837. Dwukropkowe dostarczanie wektorów wirusowych za pomocą koniugatów wirus-Mikrobułka do terapii genowej zapalnej choroby jelit

w ciągu ostatnich kilku lat opracowaliśmy nową technologię transferu genów, która pozwala na bezpieczne i wydajne dostarczanie rekombinowanych wektorów wirusowych do miejsc docelowych do zastosowań terapii genowej. W tej technologii cząsteczki wirusa są stabilnie przyłączane do powierzchni mikrogranulek, a następnie dostarczane do miejsc docelowych w postaci koniugatów wirus-mikrogranulka. Takie koniugaty mogą infekować komórki z wydajnością równą lub nawet większą niż wolne wektory wirusowe. W szczególności, transdukcja komórek docelowych, które są słabo podatne na infekcje przez wolne wektory wirusowe, może być znacznie zwiększona, zapewniając dołączone wektory wirusowe o szerszym tropizmie. Ta technologia transferu genów jest obecnie wykorzystywana do opracowania strategii transferu genów w zapalnej chorobie jelit (IBD). Używając wektora adenowirusowego przenoszącego gen dla silnego czynnika przeciwzapalnego, interleukiny-10 (IL-10), pytamy, czy wektor adenowirusowy może być dostarczony do zmian zapalnych w okrężnicy po podaniu wewnątrzkolonicznym koniugatów wirusa z mikrobułką za pomocą lewatywy i czy może to zwiększyć lokalne poziomy IL-10 w okrężnicy w celu złagodzenia zapalenia jelita grubego. Za pomocą mysich modeli zapalenia jelita grubego wykazaliśmy, że wewnątrzkoloniczne podawanie adenowirusowych wektorów zawierających mysi Gen IL – 10 w postaci koniugatów wirus-mikrogłowy zapewniło lepszą poprawę zapalenia jelita grubego nad tymi samymi wektorami adenowirusowymi, które podawano w postaci wolnej. Ta większa skuteczność w łagodzeniu zapalenia jelita grubego wynika przede wszystkim ze zwiększonej transdukcji tkanki okrężnicy i późniejszej produkcji IL – 10 na wysokim poziomie lokalnie w zapalnym okrężnicy. Rozpoczęliśmy również badania mające na celu sprawdzenie, czy adeno-associated viral vectors (AAV) może być stosowany w postaci koniugatów wirus-mikrogłowy do ich ukierunkowanego dostarczania do zmian zapalnych w okrężnicy. Eksperymenty z wykorzystaniem AAV niosącego Gen markerowy sugerują, że użycie koniugatów wirus-mikrogłowy może zwiększyć transdukcję tkanki okrężnicy przez AAV w modelu mysim zapalenia jelita grubego. Obecnie zadajemy pytanie, czy wewnątrzkoloniczne podawanie AAV z mysim genem IL-10 w postaci koniugatów wirusowo-mikrobułkowych może zwiększyć lokalne poziomy IL-10 w celu złagodzenia zapalenia jelita grubego poprzez skuteczną transdukcję zapalenia jelita grubego. Wyniki te sugerują potencjał dla tej technologii transferu genów, aby służyć jako skuteczna strategia terapii genowej dla IBD. Wyraźną przewagą tej technologii nad innymi wirusowymi strategiami transferu genów w terapii IBD, w tym te, które obejmują systemowe dostarczanie wektorów wirusowych, jest to, że dostarczanie wektorów wirusowych i późniejsza produkcja IL-10 (lub innych białek terapeutycznych) koncentruje się na zmianach zapalnych. Ponadto, ponieważ wszystkie cząsteczki wirusa są stabilnie zakotwiczone w mikrogranulkach, należy zminimalizować niekontrolowane dostarczanie wektorów wirusowych do innych narządów, a następnie ich transdukcję. Cechy te powinny nie tylko zmaksymalizować skuteczność terapeutyczną, ale także zwiększyć bezpieczeństwo stosowania wektorów wirusowych.