Avaliação In Vitro da Prata Coloidal sobre a Função Imunológica: Antilymphoproliferative Atividade

Resumo

prata Coloidal (AgC) é atualmente usado por seres humanos e pode ser feita através de inalação, injeção, ingestão e contato dérmico. No entanto, há informação limitada sobre a actividade imunológica; são necessárias mais investigações usando prata coloidal. No presente estudo, os efeitos do AgC (17.5 ng/mL) sobre parâmetros imunológicos (proliferação e immunophenotyping) usando humano de células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e macrófagos (fagocitose) e citotoxicidade em leucemia e linfoma de células de câncer de linhas (de 1,75 para 17,5 ng/mL) foram investigados. Observou-se uma diminuição significativa () da produção e proliferação de interleucina-2 (IL-2) induzida pela fitohemaglutinina ou pela concanavalina A em PCMC, sem afectar a sua viabilidade celular, mas com efeito citotóxico nas células cancerígenas. Os fenótipos de citocinas IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, INF-γ e IL-17A e CD3+, CD3−CD19+, CD3+CD4+, CD3+CD8+ e CD16+CD56+ PBMC não foram afetados pela AgC. O presente estudo demonstra que a prata coloidal é inofensiva e não tóxica para as células do sistema imunitário e a sua capacidade de interferir com a resposta imunitária, diminuindo a proliferação celular, quando estimulada com mitogénios, demonstrou o potencial anti-proliferativo do AgC.

1. Introdução a bioactividade das substâncias foi rastreada para identificar propriedades relacionadas com a acção antitumoral ou antiproliferativa . Os produtos com esta actividade foram utilizados na prática clínica para o tratamento do cancro ou de doenças relacionadas com a inflamação, tais como a autoimunidade. Os produtos de prata têm sido utilizados há milhares de anos para a higiene e como agentes antimicrobianos. Desde 1964, a prata coloidal (AgC) tem sido registrada como um material biocida nos Estados Unidos ; no México, AgC é comumente usado como desinfetante de água e alimentos para consumo humano . Geralmente, estes produtos são uma mistura de nanopartículas metálicas com estado de oxidação de zero (Ag + 0) e sais de prata com estados de oxidação de Ag+1, +2 ou +3 . Existem estudos que indicam que as propriedades antibacterianas e antitumoras dependem dos estados de oxidação da prata . Nanopartículas de prata (AgNPs) e íons de prata (Ag+) têm diferentes níveis de toxicidade devido a suas interações de carga superficial. Íons de prata são mais tóxicas, pois podem interagir com o negativo grupos de proteínas, produzindo mudanças estruturais na membrana celular e citoplasmáticos de proteínas, enquanto AgNPs podem interagir com o DNA, causando danos estruturais e de bloqueio; alguns estudos têm proposto que estas nanoestruturas podem produzir aumento de toxicidade em longa exposição vezes, devido ao fato de que AgNPs em soluções aquosas pode sofrer oxidação e de liberação de íons de prata; o uso bem-sucedido de prata coloidal soluções pode ser explicado por este mecanismo de acção . A actividade anticancerosa da AgC sobre as células cancerígenas MCF-7 deve-se provavelmente à apoptose induzida pela diminuição da lactato desidrogenase e pelo aumento das actividades da superóxido dismutase; em contraste, em PBMC, a actividade da lactato desidrogenase diminuiu com a AgC, mas não se correlacionou com a morte celular . Há pouca informação científica sobre parâmetros imunológicos e cancerígenos nos seres humanos sobre os efeitos da prata coloidal, como uma mistura de nanopartículas e íons, em comparação com a pesquisa de nanopartículas de prata. O presente estudo foi concebido para explorar as propriedades antiproliferativas da prata coloidal e seu efeito na imunofenotipagem celular, produção de citocinas, e fagocitose em PBMC.

2. Materiais e métodos

2.1. Prata coloidal (AgC)

prata coloidal estabilizada com Granetina foi comprada da MICRODYN (México) como uma solução de reserva de 0,35%. Foi esterilizado por filtração (filtro de 0, 2 µm, Millipore, EUA) e diluído numa concentração de 10, 5 µg/mL com RPMI-1640, complementado com 10% de FBS para ensaios in vitro.

