Actividades de limpeza radical gratuita de Cnidium officinale Makino e Ligusticum chuanxiong Hort. methanolic extrai | Jiotower
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Vários eventos patológicos, tais como o processo de inflamação, doença arterial coronariana, e o envelhecimento fenômenos, estão associados com a geração de ROS. Assim, neste estudo, demonstrámos que os extractos de C. officinale e L. chuanxiong também possuem propriedades antioxidantes, uma vez que foram capazes de proteger as células de danos oxidativos e também inibir a geração de ROS.
para o doseamento de TEAC, o quadro 1 mostra a capacidade antirradical de C. officinale e L. chuanxiong num sistema aquoso, medida através da determinação dos radicais ABTS. O ensaio ABTS foi utilizado para medir a actividade antioxidante total em materiais vegetais. Como usado por Rice-Evans e Miller, TEAC reflete a capacidade relativa do hidrogênio ou antioxidantes doadores de elétrons para raspar o catião radical ABTS em comparação com o de Trolox. Neste estudo, C. officinale e L. chuanxiong na faixa de 0-150 µg/ml exibido atividade antiradicalar, e a atividade antiradicalar destas amostras aumentou com o aumento da concentração dos extratos, indicando que a C. officinale L. chuanxiong mostrou a eliminação de atividade dos radicais livres. Como pode ser visto na Tabela 1, a habilidade necrófaga de C. officinale e L. chuanxiong em catião radical ABTS foi comparada com a do ácido ascórbico. Além disso, C. officinale mostrou um efeito de varrimento marcado nos radicais catiónicos do ABTS em comparação com o do ácido ascórbico padrão, determinado através de TEAC.
Table 1
Antioxidant activities of methanol extracts of C. officinale and L. chuanxiong
TEAC (mM TE/g) | ORAC (mM TE/g) | DPPH (mM TE/g) | |
---|---|---|---|
CO | 2.022 ± 0.538 | 0.484 ± 0.162 | 2.942 ± 0.495 |
LC | 1.249 ± 0.224 | 0.260 ± 0.015 | 4.658 ± 1.183 |
AAa | 0.828 ± 0.010 | 0.030 ± 0.018 | 1.332 ± 0.027 |
os Valores são médias ± DP de três medições. CO: C. leão, LC: L. chuanxiong, AA: ácido Ascórbico, TEAC: Trolox equivalente capacidade antioxidante, ORAC: Oxygen radical absorbance capacity, DPPH: 1,1-difenil-2-picrylhydrazyl
além disso, a Tabela 1 mostra a ORAC de amostras. A proteína altamente fluorescente, beta-phycoerythrin (PE), derivada de numerosas espécies de algas vermelhas, tem sido usada como alvo de danos radicais livres. Peroxyl radicais gerados pela decomposição térmica do AAPH saciar a fluorescência de ficoeritrina, enquanto que a adição de um antioxidante que reage rapidamente com peroxyl radicais inibe a perda de intensidade de fluorescência e esta inibição é proporcional à atividade antioxidante. Os resultados finais podem ser calculados usando as diferenças nas áreas sob as curvas de decaimento de phycoerythrina entre o branco e uma amostra e são expressos em equivalentes Trolox. Neste estudo, os resultados mostraram que C. officinale e L. chuanxiong exibem capacidade antioxidante com um perfil semelhante. Além disso, o ensaio ORAC demonstrou uma clara melhoria do teor de antioxidantes no extracto de C. officinale em comparação com o ácido ascórbico, como padrão.
o modelo de radical DPPH estável é um método amplamente utilizado, relativamente rápido para a avaliação da atividade de remoção de radicais livres. Pensa-se que o efeito dos antioxidantes vegetais na remoção de radicais da DPPH se deve à sua capacidade de doar hidrogénio. A diminuição na absorvância do radical DPPH causada por antioxidantes devido à reação entre moléculas antioxidantes e radicais, progride, o que resulta na remoção do radical pela doação de hidrogênio. O quadro 1 ilustra uma diminuição significativa na concentração de radicais DPPH, devido à capacidade de recuperação dos extratos e padrões de C. officinale e L. chuanxiong. A actividade de remoção de radicais livres também aumentou com o aumento da concentração. Estes resultados indicaram que ambos os extratos têm um efeito perceptível na remoção de radicais livres. O extracto de metanol de L. chuanxiong mostrou uma atividade de varrimento de DPPH mais forte do que o extrato de metanol de C. officinale quando comparado com o padrão. Usámos ácido ascórbico como padrão.
