Wpływ długotrwałego leczenia azytromycyną, klarytromycyną lub lewofloksacyną na Chlamydia pneumoniae w modelu ciągłego zakażenia | Jiotower
dyskusja
metody stosowane obecnie do hodowli C. pneumoniae i w badaniach wrażliwości in vitro nie są analogiczne do zakażenia, ponieważ występuje ono in vivo. Stworzyliśmy model in vitro ciągłego zakażenia C. pneumoniae komórkami HEp-2, które przez ponad 4 lata pozostawały w ciągłym zakażeniu bez dodania świeżych chlamydii lub komórek gospodarza, dodania cykloheksymidu lub odwirowania (23). Badania ultrastrukturalne stale zakażonych komórek wykazały obecność subpopulacji nieprawidłowych inkluzji, które były bardzo podobne do trwałych form indukowanych po leczeniu interferonem gamma (22). Dlatego model ten może dokładniej odzwierciedlać interakcje między chlamydią a komórkami gospodarza i, w związku z tym, być lepszym modelem dla badań wrażliwości in vitro C. pneumoniae.
wyniki tego badania wykazały, że długotrwałe leczenie azytromycyną, klarytromycyną i lewofloksacyną w stężeniach osiąganych w płynie nabłonkowym zmniejszało się, ale nie eliminowało C. pneumoniae z ciągle zakażonych komórek gospodarza.
Galasso i Manire (7) byli pierwszymi badaczami, którzy zastosowali model ciągłej infekcji do badania aktywności antybiotyków. Wykorzystali komórki HeLa stale zakażone Chlamydia psittaci do określenia wpływu penicyliny, tetracykliny i chloramfenikolu. Okazało się, że 500 U penicyliny/ml hamuje wzrost chlamydiów, ale nawet długotrwałe leczenie przez 100 dni nie udało się wyeliminować organizmu. Ponad 14 dni leczenia 10 µg tetracykliny / ml lub 21 dni 25 i 100 µg chloramfenikolu/ml było konieczne do zahamowania wzrostu chlamydiów do niewykrywalnych poziomów. Dreses-Werringloer et al. (6) niedawno zgłoszono podobne obserwacje dotyczące wpływu cyprofloksacyny i ofloksacyny na ustalone (2 do 3 dni po zakażeniu) zakażenie C. trachomatis. Stwierdzono, że oba leki, w stężeniach przekraczających minimalne stężenie bakteriobójcze (0,5 µg cyprofloksacyny / ml, 1,0 i 2,0 µg ofloksacyny / ml), nie wyeliminowały C. trachomatis z zakażonych komórek HEp-2, a także wywołały trwałe zakażenie charakteryzujące się małą liczbą małych nieprawidłowych inkluzji obecnych przez 20 dni hodowli. Po usunięciu cyprofloksacyny z pożywki 10 lub 14 dni po zakażeniu, utrzymująca się chlamydia powróciła do jawnego wzrostu.