2.2. Os reagentes

Fitohemaglutinina (utilizados em doses de 5 µg/mL) e de concanavalina a (utilizados em doses de 5 µg/mL) foram comprados a Sigma-Aldrich (St.Louis, MO, EUA). A doxorrubicina (LEMERY S. A. de C. V., México) foi armazenada como solução-mãe de 3,4 mM em RPMI 1640 à temperatura ambiente e LPS (E. coli 0111:B4, Sigma-Aldrich) foi preparada a 10 ng/mL para tratar as células mononucleares do sangue periférico humano.

2.3. AGC Characterization

The morphology of coloidal silver was investigated with field emission scanning electron microscope (SEM) (Nova NanoSEM200 FEI). A solução coloidal (50 µL) foi colocada numa fita de carbono e seca à temperatura ambiente. As medições de tamanho e distribuição de nanopartículas foram determinadas usando uma dispersão de luz dinâmica (DLS) realizada por um Nanosizador NS 90 Malvern Instruments (Malvern Instruments, Reino Unido); as distribuições de tamanho dadas por DLS foram relatadas como porcentagem de intensidade, e os resultados foram apresentados como o valor médio de pelo menos três medições. O plasmon de ressonância medido por UV-vis foi observado num intervalo entre 300 e 600 nm utilizando o Espectrofotómetro Nanodropo 2000 (Thermo Fisher Scientific).

2.4. Isolamento de células mononucleares do sangue periférico (PBMC)

o sangue de voluntários humanos saudáveis foi obtido com seringas heparinizadas e colocado em tubos estéreis de polipropileno. As CMSP foram ainda isoladas com centrifugação Histopaca de 1, 077 gradiente de densidade a 400 g durante 30 minutos a 25 ° C (Sigma-Aldrich). As CMSP foram lavadas duas vezes com meio RPMI 1640, complementadas com 10% de soro fetal bovino (FBS) e 1% de solução antibiótica-antimicótica (referida como meio RPMI completo) a 250 g durante 10 minutos a 25°C.

2.5. A viabilidade celular

PBMC foi ajustada para 1 × 106 células/mL em meio RPMI completo e foram adicionados 17,5 ng / mL de prata coloidal e incubados durante 72 h a 37°C e 5% de atmosfera de CO2. Posteriormente, o sobrenadante foi removido por centrifugação a 250 g. as células foram então lavadas duas vezes com meio IPR completo. A viabilidade celular foi determinada pelo ensaio colorimétrico de redução do MTT, e as densidades ópticas resultantes da produção de formazan foram lidas a 570 nm. A viabilidade celular foi expressa em percentagem de viabilidade em comparação com o controlo não tratado. Os resultados foram dados como a média ± DP de três experiências independentes.

K562 (leucemia mielóide crônica), MOLT-4 (leucemia linfoblástica aguda), Ramos (Burkitt o linfoma), e L5178Y (linfoma) linhas de células de câncer foram adquiridos da American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, EUA) e mantidos em RPMI completo médio. As células foram cultivadas a 37 ° C e a 5% da atmosfera de CO2. As linhas celulares cancerígenas (5 × 103 células/alvéolo) foram revestidas em placas de 96 alvéolos e incubadas durante 24 h a 37°C em 5% de atmosfera de CO2.

após incubação, o meio de cultura foi removido e a prata coloidal foi adicionada em concentrações compreendidas entre 1, 75 e 17, 5 ng/mL. As placas foram então incubadas para 5 h a 37 ° C e 5% de atmosfera de CO2. Posteriormente, o sobrenadante foi removido e as células foram lavadas duas vezes com meio RPMI 1640. A viabilidade celular foi determinada pelo método de exclusão azul de tripano e a citotoxicidade foi expressa em inibição do crescimento celular de 50% (DL50) e 100% (DL100), em comparação com o controlo não tratado. Os resultados foram dados como a média ± DP de três experiências independentes.

2.6. Analisou-se o doseamento de citoquinas

sobrenadantes de PBMC tratados com AgC para os níveis de citoquinas. IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, TNF-α e IL-17A humanos citocinas foram determinados por meio de citometria de fluxo (Accuri C6, BD Bioscience, CA, EUA), usando CBA Th1/Th2/Th17 de Citocinas Kit BD™ (BD Bioscience, Bedford, MA, EUA), seguindo instruções do fabricante. CBA Flex Set analysis was performed using FCAP array v1. 0 software (Soft Flow Inc., AMERICA). Os valores proteicos foram convertidos para padrões proteicos NIBSC / OMS para comparações adicionais.

