Medycyna Doświadczalna i terapeutyczna

wprowadzenie

toczeń rumieniowaty układowy (SLE) i reumatoidalne zapalenie stawów (RZS) są układowymi chorobami autoimmunologicznymi, które mogą atakować komórki i tkanki ciała, powodując zapalenie i uszkodzenie tkanki. Procesy i mechanizmy rozwoju SLE i RA nie są dobrze ugruntowane. Ze względu na podobieństwo objawów (1,2), różna diagnoza i leczenie tych dwóch chorób jestzagrożone. Kliniczne badania laboratoryjne mogą być wykonywane przy użyciu różnych markerów surowicy (3,4).

zaobserwowano pewne różnice w patogenezie, objawach klinicznych i zmianach autoprzeciwciał między SLE i RZS (5). Wskazują one, że markery serum są w stanie odzwierciedlić różnice między dwoma przypadkami w szerokim zakresie aspektów. W celu zilustrowania roli markerów surowicy w diagnostyce różnicowej i ocenie aktywności chorobowej SLE i RZS oraz opracowania różnych mechanizmów patogennych badaliśmy substancje uzupełniające C3 I C4 oraz CRP, które są blisko powiązane z reakcją zapalną.

materiały i metody

populacja pacjentów

łącznie 347 pacjentów z SLE i 382 pacjentów z RZS zostało wybranych spośród osób leczonych w drugim szpitalu stowarzyszonym Uniwersytetu Medycznego w Harbinie (Harbin, Chiny)W latach 2009-2012. Wszyscy pacjenci wyrazili świadomą zgodę i zgłosili się do American College of Rheumatology 1990 kryteriów klasyfikacji tocznia rumieniowatego układowego (6,7). Badanie zostało zatwierdzone przez Institutional Research Board Uniwersytetu Medycznego w HarbinMedical. Pozyskiwanie danych klinicznych i ocenianiediagnozy i aktywności chorobowej zostało przeprowadzone przez tego samego fizyka. Grupę kontrolną stanowiło 66 pacjentów z rumieniem guzowatym.

aktywność i przebieg choroby ocena

oceny aktywności choroby SLE przeprowadzono za pomocą systemu oceny tocznia rumieniowatego ActivityIndex (SLEDAI). Zgodnie z kryteriami Gladmanet al (8), oceny były następujące: 0-9 dla lekkiej aktywności pacjentów z SLE, 10-14 dla formodernej aktywności pacjentów z SLE i ≥15 dla ciężkiej aktywności pacjentów z SLE. Oceny aktywności choroby RZS przeprowadzono za pomocą systemu oceny DAS28 (9), który ma następujące oceny: <3,2 dla lekkiej aktywności, 3,2–5.1 dla umiarkowanej aktywności i >5. 1 dla ciężkiej aktywności. Na podstawie progresji choroby określano gorączkę i zmęczenie jako wczesne objawy, ból stawów i wysypkę motylkową jako objawy metafazy, a owrzodzenia jamy ustnej jako objawy późne.

próbki surowicy

próbki surowicy pobrano od pacjentów.C3, C4 i CRP mierzono nefelometrią wzmocnioną lateksem przy użyciu testów wysokiej czułości na analizatorze Behringa (BN100nephelometer; Dade Behring, Marburg, Niemcy). Stężenie CRP było zwykle poniżej 5 mg/l. Prawidłowe zakresy suplementów C3 I C4 wynosiły odpowiednio 0,9–1,8 g/l i 0,1–0,4 g/l.

analiza statystyczna

przy użyciu SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA), różnice w poziomach uzupełnień C3 I C4 oraz CRP wśród grup zostały porównane z testem t Studenta. Korelację aktywności choroby z C3, C4 i CRP analizowano metodą korelacji liniowej. Dane przedstawiono jako średnią ± SD.P< 0, 05 uznano za wynik statystycznie istotny.

