ilościowe określanie poziomów ROS przy użyciu CM-H2DCFDA i HyPer

przy niskich poziomach reaktywne formy tlenu (ROS) mogą działać jako cząsteczki sygnalizujące w komórkach. Gdy produkcja ROS znacznie przekracza możliwości endogennych systemów przeciwutleniających lub poziomy przeciwutleniaczy są zmniejszone, poziom ROS wzrasta dalej. Ten ostatni jest związany z indukcją stresu oksydacyjnego i związanym z nim transdukcją sygnału i charakteryzuje się indukowanymi przez ROS zmianami w homeostazie redoks komórek i/lub szkodliwym wpływem na biomolekuły (np. DNA, białek i lipidów). Biorąc pod uwagę złożone mechanizmy zaangażowane w produkcję i usuwanie ROS, w połączeniu z brakiem cząsteczek reporterowych, które są naprawdę specyficzne dla określonego typu ROS, kwantyfikacja (pod)komórkowych poziomów ROS jest trudnym zadaniem. W tym rozdziale opisujemy dwie strategie pomiaru ROS: one approach to assess general oxidant levels using the chemical reporter CM-H2DCFDA (5-(and-6)-chloromethyl-2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate), and a second approach allowing more specific analysis of cytosolic hydrogen peroxide (H2O2) levels using protein-based sensors (HyPer and SypHer).