2.7. A proliferação e o doseamento IL-2

PBMC foram isolados por centrifugação do gradiente de densidade Histopaca, lavados três vezes com PBS e ressuspendidos em C diluente a 106 células/mL. A suspensão celular foi então diluído com o mesmo volume de 2,5 mM PKH26 tintura de ações (Sigma, St. Louis, MO), preparado em Diluente C, incubados por 3 min em temperatura ambiente, em seguida, adicionados a um volume igual de FBS, e incubadas em temperatura ambiente por mais de 2 minutos para parar a rotulagem, de acordo com o “Rimaniol et al., 2003 .”A partir daí, PBMC foram ajustados em concentrações de 1 × 106 células/mL, tratados com prata coloidal a uma concentração de 17,5 ng/mL, PHA ou contra Um, e incubadas por 72 h a 37°C e 5% de CO2 a atmosfera; a proliferação celular foi determinada por citometria de fluxo. As quantidades de IL-2 conteúdo no sobrenadante de PBMC foram medidos por Humanos IL-2 de Alta Sensibilidade do ELISA (limite de detecção de 0,4 pg/mL) e utilizado de acordo com as instruções do fabricante (eBiosciences, Viena, Áustria).

2.8. A determinação da produção de nitritos/nitratos

nitritos e nitratos foi determinada pela reacção colorimétrica de Griess utilizando a nitrate reductase (Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit Cayman, EUA), de acordo com as instruções do fabricante. Os níveis séricos de nitrito/nitrato foram expressos em nM/200 µL.

2.9. A análise da citometria de fluxo de antigénios da superfície celular

PBMC foi ajustada em concentrações de 1 × 106 células / mL e tratada com prata coloidal na concentração de 17, 5 ng/mL, e as placas foram incubadas durante 72 h a 37°C e 5% de atmosfera de CO2. Posteriormente, as células foram coletadas por centrifugação a 600 g por 10 minutos e um conjunto de anticorpos CD3+ FITC/CD8+, PE/CD45+, e PerCP/CD4 APC ou outro conjunto de anticorpos CD3+ FITC/CD16+ CD56 PE/CD45, e PerCP/CD19 APC (BD Multitest IMK Kit) foram adicionados e incuba-se a 15 minutos em temperatura ambiente no escuro. Os eritrócitos foram então lisados adicionando 450 µL de solução de lisagem 1x BD FACS™ e incubando 15 minutos à temperatura ambiente no escuro. As amostras estavam então prontas para serem analisadas no citômetro. A aquisição foi realizada no Accuri C6 BD instrument usando BD Multiset software com BD Worklist Manager software. Gating automatizado foi usado para análise fácil de cada população subconjunta.

2.10. A captação de FITC-dextrano

células dendríticas (DCs) foram geradas a partir de células PBMC e permitiram aderir a Frascos de cultura com tampa de filtro de 0, 22 µm (TPP, Alemanha). Após 2 h a 37°C, foram removidas células Não diferentes, e os monócitos aderentes foram subsequentemente cultivados durante 5 dias em RPMI-1640, complementados com 10% de FBS e 800 U/mL de rhuGM-CSF (Peprotech, México) e 50 ng/mL IL-4 (Peprotech, México). Posteriormente, as células foram tratadas com prata coloidal em concentrações de 17, 5 ng/mL e incubadas durante 72 h a 37°C e 5% na atmosfera de CO2. A endocitose CCS foi avaliada incubando 1 × 106 células com 1 mg/mL de FITC-dextrano (BD) durante 30 minutos a 37°C. após lavagem, as células foram analisadas por citometria de fluxo. Os controlos incluíram tubos incubados com FITC-dextrano a 4°C para inibir o processo endocítico e uma absorção basal realizada no ponto 0-tempo. A captação foi quantificada pela análise FACS (10 000 células por ponto) . A viabilidade foi determinada pela técnica de exclusão azul trypan.

2.11. Análise estatística

os resultados foram avaliados por ANOVA e os níveis médios de citoquinas entre os tratamentos foram comparados utilizando o teste de Mann–Whitney.