wyniki

zmiany C3, C4 i CRP u SLE i Rapatientów

na podstawie danych klinicznych i mian markerów surowicy zaobserwowaliśmy,że poziomy suplementów C3 I C4 u pacjentów z SLE były niższe niż u zdrowych osób i pacjentów z RZS (P<0, 05; Fig. 1a). Poziom TheCRP u pacjentów z RZS był wyższy niż w grupie kontrolnej i u pacjentów z SLE (P<0, 05; Fig. 1B).

diagnostyka różnicowa SLE i RZS z C3, C4 i CRP

zebrano dane kliniczne pacjentów z grupy kontrolnej, SLE i RZS, w tym płeć, wiek, czas trwania choroby, wskaźnik DAS28, ocena SLEDAI, dopełniacz C3, dopełniacz C4 i CRP(Tabela I). Porównano pacjentów z SLE i RZS z podobnymi objawami. Wyniki wykazały,że u pacjentów z SLE i RZS z gorączką i zmęczeniem nie stwierdzono istotnych różnic w stężeniu dopełniaczówc3 i C4 oraz CRP (P>0,05). Jednak u pacjentów z SLE z bólem stawów, wysypką motylkową i owrzodzeniem jamy ustnej, poziom C3 I C4 dopełniacza był znacznie zmniejszony (P<0,05). U pacjentów z RZS z tymi objawami stwierdzono znaczny wzrost CRP (P<0, 05;tabela II). Sugeruje to, że gdy pojawią się bóle stawów, wysypka motylkowa i owrzodzenie jamy ustnej, u pacjentów z obniżeniem poziomu dopełniacza C3 I C4 oraz niezmienionym poziomem CRP można zdiagnozować SLE. Natomiast pacjenci ze zwiększonym poziomem CRP i brakiem zmian w poziomach C3 I C4 dopełniacza mogą być diagnozowani z RZS. Sugeruje to, że chociaż uzupełnienia C3 i C4 i CRP nie wykazały diagnostykę różnicową SLE I raz gorączką i zmęczeniem, mogą one być przydatne dla differentialdiagnoza SLE i RZS z bólem stawów, Motyl wysypka i oralulcer.

dane kliniczne pacjentów z grupy kontrolnej, SLE andRA.

tabela II. zastosowanie C3, C4 i CRP w diagnostyce różnicowej SLE i RZS.

korelacja aktywności choroby z C3, C4 i CRP

pacjenci z SLE i RZS byli pogrupowani jako nieznaczne, umiarkowane i ciężkie w zależności od aktywności choroby. Analizowano korelacje aktywności choroby i zmiany markerów w surowicy. Wyniki pokazały, że miana C3 I C4 dopełniacza były w sposób systematyczny skorelowane z aktywnością choroby SLE(korelacja efektywna r = -0,535 i -0,397 odpowiednio dla C3 I C4, P<0,05; Fig. 2A i B). Stwierdzono istotną korelację pomiędzy mianem CRP a aktywnością SLEdisease (r=0, 068, P>0).05; rys. 2C). Jednakże miano CRP było odpowiednio skorelowane z aktywnością choroby RZS (R=0,386,P<0,05; Fig. 3C). Miana C3 I C4 dopełniacza nie były skorelowane z aktywnością choroby RZS (r=0,014 i 0,099 odpowiednio dla C3 I C4, P>0,05;Fig. 3A i B). Wraz ze wzrostem aktywności SLE i RZS, zmniejszał się poziom C3 I C4 dopełniacza(P<0,05) i zwiększał poziom CRP odpowiednio (P<0,05; tabela III).

tabela III. ocena C3, C4 i CRP w aktywności choroby SLEand RA.

