837. Kolon-riktad leverans av virala vektorer med hjälp av Virus-Microbead-konjugat för genterapi av inflammatorisk tarmsjukdom
under de senaste åren har vi utvecklat en ny genöverföringsteknik som möjliggör säker och effektiv leverans av rekombinanta virala vektorer till målställen för genterapiapplikationer. I denna teknik fästs virala partiklar stabilt på ytorna på mikropärlor och levereras sedan till målställen i form av virusmikrobeadkonjugat. Sådana konjugat kan infektera celler med effektivitet motsvarande eller till och med större än fria virala vektorer. I synnerhet kan transduktionen av målceller, som är dåligt tillåtna för infektion med fria virusvektorer, förbättras avsevärt, vilket ger de bifogade virusvektorerna bredare tropism. Denna genöverföringsteknik används för närvarande för att utveckla en genöverföringsstrategi för inflammatorisk tarmsjukdom (IBD). Genom att använda en adenoviral vektor som bär genen för en potent antiinflammatorisk faktor, interleukin-10 (IL-10), frågar vi om den adenovirala vektorn kan levereras till inflammerade lesioner i tjocktarmen vid intra-kolonial administrering av virus-mikrobeadkonjugat genom enema och om detta kan höja lokala IL-10-nivåer i tjocktarmen för förbättring av kolit. Vi har visat genom att använda muskolitmodeller att intra-kolonial administrering av adenovirala vektorer som bär musen IL-10-genen i form av virus-mikrobeadkonjugat gav förbättrad förbättring av kolit över samma adenovirala vektorer som administrerades i fri form. Denna större effektivitet för förbättring av kolit härrör främst från förbättrad transduktion av kolonvävnad och efterföljande högnivåproduktion av IL – 10 lokalt i inflammerad kolon. Vi har också initierat en studie för att testa om adenoassocierade virala vektorer (AAV) kan användas i form av virus-mikrobeadkonjugat för deras fokuserade leverans till inflammerade lesioner i tjocktarmen. Experiment med AAV som bär en markörgen antyder att användningen av virusmikrobeadkonjugat kan förbättra transduktionen av kolonvävnad av AAV i en muskolitmodell. Vi frågar nu om intra-kolonial administrering av AAV som bär musen IL-10-genen i form av virus-microbead-konjugat kan höja lokala IL-10-nivåer för förbättring av kolit genom effektiv transduktion av inflammerad kolon. Dessa resultat tyder på potentialen för denna genöverföringsteknik för att fungera som en effektiv genterapistrategi för IBD. En klar fördel med denna teknik över andra virusmedierade genöverföringsstrategier för terapi av IBD, inklusive de som involverar systemisk leverans av virala vektorer, är att leveransen av virala vektorer och efterföljande produktion av IL-10 (eller andra terapeutiska proteiner) är inriktad på inflammerade lesioner. Dessutom, eftersom alla virala partiklar är förankrade stabilt till mikrokulor, bör okontrollerad leverans av virala vektorer till och efterföljande transduktion av andra organ minimeras. Dessa egenskaper bör inte bara maximera den terapeutiska effektiviteten utan också förbättra säkerheten vid användning av virala vektorer.
