O tipo de variantes no COL3A1 de genes associados com o fenótipo e a gravidade dos vascular de Ehlers–Danlos, síndrome de
Nós aqui descrever a maior série de pacientes Europeus com molecularmente comprovada vEDS sistematicamente examinado o francês Centro de referência para esta rara doença hereditária. Nossos achados confirmam a gravidade da doença, indivíduos positivos tendo experimentado uma primeira complicação vascular, digestiva ou obstétrica major na Idade Média de 29 anos. Mostramos que o gênero não influencia o prognóstico. Mais importante, identificamos subgrupos de pacientes que têm um início posterior da doença e um melhor prognóstico, e especialmente sem eventos digestivos. Os cinco subgrupos de variantes também têm diferenças em alguns critérios maiores e menores, acrogeria, aparência facial Característica, pele fina translúcida e hematomas extensos são marcas de uma doença grave. Finalmente, mostramos que para as variantes de missense que afetam um resíduo de glicina, a distribuição de aminoácidos mutados é fortemente tendenciosa para resíduos com o efeito desestabilizador mais forte sobre o conjunto de colágeno.
a ocorrência de acontecimentos clínicos, a sua frequência e distribuição de acordo com a idade foram comparáveis aos coortes disponíveis publicados em 2000 e 2014.2, 9 globalmente, 17% dos pacientes com vEDS apresentaram uma primeira complicação aos 20 anos de idade, e 71% apresentaram pelo menos uma complicação importante aos 40 anos de idade. Não observamos um efeito significativo de gênero, ao contrário da recente análise de sobrevivência feita pelo grupo de Byers.13 no entanto, a nossa coorte difere da coorte dos EUA 2, 13 em vários aspectos devido a diferentes modalidades de recrutamento e monitorização clínica: os pacientes index e seus parentes descritos aqui eram aproximadamente 5 anos mais velhos no momento do diagnóstico, e o número de casos sem sintomas no encaminhamento foi apenas 11% neste coorte versus 39% no coorte dos EUA. Esta diferença importante tem múltiplas explicações: pacientes mais velhos em nossa coorte, possível viés de encaminhamento para assuntos mais graves, aumentando a consciência da doença, e melhores modalidades de imagiologia e acessibilidade dos testes genéticos. Nós não analisar intra-familiar heterogeneidade fenotípica ou a penetrância neste estudo, porque optamos por limitar o número de pacientes por família a três, a fim de evitar familiar fenotípica viés. No entanto, a avaliação sistemática prospectiva de indivíduos com a mesma variante actualmente realizada no nosso centro pode dar mais informações num futuro próximo.Curiosamente, descobrimos que alguns grupos de pacientes são mais propensos a complicações específicas. Em primeiro lugar, todos os doentes com rupturas digestivas pertenciam quer ao grupo 1 (n=44, 36% dos doentes do grupo 1) quer ao grupo 2 (n=19, 34%). Os pacientes pertencentes a três outros grupos de variantes não tinha digestivo evento em que a idade média de 45 anos, considerando todos os cólon rupturas nos grupos 1 e 2 foram observadas no início da idade adulta (mediana de 23 anos, o intervalo 19-34). Vale ressaltar que não observamos agregação familiar para eventos digestivos. Segundo, como apresentado recentemente pelo Shalhub et al,9 aórtica complicações (aneurismas, dissecções e rupturas) parecem ser mais prevalentes em pacientes com haplo-insuficiência (4/8, 50% de índice de casos), quando comparado com substituição de glicina (19/79, de 19%) ou splice-site variante (6/45, 13%) pacientes global (P=0,02).
a triagem genética do gene COL3A1 mostrou a maioria das variantes de missense envolvendo um resíduo de glicina (54% dos casos de índice), seguido de variantes do local de splice (31%), de acordo com relatórios anteriores e com o banco de dados variante da síndrome de Ehlers-Danlos (https://eds.gene.le.ac.uk/home.php?select_db=COL3A1). Os resíduos de glicina afectados espalharam-se de exons 6 para 47, as cadeias de codificação da região do domínio tripla hélice do procollagen tipo III. Como esperado, quase todas estas variantes eram privadas, sendo apenas 5 das 71 substituições de glicina recorrentes. Se a localização do resíduo de glicina mutado pode estar associada ao fenótipo foi o foco de estudos anteriores. Pela análise de um conjunto limitado de 14 substituições de glicina diferentes, Pope et al1 encontrou um fenótipo anormal crescente quando a variante mudou de exon 36 para exon 49. Não pudemos confirmar esta tendência nesta maior coorte de indivíduos afetados (dados não mostrados), consistentemente com os achados observados na coorte ainda maior dos EUA.2, 13
também encontramos um forte viés de distribuição das substituições de glicina, consistentemente com relatórios anteriores sugerindo que para o gene COL3A1 as variantes mais desestabilizadoras estão sobre-representadas em comparação com os resíduos menos desestabilizadores.12 de Fato, em nossa série, 73% (58/79) dos resíduos mutados no índice de casos foram Val, Glu ou Asp, muito mais freqüente do que Ala e Serviços (18/79, 23%), proporções que divergem significativamente do que o esperado dos resultados possíveis de um único par de base a substituição de uma glicina codão (P<0,001 para os dois subgrupos). Este viés de seleção que também foi observado recentemente por Pepin et al13 não pode ser explicado pelo viés de taxa de transição/transversão nas sequências de codificação humana e está positivamente correlacionado com o efeito desestabilizador de Tripla hélice das variantes correspondentes.14 a estrutura tríplice helicoidal do colagénio é, de facto, perturbada mais profundamente quando o Gly é substituído por um aminoácido carregado grande, como o Asp, do que por um resíduo menor, como o Ala. Um estudo in vitro recente testou o efeito de dois tipos de variantes do missense (Gly-to-Val e Gly-to-Ala) na dobragem do colagénio tipo III utilizando um sistema bacteriano para a produção de polipéptidos modelo homotrimérico.15 o efeito da variante Gly-to-Val foi mais forte em comparação com a variante Gly-to-Ala, sugerindo que algumas variantes Ala podem não ser graves o suficiente para causar vEDS.