3. Resultados

3.1. A Prata coloidal Caracterização

A caracterização da prata coloidal dissolvido em água e em meio de cultura celular foi analisado pela dinâmica de dispersão de luz (DLS); a prata coloidal, dissolvido em água mostrou um tamanho médio de 100 nm, com um polydispersity índice de 0,2; a prata coloidal dissolvido no meio de cultura celular mostrou um tamanho médio de 155 nm e polydispersity índice de 0,23 (Figuras 1(a) e 1(b)). A imagem SEM mostrou a população de partículas dissolvidas em água com granulometria entre 50 e 190 nm [Figuras 1 c) e 1 d)]; a prata coloidal dissolvido no meio de cultura celular mostrou uma combinação de nanopartículas e alguns sais de prata (Figuras 1, alínea e) e 1(f)); no entanto, o tamanho médio obtido por DLS correlacionada com o histograma de partículas e a característica do plasmão de ressonância (Figuras 1, alínea g), 1(h) e 1(i)). A análise da prata coloidal sugere que esta solução tem forma semisférica e uma população heterogênea, formada por nanopartículas e aglomerados formados por sais de prata. Uma vez que o AgC foi caracterizado, procedemos à avaliação dos diferentes efeitos biológicos.

Figura 1

distribuição de Tamanho de prata coloidal. a) o DLS de prata coloidal dissolvido em água revelou uma dimensão média de 100 nm, com um índice de polidispersibilidade de 0,2. B) medições DLS de prata coloidal dissolvida em meio de cultura celular com uma dimensão média de 155 nm e um índice de polidispersibilidade de 0,23. imagem SEM das populações de partículas dissolvidas em água. Imagem SEM de prata coloidal dissolvida em meio de cultura celular. Histograma de partículas dissolvidas em água e meio de cultura, respectivamente. i) espectros UV-vis de prata coloidal. j) sais de prata formados em amostras de prata coloidal dissolvidas em meio de cultura. DLS, dispersão de luz dinâmica; SEM, microscopia eletrônica de varredura; e A. U., unidades arbitrárias.

3.2. Determinação da proliferação celular e produção de IL-2

em primeiro lugar, determinámos se a dose citotóxica anteriormente utilizada nas células cancerígenas da mama afecta as funções dos linfócitos ou dos macrófagos. Os resultados mostraram que a prata coloidal, o tratamento não afetou significativamente () PBMC a proliferação celular e a contagem de células, e os tratamentos com mitogens Con Um ou PHA significativamente () aumentou a proliferação celular e a contagem de células, em comparação com o controle não tratado; curiosamente, o combinado de tratamentos com AgC/Con Um ou AgC/PHA significativamente () diminui a proliferação de células e a contagem de células (Figuras 2 e 3) de PBMC. Resultados semelhantes foram observados por meio de citometria de fluxo e microscopia de fluorescência utilizando o corante fluorescente PKH26 (controle (94%), Con A (165%), PHA (156%), AgC (91%), AgC + Con A (80%), e AgC + PHA (77%)) (Figuras 3, 4 e 5). Além disso, AgC tratamento não afetou a IL-2 produção quando comparado com o controle (15 pg/mL) (), mas um aumento de IL-2 produção foi encontrado quando o PBMC foram estimulados com PHA (176 pg/mL) ou contra Um (a 150 pg/mL), e tratamentos com AgC + Con A (15 pg/mL) ou AgC + PHA (13 pg/mL) diminuição da IL-2 produção () (Figura 4).

Figura 2

a viabilidade Celular de PBMC tratados com prata coloidal e mitogens. PBMC (1 × 106 células/mL) foram tratados com Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), ou AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) e incubadas por 72 h a 37°C e 5% de CO2 para a atmosfera. A viabilidade celular foi analisada pelo ensaio MTT. Os dados representam a média ± desvio-padrão de três experiências independentes. . AgC, prata coloidal; PHA, fitomaglutinina; e Con a, concanavalina A.

Figura 3

Celular contagem de PBMC tratados com prata coloidal e mitogens. PBMC (1 × 106 células/mL) foram tratados com Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL), ou AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL) e incubadas por 72 h a 37°C e 5% de CO2 para a atmosfera. A contagem de células foi analisada por citometria de fluxo. Os dados representam a média ± desvio-padrão de três experiências independentes. . AgC, prata coloidal; PHA, fitomaglutinina; e Con A, concanavalin A.

