Fri radikal rensning aktiviteter Cnidium officinale Makino och Ligusticum chuanxiong Hort. metanoliska extrakt | Jiotower
resultat och diskussion
flera patologiska händelser, såsom inflammationsprocessen, kranskärlssjukdom och åldrande fenomen, är associerade med genereringen av ROS. Således visade vi i denna studie att extrakt av C. officinale och L. chuanxiong också har antioxidantegenskaper, eftersom de kunde skydda cellerna från oxidativ skada och också hämma genereringen av ROS.
för TEAC-analys visar tabell 1 den antiradiska kapaciteten hos C. officinale och L. chuanxiong i ett vattenhaltigt system, mätt genom att analysera Abts-radikalerna. ABTS-analysen har använts för att mäta den totala antioxidantaktiviteten i växtmaterial. Som används av Rice-Evans och Miller, TEAC återspeglar den relativa förmågan hos väte-eller elektrondonerande antioxidanter att rensa Abts-radikala katjonen jämfört med Trolox. I denna studie, C. officinale och L. chuanxiong i intervallet 0-150 occurg/ml visade antiradikal aktivitet, och den antiradikala aktiviteten hos dessa prover ökade med ökande koncentration av extrakten, vilket indikerar att C. officinale och L. chuanxiong visade rensande aktivitet av fria radikaler. Som framgår av Tabell 1 jämfördes rensningsförmågan hos C. officinale och L. chuanxiong på Abts-radikal katjon med askorbinsyra. Dessutom visade C. officinale markant rensande effekt på Abts katjonradikaler jämfört med standarden, askorbinsyra, bestämd genom TEAC.
Table 1
Antioxidant activities of methanol extracts of C. officinale and L. chuanxiong
TEAC (mM TE/g) | ORAC (mM TE/g) | DPPH (mM TE/g) | |
---|---|---|---|
CO | 2.022 ± 0.538 | 0.484 ± 0.162 | 2.942 ± 0.495 |
LC | 1.249 ± 0.224 | 0.260 ± 0.015 | 4.658 ± 1.183 |
AAa | 0.828 ± 0.010 | 0.030 ± 0.018 | 1.332 ± 0.027 |
värdena är medel för tre mätningar. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: askorbinsyra, TEAC: Trolox ekvivalent antioxidantkapacitet, ORAC: syre radikal absorptionskapacitet, DPPH: 1,1-difenyl-2-picrylhydrazyl
Tabell 1 visar också ORAC av prover. Det mycket fluorescerande proteinet, beta-phycoerythrin (PE), härrörande från många arter av röda alger, har använts som mål för skador på fria radikaler. Peroxylradikaler som genereras genom termisk sönderdelning av AAPH släcker fluorescensen av phycoerythrin, medan tillsats av en antioxidant som reagerar snabbt med peroxylradikaler hämmar förlusten av fluorescensintensitet och denna hämning är proportionell mot antioxidantaktiviteten. Slutliga resultat kan beräknas med hjälp av skillnaderna i områden under phycoerythrin sönderfallskurvor mellan ämnet och ett prov och uttrycks i Troloxekvivalenter. I denna studie visade resultaten att C. officinale och L. chuanxiong uppvisar antioxidantkapacitet med en liknande profil. Dessutom visade ORAC-analysen en tydlig förbättring av antioxidantinnehållet i C. officinale-extraktet jämfört med askorbinsyran som standard.
den stabila dpph-radikala modellen är en allmänt använd, relativt snabb metod för utvärdering av fri radikal rensningsaktivitet. Effekten av växtantioxidanter på dpph-radikal rensning tros bero på deras vätedonationsförmåga. Minskningen i absorption av DPPH-radikal orsakad av antioxidanter på grund av reaktionen mellan antioxidantmolekyler och radikal, fortskrider, vilket resulterar i rensning av radikalen genom vätedonation. Tabell 1 illustrerar en signifikant minskning av koncentrationen av dpph-radikaler på grund av rensningsförmågan hos både C. officinale och L. chuanxiong extrakt och standard. Fri radikal rensning aktivitet ökade också med ökande koncentration. Dessa resultat indikerade att båda extrakten har en märkbar effekt på avlägsnande av fria radikaler. Metanolextraktet av L. chuanxiong visade en starkare dpph rensning aktivitet än C. officinale metanol extrakt jämfört med standard. Vi använde askorbinsyra som standard.