além disso, a capacidade de eliminar radicais específicos pode ser alvo. Uma vez que diferentes MDE têm mecanismos de reacção diferentes, para determinar completamente a actividade antioxidante contra uma vasta gama de MDE, é necessário realizar um conjunto mais abrangente de ensaios. O radical do ânion superóxido (O2·–) é um fator importante nos sistemas biológicos. A fim de determinar se a inibição da redução de NBT se devia à actividade de necrófago de superóxido, foi utilizado um sistema não enzimático de geração de superóxido. In the PMS-NADH-NBT system, superoxide anion, derived from dissolved oxygen from the coupling reaction of PMS-NADH, reduces NBT. A diminuição da absorvância a 560 nm com antioxidantes indica o consumo de anião superóxido na mistura de reacção. A tabela 2 mostra a inibição percentual da geração do radical superóxido em 0-150 µg/ml de extractos de C. officinale e de L. chuanxiong metanol, em comparação com a demonstrada pelo ácido ascórbico. C. officinale e extractos de metanol de L. chuanxiong mostraram uma inibição dose-dependente dos radicais superóxido. Ambos os extractos de C. officinale e L. chuanxiong têm uma forte actividade de remoção de radicais superóxido (IC50 = 96,30 e 93,85 µg/ml). Tendo em conta os resultados obtidos, pode prever-se que os extractos de metanol de C. officinale e L. chuanxiong tenham actividade antioxidante, aqui evidenciada pela remoção do radical superóxido. Os valores de CI50 de todos estes extractos foram superiores aos do ácido ascórbico em que a CI50 foi atingida com uma concentração de 8, 76 µg.
Tabela 2
eliminação de radicais Livres e de metal quelante de atividades (IC50 µg/ml de metanol extratos de C. officinale L. chuanxiong
O2· | H2O2 | OH· | NÃO· | quelante de Metal | |
---|---|---|---|---|---|
CO | 96.259 ± 8.024 | 136.280 ± 2.307 | 119.442 ± 7.444 | 57.252 ± 8.973 | 138.425 ± 13.292 |
LC | 93.848 ± 9.529 | 136.318 ± 2.626 | 113.107 ± 8.890 | 76.502 ± 3.033a* | 17.451 ± 5.858a* |
AAb | 8.762 ± 4.569 | 8.053 ± 3.677 | 3.034 ± 0.191 | 9.885 ± 0.478 | 43.235 ± 8.543 |
Values are means ± SD of three measurements. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: Ascorbic acid, O2·–: superoxide radical, H2O2: hydrogen peroxide, OH·: hydroxyl radical, NO·: nitric oxide radical
a remoção de H2O2 por ambos os extratos pode ser atribuída a suas fenólicas, que podem doar elétrons para H2O2, neutralizando-o assim para a água. As capacidades de extração de H2O2 entre os dois extratos podem ser atribuídas a suas habilidades de doação de elétrons. A capacidade de ambos os extratos para coletar efetivamente H2O2 é mostrada na Tabela 2, na qual é comparada com a do ácido ascórbico como padrão. Os extratos eram capazes de escavar H2O2 de uma forma dependente da concentração. C. officinale e L. os extractos de chuanxiong (0-150 µg/ml) exibiram CI50 de 136, 28 e 136, 32 µg/ml, respectivamente, enquanto o ácido ascórbico mostrou 8, 05 µg/ml. A correlação entre os valores de C. officinale e L. chuanxiong não foi estatisticamente significativa. Embora o próprio H2O2 não seja muito reativo, às vezes pode causar citotoxicidade dando origem a Radicais hidroxilo na célula. Assim, a remoção de H2O2 é muito importante em todos os sistemas alimentares.