Figura 4

proliferação Celular e IL-2 produção de PBMC tratados com prata coloidal e mitogens. PBMC (1 × 106 células/mL) foram tratados com Con A (5 µg/mL), PHA (5 µg/mL), AgC (17.5 ng/mL), AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), ou AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) e incubadas por 72 h a 37°C e 5% de CO2 para a atmosfera. A proliferação celular baseada na expressão de PKH26 foi analisada por citometria de fluxo. Os sobrenadantes IL-2 foram avaliados pelo teste ELISA. Os dados representam a média ± desvio-padrão de três experiências independentes. . AgC, prata coloidal; PHA, fitomaglutinina; e Con a, concanavalina A.

(a)

b)

(c)

d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figura 5

Celular proliferação de PBMC tratados com prata coloidal e mitogénios. PBMC (1 × 106 células/mL) foram tratados com (a) controlo negativo, (b) controle, (c), PHA (5 µg/mL), (d) Con A (5 µg/mL), (e) AgC (17.5 ng/mL), (f) AgC (17.5 ng/mL) + PHA (5 µg/mL), ou (g) AgC (17.5 ng/mL) + Con A (5 µg/mL) e incubadas por 72 h a 37°C e 5% de CO2 para a atmosfera. A proliferação celular foi analisada por microscopia de fluorescência. AgC, prata coloidal; PHA, fitomaglutinina; e Con a, concanavalina A.

3.3. Citotóxicos Efeito da AgC no Linfóides e Leucemia de Células de Câncer de Linhas

Nossos resultados confirmaram o antiproliferativa e citotóxicos propriedades do AgC em leucêmica (Molt-4 e K562) e linfoma de célula de linhas (Ramos e L5178Y) em uma maneira dose dependente (1.75 17,5 ng/mL) () (Figura 6).

Figura 6

a viabilidade Celular de linhas de células de câncer tratados com prata coloidal e mitogens. As linhas celulares K562, Molt-4, Ramos e L5178Y de câncer (5 × 103 células/alvéolo) foram tratadas com várias doses de AgC e incubadas por 5 h a 37°C e 5% de atmosfera de CO2. A viabilidade celular foi analisada pelo ensaio MTT. Os dados representam a média ± desvio-padrão de três experiências independentes. . AgC, prata coloidal.

3.4. A determinação da citoquina

para além do tratamento com AgC não afectou a produção () de IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-17A (0 pg/mL) ou TNF-α (5, 84 pg/mL), em comparação com o controlo não tratado. Contudo, o tratamento com EPL utilizado como controlo positivo induziu uma elevada produção de todas as citoquinas avaliadas (Quadro 1).

3.5. Phenotyping de Superfície Celular Marcadores

Nossos resultados demonstraram que a AgC tratamento não afetou a porcentagem de expressão de celular populações CD3+ (79.7%), CD3−CD19+ (10.2%), CD3+CD4+ (52.2%), CD3+CD8+ (33.9%), e CD16+CD56+ (7.6%), em comparação com o controle () (Tabela 2).

3.6. Peroxynitrites e Absorção de FITC-Dextran Determinações

A prata coloidal tratamento (99%) não afetam a viabilidade das células dendríticas (Figura 7(a)), ou os níveis de peroxynitrites avaliados (Figura 7(b)), mas aumentou a porcentagem de fagocitose (Figura 7(c)), em comparação com o controle ().

(a)

b)

(c)

(a)
(b)
(c)

Figura 7

a viabilidade Celular de macrófagos humanos, a fagocitose, e peroxynitrites de produção. Os macrófagos humanos (1 × 106 células) foram tratados com AgC e incubados durante 5 h a 37°C e 5% de atmosfera de CO2. a) a viabilidade celular foi analisada através do ensaio trypan blue. b) fagocitose de FITC-dextrano em macrófagos avaliada por citometria de fluxo. c) nitrato/nitrito determinado pela reacção de Griess (kit de ensaio colorimétrico nitrato/nitrito); o LPS foi utilizado como controlo positivo. Os dados representam a média ± desvio-padrão de três experiências independentes. . AgC, prata coloidal; FITC-dextrano, isotiocianato de fluoresceína-dextrano; e LPS, lipopolissacárido.