a distribuição de variantes de splice-site foi caracterizada por uma sobre-representação de variantes no local doador 5′ (30 das 36 variantes distintas), como já observado.13, 16 dezoito das 36 variantes distintas já foram mostradas para levar a exon saltando ou para a ativação críptica do local e para a diminuição da secreção de trimers procolagênicos.16, 17 apesar de não haver nenhuma variante de hotspot em nossa coorte, algumas substituições recorrentes estavam presentes, especialmente a variante de splice-site no intron 23, C.1662+1G> A, que é também a variante mais frequente no site de splice registrada na Base de dados de variantes da síndrome de Ehlers-Danlos. Na nossa série, os doentes com variantes do local da articulação tiveram uma idade mais precoce no diagnóstico do que os doentes com substituições de glicina (25 versus 34 anos, P=0, 0002) e uma prevalência elevada comparável de acontecimentos clínicos, de critérios diagnósticos principais e menores. Quase todas estas variantes estão em fase e levam a um produto eliminado de 54-108 resíduos que podem agir de forma dominante-negativa, desestabilizando fortemente a montagem de colágeno. Tanto quanto sabemos, não foi investigado em estudos bioquímicos se este efeito deletério é mais importante do que o causado pelas substituições de glicina.
um dos principais achados do nosso estudo foi a identificação de variantes de missense ainda não reportadas (grupos 4 e 5) que foram associadas com características clínicas leves de vEDS e fragilidade arterial. Além de ser evidenciado em pacientes com características sugestivas da patologia, também encontramos argumentos para sua possível patogenia, que são apresentados nos materiais complementares (resultados e métodos suplementares, tabelas suplementares S4c–e). O importante é que as variantes nas partes terminais N E C da proteína e as variantes missense na tripla hélice permitiram identificar um subgrupo de pacientes representando 10% da nossa coorte. Estes doentes apresentaram um fenótipo clínico mais suave com, por vezes, apenas um critério clínico principal e/ou um critério clínico menor. No entanto, apesar deste ligeiro curso clínico, a ausência de complicações digestivas e a presença de algumas destas variantes em bases de dados da população com muito baixa frequência, os nossos achados sugerem que estes pacientes estão em maior risco de eventos arteriais e devem ser considerados e seguidos como tal. A heterogeneidade na expressão fenotípica em vEDS tem sido sugerido anteriormente, variando de variável fenótipos clínicos para não-glicina missense variantes localizado no C-terminal de domínio para sobreposição com hypermobile EDS para não-glicina variantes localizado em tripla hélice do domínio do colágeno tipo III.1,18 quanto aos pacientes com síndrome de Marfan que permaneceram não diagnosticados quando encenados pela nosologia de Ghent antes de sua última revisão 19, pode ser necessário ampliar as indicações para testes genéticos em vEDS. Por exemplo, pacientes com apenas um critério maior e uma história familiar de morte súbita, ou os doentes com um dos principais eventos vasculares, antes da idade de 50 anos, mesmo na ausência de sinais clínicos sugestivos (como evidenciado pela ausência de sinais clínicos da doença, os familiares versus o índice de casos da coorte estudada (Tabela 1)),20 de maio de ser discutido como candidatos para COL3A1 rastreio genético, uma vez que algumas causas comuns de doença cardiovascular têm sido descartada. Como demonstrámos especificamente no grupo 3, a ausência de acontecimentos digestivos associados a uma elevada prevalência de complicações aórticas pode imitar o aneurisma aórtico familiar e a dissecção (FFA, OMIM #%607086 para informações gerais). É importante suspeitar de vEDS também nestes pacientes, uma vez que as decisões terapêuticas são diferentes das De outros aneurismas e dissecções hereditárias da aorta torácica. Os progressos recentes na tecnologia de sequenciamento devem facilitar este rastreio genético mais amplo, embora algumas variantes necessitem de estudos bioquímicos para estabelecer o seu papel causal na alteração de colagénio tipo III da montagem e/ou produção.