the C. officinale and L. os extractos de metanol de chuanxiong foram também avaliados quanto à sua capacidade de eliminar radicais hidroxilo utilizando o ensaio de degradação da desoxirribose. Neste estudo, os resultados mostraram que todas as amostras foram capazes de inibir a degradação da desoxirribose (0-150 µg/ml), com um perfil semelhante. Os estudos bioquímicos revelaram que C. officinale e L. chuanxiong causaram uma inibição da degradação da desoxirribose dependente da concentração. No nível de valor IC50, C. officinale (119,44 µg/ml) e L. chuanxiong (113.11 µg/ml) apresentavam a mesma potência . As capacidades totais de remoção de radicais OH de cada extracto foram comparadas com as do ácido ascórbico.Os extractos vegetais foram medidos e comparados pelas suas actividades de eliminação radical livre contra os radicais do óxido nítrico. A actividade de recolha de extractos de metanol de C. officinale e L. chuanxiong foi examinada utilizando o SNP como um dador NO·. Nenhum libertado do SNP reage com oxigénio para produzir nitrito. Nenhum necrófago compete com o oxigênio em reagir com o· libertado da solução SNP em PBS. Neste estudo, extratos de C. officinale e L. chuanxiong não mostrou capacidade de varrimento· embora algumas diferenças foram notadas. Não * actividade de limpeza de C. officinale foi mais significativa do que L. chuanxiong. Esta inibição pode também ser um resultado de raspagem directa de NO· por extractos. C. officinale teve a maior atividade para apagar nenhum radical. Os valores IC50 foram 57, 25 e 76, 50 µg / ml para C. officinale e L. chuanxiong, respectivamente.
a quelação dos iões ferrosos por extractos de C. officinale e L. chuanxiong foi estimada, na qual a ferrozina forma quantitativamente complexos com Fe2+. Na presença de agentes quelantes, a formação deste complexo é interrompida, impedindo assim a formação da cor vermelha transmitida pelo complexo também. A medição desta mudança de cor permite, portanto, estimar a actividade quelante do quelante co-existente. Neste ensaio, tanto os extractos como o composto antioxidante padrão interferiram na formação do complexo ferroso–ferrozina, sugerindo que têm actividade quelante, capturando o ião ferroso antes de poder formar um complexo com ferrozina. Tal como demonstrado no quadro 2, a formação do complexo Fe2+–ferrozina não está completa na presença dos extratos de C. officinale e L. chuanxiong metanol, indicando que ambos os extratos quelatam o ferro. A absorvância do complexo Fe2+ -ferrozina diminuiu linearmente de forma dependente da dose (0-150 µg/ml). A diferença entre ambos os extratos de C. officinale e L. chuanxiong, e o controle foi estatisticamente significante. As capacidades quelatantes de Metais dos extratos de metanol de C. officinale e L. chuanxiong, e ácido ascórbico (todos em IC50 µg/ml) foram 138.43, 17.45 e 43.24, respectivamente, que se revelou uma diferença significativa entre os extractos e os controlos.
Para determinar os efeitos da C. officinale L. chuanxiong sobre a viabilidade celular, a N2a células foram expostas a C. officinale L. chuanxiong (50-500 µg/ml) para um tempo de incubação de 1 h. Na Figura 1, o teste de MTT, após 1 h de incubação com C. officinale não indica qualquer significativas viabilidade diferença em tratados N2a culturas de células, em comparação com o controle. Através do ensaio MTT após 1 h com L. chuanxiong, observou-se um aumento significativo da viabilidade em L. chuanxiong 500 µg / ml de células N2 a tratadas em comparação com o controlo. Tal como indicado na Figura 2, não foi efectuada qualquer determinação após 1 h de incubação na presença de C. officinale e L. chuanxiong (50-500 µg/ml). O tratamento com L. chuanxiong não diminuiu significativamente a libertação de NO quando comparado com o controlo, mas 500 µg/ml C. officinale diminuiu significativamente a libertação de NO. Deste resultado, pode concluir-se que os extractos metanólicos de C. officinale e L. chuanxiong, nas doses utilizadas, não têm efeitos tóxicos.
efeito dos extratos metanólicos de C. officinale e L. chuanxiong na viabilidade celular das células N2 A. Os valores são médias ± DP de três medições. *P < 0.05 em comparação com os não tratados normal (ANOVA/Tukey,)
efeito de C. officinale e L. extractos metanólicos de chuanxiong sobre a libertação de óxido nítrico nas células N2a. Os valores são médias ± DP de três medições. * P < 0, 05 em comparação com o normal não tratado. (ANOVA / Tukey)