Effekt av långvarig behandling med azitromycin, klaritromycin eller Levofloxacin på Chlamydia pneumoniae i en kontinuerlig Infektionsmodell | Jiotower
diskussion
metoder som för närvarande används för odling av C. pneumoniae och i in vitro-känslighetsstudier är inte Analoga med infektionen eftersom den förekommer in vivo. Vi etablerade en in vitro-modell av kontinuerlig C. pneumoniae-infektion med HEp-2-celler som hade förblivit ständigt infekterade i över 4 år utan tillsats av färska klamydia eller värdceller, tillsats av cykloheximid eller centrifugering (23). Ultrastrukturella studier av de kontinuerligt infekterade cellerna avslöjade närvaron av en subpopulation av onormala inklusioner, vilka var mycket lika i utseende till persistenta former inducerade efter behandling med gammainterferon (22). Därför kan denna modell mer exakt återspegla interaktioner mellan klamydia och värdceller och därmed vara en bättre modell för in vitro-känslighetsstudier av C. pneumoniae.
resultaten av denna studie visade att långvarig behandling med azitromycin, klaritromycin och levofloxacin vid koncentrationer som uppnåddes i epitelfodervätskan minskade men eliminerade inte C. pneumoniae från kontinuerligt infekterade värdceller.
Galasso och Manire (7) var de första forskarna som använde en kontinuerlig infektionsmodell för antibiotikaaktivitetstestning. De utnyttjade HeLa-celler kontinuerligt infekterade med Chlamydia psittaci för att bestämma effekten av penicillin, tetracyklin och kloramfenikol. De fann att 500 U penicillin / ml undertryckte chlamydialtillväxten, men även långvarig behandling i 100 dagar misslyckades med att eliminera organismen. Mer än 14 dagars behandling med 10 kg tetracyklin/ml eller 21 dagar med 25 och 100 kg kloramfenikol/ml var nödvändigt för att undertrycka klamydial tillväxt till odetekterbara nivåer. Dreses-Werringloer et al. (6) nyligen rapporterade liknande observationer om effekten av ciprofloxacin och ofloxacin På etablerad (2 till 3 dagar postinokulering) C. trachomatis-infektion. De fann att båda läkemedlen, i koncentrationer som översteg den minimala baktericidkoncentrationen (0,5 kg ciprofloxacin/ml, 1,0 och 2,0 kg ofloxacin/ml), misslyckades med att utrota C. trachomatis från infekterade HEp-2-celler och inducerade också ihållande infektion som kännetecknas av ett lågt antal små avvikande inklusioner som finns genom 20 dagars odling. Efter avlägsnande av ciprofloxacin från media 10 eller 14 dagar efter infektion återgick den ihållande klamydiaen till öppen tillväxt.
resultaten av denna studie tar upp några viktiga frågor angående användningen av antibiotika, inklusive azitromycin, för sekundär förebyggande av hjärtmorbiditet (1, 10, 13). Doserna av azitromycin som används är 500 eller 600 mg/dag i 3 och 6 dagar följt av veckodoser på 500 till 600 mg under perioder av 3 månader till 1 år. Baserat på de data som presenteras här verkar det osannolikt att dessa doseringsregimer skulle eliminera C. pneumoniae från ett intravaskulärt fokus. Standard respiratorisk dosering av 1.5 g azitromycin under 5 dagar hade endast 70 och 83% effekt vid utrotning av C. pneumoniae från nasofarynx av kulturpositiva vuxna respektive barn med samhällsförvärvad lunginflammation (28). Data är likartade för andra antibiotika. Block et al. (3) fann att en 10-dagars behandling med erytromycin eller klaritromycinsuspension utrotade C. pneumoniae från nasofarynx hos 86 och 79% av kulturpositiva barn med samhällsförvärvad lunginflammation, trots att klaritromycin var fyra gånger mer aktiv in vitro (15). Resultaten av två lunginflammationsbehandlingsstudier hos vuxna, som utvärderade levofloxacin och moxifloxacin, fann utrotningshastigheter på 70 till 80% (16, 17). Dessus-Babus et al. nyligen beskrev induktionen av resistens mot ofloxacin och sparfloxacin i Chlamydia trachomatis efter seriell passage av organismen i subinhibitoriska koncentrationer av dessa läkemedel (5). Antibiotikaresistens har ännu inte beskrivits för C. pneumoniae. Emellertid Mikrofoner av tre isolat av C. pneumoniae, erhållen från två patienter med samhällsförvärvad lunginflammation behandlad med azitromycin, ökade fyrfaldigt efter behandling, även om de fortfarande var inom det intervall som ansågs mottagliga för läkemedlet (28). Det är inte klart om det var en isolerad händelse eller tyder på en eventuell utveckling av uthållighet. Vidare kan dosering en gång i veckan med azitromycin leda till långvarig exponering för subinhibitoriska läkemedelsnivåer, vilket leder till utveckling av resistens hos andra respiratoriska bakterier, särskilt Streptococcus pneumoniae (24, 26).
förekomsten av persistens väcker också en separat viktig fråga för behandling av C. pneumoniae-associerade sjukdomar. Persistenta former replikerar i allmänhet inte eller har minskad aktivitet och kan därför inte vara mottagliga för antibiotika. Det är mycket möjligt att 20 till 30% av mikrobiologiska misslyckanden i rapporterade C. pneumoniae-behandlingsstudier (3, 16, 17, 18) och förmågan hos C. pneumoniae att överleva antibiotikabehandling i våra experiment kan vara direkt relaterad till det ihållande tillståndet.
C. pneumoniae kan stimulera produktionen av cytokiner, kemokiner och vidhäftningsmolekyler i olika endotel-och epitelcellinjer(8, 9, 20, 25, 27). Dessa immunologiskt aktiva molekyler kan inducera och upprätthålla inflammatorisk process som kan spela en viktig roll i patogenesen av ateroskleros (30). Preliminära data visade högre produktion av vissa cytokiner i kontinuerlig infektionsmodell jämfört med primära kulturer (27). I denna studie stimulerade C. pneumoniae signifikant produktion av IL – 6 och IL-8 i de kontinuerligt infekterade HEp-2-cellerna. Dessa cytokiner har detekterats i fibrösa plack som tyder på deras engagemang i utvecklingen av ateroskleros (31).
makrolider och tetracykliner har visat sig ha antiinflammatoriska egenskaper oberoende av deras antimikrobiella aktivitet (19, 21, 32). Azitromycin och klaritromycin i koncentrationer av 1, 5 och 10 oc/ml har visat sig påverka i olika grad produktion av IL-1 oc, IL-1 oc, IL-6, IL-10, granulocyt-makrofagkolonistimulerande faktor och TNF-oc av humana monocyter (21). Mest anmärkningsvärt, azitromycin resulterade i en signifikant minskning av IL-1a och TNF-GHz hos 100% av individerna och behandling med klaritromycin resulterade i en signifikant minskning av IL-6 och TNF-ie hos 60 respektive 86% av individerna. På liknande sätt har minskning av 6-keto-prostaglandin F1a, NO2, TNF-exportorienterade, IL-1, och IL-6 nivåer observerats i murina makrofager behandlade med 5 till 80 mikrorim azitromycin, klaritromycin, roxitromycin och erytromycin (19). Även om behandling med alla tre antibiotika i denna studie minskade nivåerna av IL – 6 och IL-8 i de kontinuerliga kulturerna, verkade denna effekt främst vara sekundär mot antiklamydial aktivitet, eftersom nivåerna av cytokiner korrelerade med titrarna av C. pneumoniae.