kliniczne przewidywanie SLE i RZS z C3, C4 i CRP

zmiany markerów w surowicy analizowano u SLE i Rapatientów zgodnie z objawami w różnych stadiach (tabela IV). Wykazano większe ryzyko bólu stawów, wysypki motylkowej i owrzodzenia jamy ustnej u pacjentów z SLE wraz ze zmniejszeniem stężenia dopełniacza C3, ale nie C4 (P<0,05).Zwiększenie stężenia dopełniacza C4 i CRP zwiększało ryzyko wystąpienia bólu stawów, wysypki motylkowej i owrzodzenia jamy ustnej u pacjentów z RZS(P<0,05). Jednak u pacjentów z SLE poziom C4 i CRP nie zmieniał się znacząco w trakcie choroby. Wyniki te sugerują, że dopełniacz C3 downregulation był oznaką themiddle i późne stadia SLE, podczas gdy dopełniacz C4 I CRPupregulation wskazywały na środkowe i późne stadia RA.

tabela IV. wartość predykcyjna C3, C4 i CRP dla progresji choroby SLE i RZS.

dyskusja

toczeń i reumatoidalne zapalenie stawów są typowymi schorzeniami autoimmunologicznymi. Ponieważ 80% pacjentów z SLE i RZS ma gorączkę i zmęczenie we wczesnych stadiach, trudno jest rozróżnić między tymi dwoma zaburzeniami (10).Wcześniejsze badania (11,12) wykazały, że markery krwi mogą być wykorzystywane jako diagnostyka pomocnicza obu chorób. Jednak znaczniki są niespecyficzne, a ich rola w diagnostyce różnicowej, przewidywaniu i ocenie aktywności choroby SLE I ra nie są dobrze znane. Ponadto rzadko zgłaszano rolę markerów surowicy w różnych regionach i na tle etnicznym(13). W niniejszej pracy przeanalizowano rolę Uzupełnienia i CRP w diagnostyce różnicowej i ocenie aktywności chorobowej SLE i RZS.

wyniki wykazały, że we wczesnym stadium Sleanda RZS nie było wyraźnych różnic w mianach C3, C4 orCRP. Jednak w środkowym i późnym stadium poziom C3 I C4 dopełniacza był znacząco zmniejszony u pacjentów z SLE, a poziom CRP wzrósł u pacjentów z RZS. Sugeruje to, że uzupełnienia C3 I C4 i CRP nie mają znaczenia w diagnostyce różnicowej SLE i RZS we wczesnych stadiach. Może to być związane z lekkim stanem zapalnym na początku tych chorób. Jednak w środkowym i późnym stadium stwierdzono znaczne zmniejszenie całkowitego poziomu C3 I C4, ale nie poziomu CRP u Slepacjentów. Natomiast u pacjentów z RZS poziom CRP był wyraźnie zmniejszony i nie obserwowano zmian w poziomach C3 I C4 dopełniacza. Różna patogeneza SLE i RZS może być spowodowana różnicami w markerach surowicy, chociaż zapalenie jest częstym powikłaniem SLE i RZS. Na przykład u pacjentów z SLE zmniejszenie poziomu dopełniacza może być wywołane zwiększeniem odkładania się kidneydischarge i kompleksu immunologicznego, podczas gdy u pacjentów z RZS poziom CRP był stopniowo zwiększany i pozytywnie związany z zapaleniem. Zmiany te były zgodne z wcześniejszymi ustaleniami (14).

poprzednie badanie wykazało, że uzupełnienia C3 I C4 były zmniejszone u osób rasy kaukaskiej z aktywnością choroby ofRA (15). Jednak tylko dopełniacz4 był związany z SLE u osób z Tajwanu (Republika Chiny) (16). W obecnym badaniu zaobserwowaliśmy, że w północnych Chinach Poziom dopełniacza C3 I C4 zmniejszył się wraz z aktywnością choroby SLE, natomiast poziom CRP nie uległ znaczącej zmianie. U pacjentów z RZS całkowite stężenia C3 I C4 zwiększały się wraz ze wzrostem aktywności choroby, nie obserwowano jednak istotnych różnic.Chociaż badanie z udziałem pacjentów rasy kaukaskiej z SLE wykazało, że poziom CRP wzrastał wraz z wynikiem SLEDAI (17), w niniejszym badaniu nie stwierdzono zmian w mianie CRP u pacjentów z SLE, chociaż wzrost obserwowano u pacjentów z RZS. Nasze wyniki pokazują, że ocena aktywności SLE i RA oraz postępu w północnych Chinach może być ułatwiona przez pomiar uzupełnień C3 I C4 oraz CRP. Ponadto dane te sugerują, że pochodzenie etniczne wpływa na role C3, C4 i CRP w diagnostyce różnicowej SLE i RZS.