dessutom kan förmågan att rensa specifika radikaler riktas. Eftersom olika ROS har olika reaktionsmekanismer, för att helt bestämma antioxidantaktivitet mot ett brett spektrum av ROS, måste en mer omfattande uppsättning analyser utföras. Superoxidanjon (O2* -) radikal är en viktig faktor i biologiska system. För att bestämma huruvida hämning av NBT-reduktion berodde på superoxidavskiljningsaktivitet användes ett icke-enzymatiskt system för superoxidgenerering. I PMS-NADH-NBT-systemet reducerar superoxidanjon, härledd från upplöst syre från kopplingsreaktionen av PMS-NADH, NBT. Minskningen i absorbans vid 560 nm med antioxidanter indikerar konsumtionen av superoxidanjon i reaktionsblandningen. Tabell 2 visar den procentuella inhiberingen av superoxidradikalgenerering med 0-150 kg/ml C. officinale och L. chuanxiong metanolextrakt jämfört med det som visas av askorbinsyra. C. officinale och L. chuanxiong metanolextrakt visade en dosberoende hämning av superoxidradikaler. Både extrakten av C. officinale och L. chuanxiong har stark superoxidradikal rensning aktivitet (IC50 = 96,30 och 93,85 occurg/ml). Med tanke på de erhållna resultaten kan det förväntas att metanolextrakten av C. officinale och L. chuanxiong har antioxidantaktivitet, som här visas genom avlägsnande av superoxidradikal. IC50-värdena för alla dessa extrakt var större än för askorbinsyra, i vilken IC50 uppnåddes vid 8,76 occyg-koncentration.
Tabell 2
friradikalrensning och metallkelateringsverksamhet (IC50 occurg / ml) av metanolextrakt av C. officinale och L. chuanxiong
O2 * | H2O2 | Åh * | Nej * | metallkelation | |
---|---|---|---|---|---|
CO | 96.259 ± 8.024 | 136.280 ± 2.307 | 119.442 ± 7.444 | 57.252 ± 8.973 | 138.425 ± 13.292 |
LC | 93.848 ± 9.529 | 136.318 ± 2.626 | 113.107 ± 8.890 | 76.502 ± 3.033a* | 17.451 ± 5.858a* |
AAb | 8.762 ± 4.569 | 8.053 ± 3.677 | 3.034 ± 0.191 | 9.885 ± 0.478 | 43.235 ± 8.543 |
Values are means ± SD of three measurements. CO: C. officinale, LC: L. chuanxiong, AA: Ascorbic acid, O2·–: superoxide radical, H2O2: hydrogen peroxide, OH·: hydroxyl radical, NO·: nitric oxide radical
avlägsnande av H2O2 av båda extrakten kan hänföras till deras fenoler, som kan donera elektroner till H2O2, vilket neutraliserar det till vatten. H2O2-rensningskapaciteten mellan de två extrakten kan hänföras till deras elektrondoneringsförmåga. Förmågan hos båda extrakten att effektivt scavenge H2O2 visas i Tabell 2, där den jämförs med den för askorbinsyra som standard. Extrakten kunde rensa H2O2 på ett koncentrationsberoende sätt. C. officinale och L. chuanxiong-extrakt (0-150 Bac/ml) uppvisade IC50 av 136,28 respektive 136,32 Bac/ml, medan askorbinsyra visade 8,05 Bac/ml. Korrelationen mellan C. officinale och L. chuanxiong-värdena var statistiskt obetydlig. Även om H2O2 i sig inte är särskilt reaktivt kan det ibland orsaka cytotoxicitet genom att ge upphov till hydroxylradikaler i cellen. Således är avlägsnande av H2O2 mycket viktigt i hela livsmedelssystemen.