wyniki tego badania wskazują na kilka ważnych kwestii dotyczących stosowania antybiotyków, w tym azytromycyny, do wtórnego zapobiegania chorobowości serca (1, 10, 13). Stosowane dawki azytromycyny wynoszą 500 lub 600 mg/dobę przez 3 i 6 dni, a następnie dawki tygodniowe od 500 do 600 mg przez okres od 3 miesięcy do 1 roku. Na podstawie przedstawionych tutaj danych wydaje się mało prawdopodobne, aby te schematy dawkowania eliminowały C. pneumoniae z ogniska wewnątrznaczyniowego. Standardowa dawka oddechowa 1.Skuteczność 5 g azytromycyny w ciągu 5 dni wynosiła jedynie 70% i 83% w usuwaniu C. pneumoniae z nosogardzieli odpowiednio dorosłych i dzieci z zakażonym we Wspólnocie zapaleniem płuc (28). Dane są podobne dla innych antybiotyków. Block i in. (3) stwierdzono, że 10-dniowe leczenie erytromycyną lub klarytromycyną w postaci zawiesiny wykorzeniło C. pneumoniae z nosogardzieli odpowiednio u 86 i 79% dzieci z hodowlą dodatnią z zapaleniem płuc nabytym we Wspólnocie, pomimo faktu, że klarytromycyna była czterokrotnie aktywniejsza in vitro (15). Wyniki dwóch badań leczenia zapalenia płuc u dorosłych, w których oceniano lewofloksacynę i moksyfloksacynę, wykazały współczynnik eradykacji na poziomie 70 do 80% (16, 17). Dessus-Babus et al. niedawno opisano indukcję oporności na ofloksacynę i sparfloksacynę w Chlamydia trachomatis po seryjnym przejściu organizmu w stężeniach subinhibicyjnych tych leków (5). Oporność na antybiotyki nie została jeszcze opisana dla C. pneumoniae. Jednak Mikrofony trzech izolatów C. pneumoniae, uzyskane od dwóch pacjentów z zapaleniem płuc nabytym we Wspólnocie, leczonych azytromycyną, zwiększyły się czterokrotnie po leczeniu, chociaż nadal mieściły się w zakresie uznawanym za wrażliwe na lek(28). Nie jest jasne, czy był to odosobniony przypadek lub sugerujący możliwy rozwój trwałości. Ponadto, podawanie azytromycyny raz w tygodniu może powodować długotrwałe narażenie na działanie leków hamujących, co prowadzi do rozwoju oporności u innych bakterii oddechowych, zwłaszcza Streptococcus pneumoniae (24, 26).
istnienie uporczywości wiąże się również z odrębną ważną kwestią w leczeniu chorób związanych z C. pneumoniae. Trwałe formy na ogół nie replikują się lub mają zmniejszoną aktywność i dlatego mogą nie być podatne na antybiotyki. Jest całkiem możliwe, że 20 do 30% odsetek niepowodzeń mikrobiologicznych w raportowanych badaniach leczenia C. pneumoniae (3, 16, 17, 18) i zdolność C. pneumoniae do przetrwania leczenia antybiotykami w naszych eksperymentach mogą być bezpośrednio związane ze stanem trwałym.
C. pneumoniae mogą stymulować produkcję cytokin, chemokin i cząsteczek adhezyjnych w różnych liniach komórkowych śródbłonka i nabłonka (8, 9, 20, 25, 27). Te immunologicznie aktywne cząsteczki są w stanie indukować i podtrzymywać proces zapalny, który może odgrywać istotną rolę w patogenezie miażdżycy (30). Wstępne dane wykazały wyższą produkcję niektórych cytokin w modelu ciągłej infekcji w porównaniu z hodowlami pierwotnymi (27). W tym badaniu C. pneumoniae stymulowało znaczną produkcję IL – 6 i IL-8 w ciągle zakażonych komórkach HEp-2. Cytokiny te zostały wykryte w płytkach włóknistych sugerujących ich udział w rozwoju miażdżycy (31).
wykazano, że makrolidy i tetracykliny posiadają właściwości przeciwzapalne niezależnie od ich aktywności przeciwdrobnoustrojowej (19, 21, 32). Wykazano, że azytromycyna i klarytromycyna w stężeniach 1, 5 i 10 µg/ml wpływają w różnym stopniu na wytwarzanie IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10, czynnika stymulującego kolonie granulocytów-makrofagów i TNF-α przez ludzkie monocyty (21). Co najciekawsze, azytromycyna powodowała znaczące zmniejszenie il – 1a i TNF-α u 100% osób, a leczenie klarytromycyną powodowało znaczące zmniejszenie IL-6 i TNF-α odpowiednio u 60 i 86% osób. Podobnie, zmniejszenie poziomów 6-keto-prostaglandyny F1a, NO2, TNF-α, IL-1β i IL-6 obserwowano w mysich makrofagach leczonych azytromycyną, klarytromycyną, roksytromycyną i erytromycyną o wielkości od 5 do 80 µM (19). Chociaż w tym badaniu leczenie wszystkimi trzema antybiotykami zmniejszyło poziomy IL – 6 i IL-8 w hodowlach ciągłych, efekt ten wydawał się być przede wszystkim wtórny do aktywności antychlamydialnej, ponieważ poziomy cytokin korelowały z mianami C. pneumoniae.