u większości pacjentów z SLE i RZS występują objawy zmęczenia we wczesnych stadiach choroby.Wraz z postępem choroby, pacjenci obecni z bólem stawówi wysypka motyla. Wreszcie pojawiają się zaburzenia mikrokrążenia i oralulcers (18). Na podstawie procesu chorobowego scharakteryzowaliśmy gorączkę i zmęczenie jako objawy wczesnobjawowe, ból stawów i wysypka motylkowa jako objawy metafazy oraz wrzód jamy ustnej jako objawy późnej fazy. Ta metoda klasyfikacji była zgodna z objawami klinicznymi większości pacjentów. Ponieważ ta metoda klasyfikacji może odzwierciedlać dynamikę choroby, zastosowaliśmy ją do oceny roli znaczników serum w przewidywaniu i ocenie choroby. Wpoprzednim badaniu obserwowano zmniejszenie stężenia dopełniacza C3 I C4 u pacjentów z SLE z bólem stawów, wysypką motylkową i płucami ustnymi. Jednak w trakcie tego etapu nie wykryto żadnych wyraźnych zmian w poziomach CRP (10). U Rapatientów klasyczny szlak układu dopełniacza odgrywa istotną rolę w zapaleniach; szlak ten może być aktywowany przez CRP (19). W badaniu, w którym Rapacjenci byli leczeni przeciwciałami anty-TNF-α, poziomy układu dopełniacza nie były zmniejszone w przypadku CRP u niektórych pacjentów. Sugeruje to, że aktywacja systemu dopełniacza nie jest regulowana wyłącznie przez CRP (20). W naszym badaniu, zmniejszone całkowite poziomy C3 były znacząco skorelowane z objawami środkowego i późnego stadium SLE, ale nie RZS. W porównaniu z dawką, wzrost dopełniacza C4 i CRP był skorelowany z objawami środkowego i późnego stadium RZS, ale nie SLE. Wzrost poziomu C4 i CRP dopełniacza był skorelowany z objawami środkowego i ostatniego stadium RZS, ale nie SLE. Wyniki te różnią się od wyników poprzednich badań. Postęp choroby i tło genetyczne pacjentów mogły być różne. Nasze badanie wykazało, że C3, C4 i CRP są ważne dla różnicowego diagnozowania i przewidywania objawów klinicznych SLE i RZS.

chociaż istnieją pewne różnice w rolespełnienia C3 I C4 i CRP w diagnostyce różnicowej SLE i RZS (21,22), nasze wyniki wykazały, że u pacjentów z SLE andRA w północnych Chinach, C3, C4 i CRP mogą być wykorzystywane do diagnostyki różnicowej, przewidywania objawów i oceny postępu choroby. Ponadto wyniki te dodatkowo wykazały, że zmniejszenie dopełniacza powinno być spowodowane przez kompleksy immunologiczne, które przyczyniły się do patogenezy SLE. Przezkontrast, RZS był głównie spowodowany czynnikami zapalnymi wydzielanymi z komórek T po zmianach autoantygenowych. Wyniki te wskazują, że różne szlaki zapalne mogą pośredniczyć w patogenezie i rozwoju SLE i RZS. Chociaż stwierdzono pewne podobieństwa w objawach, przebiegu choroby i wskaźnikach serotypu RZS, zmiany w czynnikach zapalnych były niejednorodne. Charakter choroby różni się między SLEand RA.

podziękowania

to badanie zostało wsparte grantami od National Natural Science Foundation Of China (NSFC;2006AA02Z4B1, J0730858, J0830834).