pazienti con LES e AR con febbre e affaticamento,non vi erano differenze significative nei livelli di complementiC3 e C4 e CRP (P>0,05). Tuttavia, nei pazienti con LES con dolore articolare, eruzione cutanea a farfalla e ulcera orale, i livelli di complemento C3 e C4 sono stati marcatamente ridotti (P<0,05). Nei pazienti AR con questisintomi, c’è stato un aumento significativo di CRP (P<0,05;Tabella II). Ciò suggerisce che quando compaiono dolore congiunto, eruzione cutanea a farfalla e ulcera orale, i pazienti con riduzioni nei livelli di complemento C3 e C4 e livelli di CRP invariati possono essere diagnosticati con SLE. Al contrario, i pazienti con un livello aumentato di CRP e nessun cambiamento nei livelli di complemento C3 e C4 possono essere diagnosticati con RA. Ciò suggerisce che sebbene i complementi C3 e C4 e CRP non mostrino la diagnosi differenziale di LES e racon febbre e affaticamento, possono essere utili per la diagnosi differenziale di LES e RA con dolori articolari, eruzioni cutanee di farfalle e oralulcera.

Tabella I. Dati clinici dei pazienti di controllo, LES andRA.

Tabella II. Uso di C3, C4 e CRP per la diagnosi differenziale di SLE e RA.

Correlazione dell’attività della malattia con C3, C4 e CRP

I pazienti con LES e AR sono stati raggruppati come lievi, moderati e gravi in base all’attività della malattia. Sono state analizzate le correlazioni dell’attività della malattia e i cambiamenti nei marcatori sierici. I risultati hanno mostrato che i titoli di complemento C3 e C4 eranonegativamente correlati all’attività della malattia del LES (correlazionecoefficiente r = -0,535 e -0,397 per C3 e C4, rispettivamente, P <0,05; Fig. 2 BIS e B). È stata identificata una correlazione significativa tra il titolo CRP e l’attività della malattia da slitta (r=0,068, P>0.05; Fig. 2 QUATER). Tuttavia, il titolo CRP erapositivamente correlato con l’attività della malattia di RA (r = 0,386, P< 0,05; Fig. 3 QUATER). I titoli del complemento C3 e C4 non sono stati osservati correlati con l’attività della malattia di RA (r=0,014 e 0,099 per C3 e C4, rispettivamente, P > 0,05; Fig. 3 BIS e B). Con l’aumento dell’attività della malattia di LES e RA, i livelli di complemento C3 e C4 sono diminuiti (P<0,05) e il livello di CRP è aumentato, rispettivamente(P<0,05; Tabella III).

Tabella III. Valutazione di C3, C4 e CRP nell’attività della malattia di SLEand RA.

Previsione clinica di SLE e RA CONC3, C4 e CRP

I cambiamenti nei marcatori sierici sono stati analizzati in SLE e rapaci in base ai sintomi di diversi stadi (Tabella IV). Nei pazienti con LES è stato dimostrato un rischio più elevato di dolore articolare,eruzione cutanea a farfalla e ulcera orale, insieme alla riduzione del complemento C3, ma non del complemento C4 (P<0,05).La sovraregolazione del complemento C4 e della PCR ha aumentato il rischio di dolore congiunto, eruzione cutanea a farfalla e ulcera orale nei pazienti con AR(P<0,05). Tuttavia, nei pazienti con LES, i livelli di C4 e CRP non lo fannocambiare significativamente durante il corso della malattia. Theseresults suggeriscono che complemento C3 downregulation era un segno di themiddle e fasi tardive di SLE mentre complemento C4 e CRPupregulation indicavano le fasi medie e tardive di RA.

Tabella IV. Valore predittivo di C3, C4 e CRPper la progressione della malattia di SLE e RA.

Discussione

Il lupus e l’artrite reumatoide sono tipicidisturbi autoimmuni. Poiché l ‘ 80% dei pazienti con LES e AR ha febbree affaticamento durante le prime fasi, è difficile distingueretra questi due disturbi (10).Studi precedenti (11,12) hanno dimostrato che i marcatori del sangue possono essereutilizzato come diagnosi ausiliaria delle due malattie. Tuttavia, i marcatori non sono specifici e i loro ruoli nella diagnosi differenziale, nella previsione e nella valutazione dell’attività della malattia di SLE e RA non sono ben noti. Inoltre, il ruolo dei marcatori sierici in diverse regioni ed etnia è stato raramente riportato (13). Nel presente studio, è stato analizzato il ruolo dicomplementi e CRP nella diagnosi differenziale e nella valutazione dell’attività della malattia di SLE e RA.

I risultati hanno mostrato che nella fase iniziale di SLEand RA non c’erano chiare differenze nei titoli di C3, C4 OCRP. Tuttavia, nelle fasi medie e tardive, i livelli di complemento C3 e C4 sono stati significativamente ridotti nei pazienti con LES e i livelli di CRP sono aumentati nei pazienti con AR. Ciò suggerisce che i complementi C3 e C4 e CRP non hanno alcun significato nella diagnosi differenziale di SLE e RA nelle fasi iniziali. Questo può essere associato alinfiammazione leggera all’inizio di queste malattie. Tuttavia, nelle fasi intermedie e tardive, vi sono state riduzioni significative dei livelli di complemento C3 e C4, ma non del livello di PCR negli SLEpazienti. Al contrario, nei pazienti con AR il livello di PCR è stato ridotto in modo marcato e non sono state osservate variazioni nei livelli del complemento C3 e C4. La patogenesi differente di SLE e di RA può essere dovuto thedifferences in indicatori del siero, sebbene l’infiammazione sia un commoncomplication di SLE e di RA. Ad esempio, nei pazienti con LES, la riduzione dei livelli di complemento può essere indotta dall’aumento della scarica renale e della deposizione del complesso immunitario mentre nei pazienti con AR, il livello di CRP è stato gradualmente aumentato e positivamente associato all’infiammazione. Tali modifiche erano conformi alle rilevazioni precedenti (14).