4. Discussão

sabe-se que vários agentes quimioterapêuticos utilizados no tratamento do cancro (ciclofosfamida, vinblastina, vincristina, bleomicina e cisplatinum) têm efeitos antiproliferativos e citotóxicos, mas em doses baixas podem estimular a resposta imunitária . O efeito sobre o sistema imunitário de qualquer substância deve ser testado porque qualquer dano neste sistema pode afectar a homeostase corporal. No presente estudo, a análise da prata coloidal sugere a presença de uma população heterogênea de nanopartículas e aglomerados formados por sais de prata, provavelmente originados de interações com proteínas contidas em meio de cultura completa. O efeito de agregação das partículas de prata em fluidos biológicos devido à presença de proteínas e lípidos tem sido relatado . Além disso, os nossos resultados mostraram que o AgC (17, 5 ng/mL) pode inibir a produção de IL-2 induzido por mitogénios. Assim, a imunossupressão induzida pela PBMC pode ser mediada pela inibição da libertação de IL-2. Imunossupressor atividade de algumas drogas como a ciclosporina e azatioprina tem sido corroborado pela inibição da proliferação de linfócitos e a produção de citocinas (INF-γ, IL-2, RANTES, TGF-β e TNF-α), quando os linfócitos são estimulados pela reagentes tais como o PHA, Con Uma, ou pokeweed agente mitogénico . O IL-2 é um factor de crescimento autocrínico das células T e a sua produção foi inibida selectivamente pelo tratamento com os imunossupressores tacrolimus (FK506) ou ácido micofenólico . Sabe-se que os imunossupressores (corticosteróides) são utilizados no tratamento de doenças malignas linfóides porque induzem apoptose de células linfóides malignas . Nós demonstramos o antiproliferativa e citotóxicos propriedades de AgC (155 nm) (doses variando de 1,75 para 17,5 ng/mL) em leucêmica e lymphomatous linhas de células, apesar de relatos anteriores que mencionou que partículas de prata na faixa de 10 a 100 nm de diâmetro são mais citotóxica de maior tamanho de partículas . É necessário conhecer o mecanismo de selectividade entre a PBMC e as células cancerígenas de origem mielóide e linfóide e estudos futuros devem ser desenvolvidos na área da apoptose mediada pelos receptores, tal como discutido por “Vega e de Maio, 2005 .”Por causa da resistência glucocorticóide no tratamento de linfomas, as células tumorais continuam suas expansões na presença de glucocorticóides . Por esta razão, o AgC poderia oferecer uma nova opção clínica a ser considerada, mas são necessários mais estudos relacionados. Por outro lado, nossos resultados indicam que a produção de citocinas e a porcentagem de marcadores de superfície expressa por T, B e células NK não são afetados em resposta a AgC (17.5 ng/mL), em frente a outros imunossupressores como a rapamicina ou soraphen, para que o immunosuppressor efeito é atribuído à interferência de uma via de sinalização e o metabolismo dos ácidos gordos . Além disso, existem provas de que as células do sistema imunitário podem ser activadas em resposta a biomateriais, embora não sejam esperadas vias sinalizadoras induzidas pelo MHC/peptídeo/TCR. No entanto, vias alternativas não cognatas podem levar à activação por glicoproteínas de ligação cruzada na superfície da membrana plasmática, tal como a proliferação linfocitária induzida pelo mitogénio . No que diz respeito aos peroxinitritos, a prata coloidal (17, 5 ng/mL) não induziu a sua produção, mas a actividade fagocitose aumentou provavelmente devido à absorção de prata coloidal de uma forma não específica. Outros autores têm descrito que nanopartículas de prata em um intervalo de 5, 10, 15 e 100 nm aumento das espécies reativas de oxigênio, afetando a função mitocondrial e que a fagocitose de partículas de prata bloqueia o ciclo celular na fase S e estimula inflamatória de sinalização através da geração de espécies reativas de oxigênio, seguido pela secreção de TNF-α, que diminuiu a viabilidade de células de fígado de ratos .

Em conclusão, o presente estudo demonstra a não toxicidade de prata coloidal sobre células do sistema imunológico e sua capacidade de interferir com a resposta imune, diminuindo a proliferação celular quando estimulados com mitogens, sugerindo que a prata coloidal pode ser considerado como um agente imunossupressor, mas mais estudos devem ser realizados para estabelecer a sua eficácia e mecanismo de ação.

interesses concorrentes

os autores declaram que não há conflito de interesses relativamente à publicação deste artigo.

Agradecimentos

Este estudo é apoiado pelo Laboratório de Imunologia e Virologia, Faculdade de Ciências Biológicas, Universidade Autônoma de Nuevo León, San Nicolás de los Garza, NL, no México, em colaboração com a “Red Temática de Inmunología pt Cáncer y Enfermedades Infecciosas” com a Registrar nenhum. 253053, CONACYT.