Efeito do tratamento prolongado com azitromicina, claritromicina ou levofloxacina na clamídia pneumoniae num modelo de infecção contínua | Jiotower
discussão
métodos actualmente utilizados para a cultura C. pneumoniae e em estudos de susceptibilidade in vitro não são análogos à infecção tal como ocorre in vivo. Estabelecemos um modelo in vitro de infecção por C. pneumoniae contínua com células HEp – 2 que permaneceram persistentemente infectadas durante mais de 4 anos sem adição de clamídia fresca ou células hospedeiras, adição de cicloeximida ou centrifugação (23). Os estudos Ultra-estruturais das células continuamente infectadas revelaram a presença de uma subpopulação de inclusões anormais, que foram muito semelhantes, no aspecto, às formas persistentes induzidas após o tratamento com interferão gama (22). Por conseguinte, este modelo pode reflectir com maior precisão as interacções entre a clamídia e as células hospedeiras e, por conseguinte, ser um modelo melhor para os estudos de susceptibilidade in vitro de C. pneumoniae.
os resultados deste estudo demonstraram que o tratamento prolongado com azitromicina, claritromicina e levofloxacina em concentrações atingidas no líquido de revestimento epitelial diminuiu, mas não eliminou C. pneumoniae das células hospedeiras continuamente infectadas.Galasso e Manire (7) foram os primeiros pesquisadores a empregar um modelo de infecção contínua para testes de atividade antibiótica. Eles utilizaram células HeLa continuamente infectadas com clamídia psittaci para determinar o efeito da penicilina, tetraciclina e cloranfenicol. Eles descobriram que 500 U de penicilina / ml suprimiu o crescimento clamidioso, mas mesmo o tratamento prolongado por 100 dias não conseguiu eliminar o organismo. Foram necessários mais de 14 dias de tratamento com 10 µg de tetraciclina/ml ou 21 dias com 25 e 100 µg de cloranfenicol/ml para suprimir o crescimento clamidioso para níveis não detectáveis. Dreses-Werringloer et al. (6) recentemente relataram observações semelhantes sobre o efeito da ciprofloxacina e ofloxacina no establecido (2 a 3 dias pós -inoculação) C. infecção por trachomatis. Eles descobriram que ambos os fármacos, em concentrações que excedem a mínima bactericida (concentração de 0,5 µg de ciprofloxacina/ml, 1.0 e 2.0 mg de ofloxacina/ml), não conseguiu erradicar a C. trachomatis infectadas células HEp-2 e também induzida por infecção persistente, caracterizada por um baixo número de pequenas aberrantes inclusões presentes através de 20 dias de cultura. Após a remoção da ciprofloxacina dos meios 10 ou 14 dias após a infecção, a clamídia persistente reverteu para crescimento overt.
os resultados deste estudo levantam algumas questões importantes relativas à utilização de antibióticos, incluindo Azitromicina, para prevenção secundária da morbilidade cardíaca (1, 10, 13). As doses de azitromicina utilizadas são de 500 ou 600 mg / dia durante 3 e 6 dias, seguidas de doses semanais de 500 a 600 mg durante períodos de 3 meses a 1 ano. Com base nos dados aqui apresentados, parece improvável que estes regimes posológicos eliminassem C. pneumoniae de um foco intravascular. A dose respiratória padrão de 1.5 g de azitromicina durante 5 dias tiveram apenas 70 e 83% de eficácia na erradicação de C. pneumoniae da nasofaringe de adultos e crianças culturalmente positivas, respectivamente, com pneumonia adquirida na comunidade (28). Os dados são semelhantes para outros antibióticos. Block et al. (3) verificou-se que um tratamento de 10 dias com a suspensão eritromicina ou claritromicina erradicou C. pneumoniae da nasofaringe de 86 e 79% das crianças culturalmente positivas com pneumonia adquirida na comunidade, respectivamente, apesar do facto de a claritromicina ter sido quatro vezes mais activa in vitro (15). Os resultados de dois estudos de tratamento com pneumonia em adultos, que avaliaram a levofloxacina e a moxifloxacina, revelaram taxas de erradicação de 70 a 80% (16, 17). Dessus-Babus et al. recentemente descreveu a indução de resistência à ofloxacina e à esparfloxacina em Chlamydia trachomatis após a passagem em série do organismo em concentrações sub-inibitórias destes fármacos (5). A resistência aos antibióticos ainda não foi descrita para C. pneumoniae. No entanto, os microfones de três isolados de C. o pneumoniae, obtido de dois doentes com pneumonia adquirida na comunidade tratados com azitromicina, aumentou quatro vezes após o tratamento, embora ainda estivessem dentro do intervalo considerado susceptível ao fármaco (28). Não é claro se foi um evento isolado ou sugestivo de um possível desenvolvimento de persistência. Além disso, a administração de uma vez por semana com azitromicina pode resultar numa exposição prolongada a níveis de medicamentos subinibitórios, conduzindo ao desenvolvimento de resistência noutras bactérias respiratórias, especialmente Streptococcus pneumoniae (24, 26).
a existência de persistência também levanta uma questão importante separada para o tratamento de doenças associadas a C. pneumoniae. As formas persistentes geralmente não se replicam ou têm actividade reduzida e, portanto, podem não ser susceptíveis a antibióticos. É bem possível que a taxa de falhas Microbiológicas de 20 a 30% em estudos relatados de tratamento com C. pneumoniae (3, 16, 17, 18) e a capacidade de C. pneumoniae sobreviver ao tratamento antibiótico em nossos experimentos possam estar diretamente relacionadas ao estado persistente.
C. pneumoniae pode estimular a produção de citoquinas, quimioquinas e moléculas de adesão em várias linhas celulares endoteliais e epiteliais.(8, 9, 20, 25, 27). Estas moléculas imunologicamente ativas são capazes de induzir e sustentar um processo inflamatório que pode desempenhar um papel essencial na patogênese da aterosclerose (30). Os dados preliminares demonstraram uma maior produção de algumas citocinas no modelo de infecção contínua em comparação com culturas primárias (27). Neste estudo, C. pneumoniae estimulou a produção significativa de IL-6 e IL-8 nas células HEp-2 continuamente infectadas. Estas citoquinas foram detectadas em placas fibrosas sugestivas do seu envolvimento no desenvolvimento da aterosclerose (31).Foi demonstrado que os macrólidos e as tetraciclinas possuem propriedades anti-inflamatórias independentes da sua actividade antimicrobiana (19, 21, 32). Demonstrou-se que a azitromicina e a claritromicina em concentrações de 1, 5 e 10 µg/ml afectam em vários graus a produção de IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10, factor estimulante de colónias de granulócitos-macrófagos e TNF-α pelos monócitos Humanos (21). Mais notavelmente, a azitromicina resultou numa diminuição significativa da IL-1a e do TNF-α em 100% dos indivíduos e o tratamento com claritromicina resultou numa diminuição significativa da IL-6 e do TNF-α em 60 e 86% dos indivíduos, respectivamente. Do mesmo modo, observou-se redução nos níveis de 6-ceto-prostaglandina F1a, NO2, TNF-α, IL-1β e IL-6 nos macrófagos murinos tratados com 5 a 80 µM de azitromicina, claritromicina, Roxitromicina e eritromicina (19). Embora neste estudo o tratamento com os três antibióticos diminuição dos níveis de IL-6 e IL-8 na contínua de culturas, este efeito era para ser, principalmente, secundária a antichlamydial atividade, como os níveis de citocinas correlacionados com os títulos de C. pneumoniae.