Uno studio precedente ha mostrato che i complementi C3 e C4 erano ridotti in individui caucasici con l’attività della malattia ofRA (15). Tuttavia, solo il complementoc4 è stato associato al LES in individui provenienti da Taiwan (Repubblica della Cina) (16). Nello studio attuale, abbiamo osservato che nella Cina settentrionale, i livelli di complemento C3 e C4 erano diminuiti con l’attività della malattia del LES, mentre il livello di CRP non era significativamente cambiato. Nei pazienti con AR, i livelli di C3 e C4 del complemento tendevano ad aumentare all’aumentare dell’attività della malattia, ma non sono state osservate differenze significative.Sebbene uno studio su pazienti con LES caucasici abbia dimostrato che i livelli di CRP sono aumentati insieme ai punteggi SLEDAI (17), nel presente studio non sono state rilevate modifiche nel titolo di CRP nei pazienti con LES, sebbene sia stato osservato un aumento nei pazienti con AR. I nostri risultati mostrano che le valutazioni dell’attività di LES e RA e dei progressi nella Cina settentrionale possono essere facilitate dalla misurazione dei complementi C3 e C4 e CRP. Inoltre, questi dati suggeriscono che l’etnia influenza i ruoli di C3, C4 e CRP nella diagnosi differenziale di SLE e RA.

La maggior parte dei pazienti con LES e RA mostra sintomi di febbre e affaticamento durante le prime fasi della malattia.Con il progresso della malattia, i pazienti presentano dolori articolatie eruzione di farfalla. Infine, compaiono disturbi del microcircolo e oralulceri (18). Sulla base del processo di malattia, abbiamo caratterizzato la febbre e la fatica come sintomi precoci, dolori articolari e rash a farfalla come sintomi di metafase e ulcera orale come sintomi di fase tardiva. Questo metodo di classificazione erain accordo con i sintomi clinici della maggior parte dei pazienti. Poiché questo metodo di classificazione può riflettere ildinamica della malattia, l’abbiamo applicata per valutare il ruolo dei serummarker nella previsione e valutazione della malattia. In uno studio precedente, i livelli di complemento C3 e C4 sono stati osservati essere ridotti in pazienti con LES con dolore articolare, rash a farfalla e oralulcers. Tuttavia, in questa fase non sono state rilevate variazioni significative dei livelli di PCR (10). Nei RApazienti, la via classica del sistema del complemento svolge un ruolo importante nell’infiammazione; questa via può essere attivata dal CRP (19). In uno studio in cui i RApazienti sono stati trattati con anticorpi anti-TNF-α, i livelli del sistema del complemento non sono stati ridotti con la PCR in alcuni pazienti. Ciò suggerisce che l’attivazione del sistema del complemento non è regolamentata esclusivamente dal CCRP (20). Nel nostro studio, i livelli di C3 ridotti sono stati significativamente correlati con i sintomi della fase intermedia e tardiva di SLE, ma non RA. Rispetto al primo stadio, l’aumento del complemento C4 e CRP era correlato con i sintomi della fase media e tardiva di RA, ma non SLE. L’aumento dei livelli di complemento C4 e CRP è stato correlato con i sintomi della fase media e tardiva di RA, ma non SLE. Questi risultati sono diversi da quelli degli studi precedenti. La progressione della malattiae il background genetico dei pazienti potrebbe essere stato diverso. Il nostro studio ha dimostrato che C3, C4 e CRP sono importanti per la diagnosi differenziale e la previsione dei sintomi clinici di SLE e RA.

Sebbene ci siano alcune differenze nei ruoli dei complementi C3 e C4 e CRP nella diagnosi differenziale diSLE e RA (21,22), i nostri risultati hanno rivelato che nei pazienti con SLE andRA della Cina settentrionale, C3, C4 e CRP possono essere utilizzati per la diagnosi differenziale, la previsione dei sintomi e la valutazione del progresso della malattia. Inoltre, questi risultati hanno ulteriormente dimostrato chela riduzione del complemento dovrebbe essere causata dal complesso immunitariodepositi, che hanno contribuito alla patogenesi del LES. Bycontrast, RA pricipalmente è stato causato dai fattori infiammatori secretedfrom cellule di T che seguono i cambiamenti di autoantigen. Questi risultati indicano che diverse vie infiammatorie possono mediare la patogenesi e lo sviluppo di LES e RA. Sebbene ci fossero certesimilarità nei sintomi, nel decorso della malattia e nei marcatori sierici diSLE e AR, i cambiamenti nei fattori infiammatori sono stati rilevatiper essere eterogenei. La natura della malattia differisce tra SLEand RA.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto dalla National Natural Science Foundation of China (NSFC;2006AA02Z4B1, J0730858, J0830834).