C. officinale och L. chuanxiong metanolextrakt utvärderades också för deras förmåga att rensa hydroxylradikaler med hjälp av deoxiribosnedbrytningsanalysen. I denna studie visade resultaten att alla prover kunde hämma deoxiribosnedbrytning (0-150 Baccarat/ml), med en liknande profil. De biokemiska studierna visade att C. officinale och L. chuanxiong orsakade en koncentrationsberoende hämning av deoxiribosnedbrytning. På IC50-värdenivån uppvisade C. officinale (119,44 occurg/ml) och L. chuanxiong (113,11 occurg/ml) samma styrka . Den totala OH-radikala rensningskapaciteten för varje extrakt jämfördes med askorbinsyrans.
växtextrakt mättes och jämfördes för deras fria radikaler mot kväveoxidradikaler. No * – rensningsaktiviteten för C. officinale och L. chuanxiong metanolextrakt undersöktes med SNP som No· – givare. Ingen frigörs från SNP reagerar med syre för att producera nitrit. NO scavenger konkurrerar med syre för att reagera med NO * släppt från SNP-lösning i PBS. I denna studie, extrakt från C. officinale och L. chuanxiong visade ingen * rensningskapacitet, även om vissa skillnader noterades. Nej * rensning aktivitet C. officinale var mer betydande än L. chuanxiong. Denna hämning kan också vara ett resultat av direkt avlägsnande av NO· genom extrakt. C. officinale hade den största aktiviteten att släcka ingen radikal. IC50-värdena var 57,25 respektive 76,50 kg/ml för C. officinale respektive L. chuanxiong.
keleringen av järnjoner med C. officinale och L. chuanxiong-extrakt uppskattades, där ferrozin kvantitativt bildar komplex med Fe2+. I närvaro av kelateringsmedel störs bildningen av detta komplex, vilket hindrar bildandet av den röda färgen som också ges av komplexet. Mätning av denna färgförändring möjliggör därför uppskattningen av den kelaterande aktiviteten hos den samexisterande kelatorn. I denna analys störde både extrakten och standardantioxidantföreningen bildandet av järn–ferrozinkomplex, vilket tyder på att de har kelaterande aktivitet och fångar järnjonen innan den kan bilda ett komplex med ferrozin. Som visas i Tabell 2 är bildandet av Fe2+–ferrozinkomplexet inte fullständigt i närvaro av C. officinale och L. chuanxiong metanolextrakt, vilket indikerar att båda extrakten kelaterar järnet. Absorbansen av Fe2 + – ferrozinkomplexet minskade linjärt på ett dosberoende sätt (0-150 kg/ml). Skillnaden mellan både extrakten av C. officinale och L. chuanxiong, och kontrollen var statistiskt signifikant. Metallkelatkapaciteten hos metanolextrakt av C. officinale och L. chuanxiong och askorbinsyra (alla vid IC50 ACC/ml) var 138,43, 17,45 och 43.24, vilket visade sig vara en signifikant skillnad mellan extrakten och kontrollerna.
för att bestämma effekterna av C. officinale och L. chuanxiong på cellens livskraft exponerades N2a-cellerna för C. officinale och L. chuanxiong (50-500 kg/ml) under en inkubationstid på 1 timme. i Figur 1 indikerar MTT-testet efter 1 h inkubation med C. officinale ingen signifikant viabilitetsskillnad i behandlade N2A-cellkulturer jämfört med kontroll. Genom MTT-test efter 1 h med L. chuanxiong observerades en signifikant ökning av livskraften i L. chuanxiong 500 occurg/ml behandlade N2A-celler i jämförelse med kontroll. Som visas i Figur 2 utfördes ingen bestämning efter 1 h inkubation i närvaro av C. officinale och L. chuanxiong (50-500 kg/ml). Behandling med L. chuanxiong minskade inte frisättningen av NO signifikant jämfört med kontroll, men 500 occurg/ml C. officinale minskade signifikant no-frisättningen. Av detta resultat kan man dra slutsatsen att de metanoliska extrakten av C. officinale och L. chuanxiong, vid de använda doserna, inte har några toxicitetseffekter.
effekt av C. officinale och L. chuanxiong metanoliska extrakt på cellviabilitet i N2a-celler. Värdena är medel för tre mätningar. * P < 0,05 jämfört med obehandlad normal (ANOVA / Tukey)
effekt av C. officinale och L. chuanxiong metanoliska extrakt på kväveoxidfrisättning i N2a-celler. Värdena är medel för tre mätningar. * P < 0,05 jämfört med obehandlad normal. (ANOVA / Tukey)