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Golgi coloração técnica, também chamada blackreaction após a mancha de cor, foi desenvolvido na década de 1870 and1880s na Itália para fazer as células do cérebro (neurônios) visível sob themicroscope. Camillo Golgi desenvolveu a técnica enquanto trabalhava com tecido não-observável, o que exigiu que Golgi examinasse a estrutura celular sob o microscópio.Golgi melhorou os métodos existentes de coloração, permitindo aos cientistas visualizar neurônios inteiros pela primeira vez e alterando a forma como as pessoas discutiram o desenvolvimento e a composição das células do cérebro. No século vinte-fist, stainingmethod de Golgi continuou a informar a pesquisa sobre o sistema nervoso,particularmente no que diz respeito ao desenvolvimento embrionário.

Golgi começou a publicar pesquisas sobre o sistema nervoso e seus cellularstructure entre 1870 e 1872, enquanto trabalhava no laboratório de Giulio Bizzozero no Instituto Geral de Pathologyat Universidade de Pavia, em Pavia, Itália. Golgi becamechief doctor at the Pio Luogo degli Incurabili (Hospital for theChronically Sick) in Abbiategrasso, Italy. Construiu um laboratório na cozinha do hospital, onde desenvolveu uma nova técnica para deter tecidos neurais. O método de coloração de seu tecido orgânico com Carmim vermelha ou blackhematoxilina e expondo-o a um reagente, como dicromato de potássio ou ácido crômico, que endureceu os neurônios individuais. Os cientistas isolam células individuais separando – as sob um microscópio com agulhas. Como os neurônios têm uma forma diferente das outras células do corpo, os cientistas frequentemente quebram as projeções fora do Invólucro quando tentam separá-los. Essas projeções incluem dendritos que recebem impulsos neurais e os retransmitem para o corpo celular, e o axon longo do outro lado do corpo celular que retransmite esses impulsos. As primeiras tentativas de Golgi de melhorar a coloração envolveram a infusão de células com vários metais para ver neurônios inteiros e outros tipos de tecidos com maior detalhe. Depois de experimentar expor células a ouro e mercúrio, Golgi usou nitrato de prata. A mancha de nitrato de prata habilitou-o a ver os neurónios na sua totalidade, tornando-os negros novamente com um fundo amarelo pálido. A cor preta dos neurônios manchados ledhim para nomear sua técnica la reazione nera (a ação Negra). O processo de coloração tingiu cinco a dez por cento da amostra de cavilha, permitindo que Golgi visse estruturas celulares individuais em meio a massas de tecido nervoso.

os mecanismos da técnica de coloração de Golgi eram semelhantes aos de seus contemporâneos. Primeiro,para endurecer o tecido neural mole, Golgi submersiu amostras por até quarenta e cinco dias em uma solução de dicromato 2,5 por cento. Em seguida, ele encharcou as amostras em 0.5 a 1% de solução de nitrato de prata para diferentes quantidades de timeto tingir algumas das células pretas. Golgi desidratou então as amostras com álcool e cortou-as a intervalos de 100 micron, o equivalente à espessura de um pedaço de papel, largo o suficiente para manter um neuronintact. Golgi lavou então o tecido em terebintina e colocou-o numa lâmina com goma clara damar para o preservar. Nessa altura, viu uma amostra ao microscópio.

Golgi, publicou os resultados de seu procedimento de coloração em uma 1873paper intitulado “Sulla Struttura della Sostanza Grigia del Cervello”(Sobre a Estrutura da Cinza do Cérebro Importa). Na Alemanha, Franz Bollpublished notes of Golgi’s work in German journals, which spreadnews of Golgi’s work. Golgi continuou a usar sua técnica de coloração para examinar tecidos neurais, e mais tarde acumulou sua descoberta inSulla Fina Anatomia degli Organi Centrali del Sistema Nervoso(sobre a anatomia fina dos órgãos centrais do sistema nervoso)publicado em 1885. Naquele ano, Eugen Bleuler, um psiquiatra na Suíça, usou o método de coloração de Golgi e apresentou espécimes do córtex cerebral de Rabbit para a Sociedade Médica de Zurique.

In the 1880s, Albert von Kölliker,a physiologist in Switzerland, studied the development of the brain, neuro-sensory pathways, and internal organ development in mammals using the Golgi stainingtechnique. Ele aprendeu a técnica, sob a instrução de Golgiin 1887, publicou “Ueber de Golgi é Untersuchungen, den FeinerenBau des Centralen Nervensystems Betreffend” (Cerca de Golgi é StudiesConcerning mais Fina Estrutura do Sistema Nervoso Central) laterthat ano. Kölliker elogiou a técnica de coloração de Golgi, levando morescientistas a adotá-la. Em 1887, Santiago Ramón y Cajal, na Espanha, alterou a técnica introduzindo nitrato de prata no tecido em dois carvalhos mais curtos,em vez de um longo impregnado. Essa alteração melhorou a cor e a unha da mancha. Pesquisadores como Golgi e Ramón y Cajal utilizaram resultados de tais estudos de coloração para ajudar a desenvolver a neurondoctrina, que afirmou que os neurônios eram células individuais que transferiam impulsos elétricos uns para os outros. Essa teoria traduzia teorias da estrutura e da funcionalidade do sistema nervoso. Os cientistas confirmaram a teoria usando a técnica de coloração de Golgi para mostrar as lacunas, ou sinapses, entre neurônios. Golgi e Ramón y Cajal dividiram o prêmio theNobel em Fisiologia ou Medicina em 1906.

In 1917, Pío del Río Hortega further adapted Golgi’s method byfixing tissues with formalin, chloral hydrate, andpotassium chromate, which decreased the time necessary to complete the staining. No século XXI, pesquisadores usaram o método de delRío Hortega para tingir células cerebrais não neuronais como neurogliaand células do cerebelo. Depois de uma pausa na popularidade entre as guerras mundiais, a técnica de coloração de Golgi recuperou popularidade na década de 1930 com a introdução do microscópio eletrônico.Os cientistas usaram a técnica de coloração de Golgi para explicar melhor a formação de neurônios, o cérebro e vias sensoriais. Golgistaining também ajudou os cientistas classificam organelas dentro de células,incluindo células musculares organelas que armazene e transporte de cálcio,chamado de retículo sarcoplasmático, e a proteína-modifyingorganelles em células chamadas o aparelho de Golgi. A técnica de coloração de Golgi permaneceu um método primário de coloração no século XXI.

Fontes

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