prevalens och några möjliga mekanismer för Kolistinresistens bland multidrugsresistenta och omfattande läkemedelsresistenta Pseudomonas aeruginosa

introduktion

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) är en opportunistisk patogen, som vanligen finns i miljö som jord, vatten, växter och sjukhusmiljö, med känd inneboende resistens mot många antimikrobiella medel och förmågan att att orsaka livshotande infektioner. Det anses vara den andra vanliga orsaken till sepsis på intensivvårdsavdelningar (ICU) och kan orsaka ventilatorassocierad lunginflammation, sårinfektioner och urinvägsinfektioner (UTI). Många studier rapporterade ökningen av dödlighet och sjuklighet av infektioner associerade med P. aeruginosa, särskilt de som visar flera läkemedelsresistensmönster.1-3

uppkomsten av multidrugsresistent (MDR) eller omfattande läkemedelsresistent (XDR) eller pandrugsresistent (PDR) P. aeruginosa blir ett betydande folkhälsoproblem som kan leda till försenad antimikrobiell behandling eller dess misslyckande och ökningen av dödligheten, särskilt med utseendet av karbapenemresistent P. aeruginosa. Så uppmärksamhet krävs eftersom dessa resistenta stammar kan visa resistens mot alla tillgängliga antimikrobiella medel eller visade mottaglighet endast för giftiga sådana som kolistin eller polymyxiner lämnar inga val för vårdteamet vid behandling av allvarliga infektioner associerade med MDR P. Aeruginosa.4

nyligen observerades uppkomsten av resistens mot polymyxiner bland vissa arter av Enterobacteriaceae såsom K. pneumoniae, E. coli, Enterobacter aerogenes och Enterobacter cloacae på grund av dess breda användning för att kontrollera infektioner inom veterinärmedicin. Kolistinresistens har blivit en stor utmaning för behandling av livshotande infektioner, särskilt med samexistensen av mcr-1-gener med andra multipla läkemedelsresistensgener som ESBL, MBL, NDM-gener med möjlighet till uppkomst av pan-läkemedelsresistens.5,6

kolistin, känd som polymyxin E, är en medlem av en familj av katjonisk polypeptid känd som polymyxiner. Denna antibiotikafamilj kännetecknas av närvaron av en lipofil fettacylsidokedja. Numera återinförs kolistin i medicinsk terapi och anses vara den sista utväg för behandling av allvarliga infektioner orsakade av MDR-och XDR-fläckar. I allmänhet beror verkan av polymyxiner på bakterier huvudsakligen på den elektrostatiska interaktionen mellan det positivt laddade antibiotikumet och den negativt laddade fosfatgruppen av lipid A lokaliserad på det yttre membranet efter dess bindning, diffunderar den genom det yttre membranet, periplasmiskt utrymme och interagerar med det inre membranet. Polymyxiner orsakar destabilisering mot det yttre membranet, porbildning, ökad permeabilitet, läckage till cytoplasmiskt innehåll följt av celllys.7

kolistinresistens uppstår huvudsakligen på grund av den kemiska modifieringen genom enzymatisk tillsats av fosfoetanolamin vid 4 – sackarosfosfatgruppen i lipiden en del av lipopolysackariden som minskar netto-negativ laddning av det yttre membranet vilket resulterar i minskande polymyxinaffinitet. Resistens mot kolistin kan bero på kromosomalt kodad mutation som rapporterats i K. pneumoniae eller horisontell överföring av resistens med hjälp av plasmidbärande kolistinresistent gen (mcr-1).8-11

framväxten av kolistinresistens i olika länder i Asien, Europa och vissa länder i Afrika har blivit en av de globala problemen. Som, kolistinresistensspridning indikerar dess förmåga att överföra horisontellt genom konjugativa plasmider eller vertikalt genom kromosomal mutation.12,13 också, är colistin en av de sista raderna av behandlingar för allvarliga infektioner, vilket gör uppkomsten av Colistin resistens isolerar hotar världen genom uppkomsten av untreatable infektionssjukdomar.14 detektion av kolistinresistens i Egypten, som är ett land känt av sin höga belastning av infektionssjukdomar och närvaron av låg eller ingen begränsning av antimikrobiell användning i både veterinär och medicin, vilket indikerar uppkomsten av obehandlade sjukdomar i vårt område på grund av möjligheten att överföra kolistinresistens till mycket resistenta bakterier.15

i denna studie undersöker vi förekomsten av kolistinresistens bland MDR och XDR P. aeruginosa isolerad från patienter som lider av olika infektioner i intensivvårdsavdelningen (ICU) vid Minia universitetssjukhus i Egypten.

material och metoder

insamling av isolat

ett hundra sjuttiofem kliniska prover av olika infektionskällor samlades in från patienter som togs in på ICU i Minia universitetssjukhus, Minia, Egypten som en del av rutinmässiga sjukhuslaboratorieprocedurer. Alla kliniska prover odlades på tryptikas sojaagar (Lab M, Storbritannien)vid 37 C och 42 C i 24 timmar. En koloni odlades på MacConkey-agarplattor och cetrimid-agar. Isolerade kolonier identifierades vidare enligt kolonimorfologi, laktosfermentering, biokemiska reaktioner (inklusive sulfid–indolmotilitet, katalas, trippel sockerjärn, ureas-och oxidastest), förmåga att växa på cetrimid-agar och växa vid 42 kg C. 16 P. aeruginosa-kolonier renades genom strimmor och rena kolonier lagrades vid 4 kg C.

Antibiotikakänslighetstester

antibiotikakänslighet med Kirby-Bauer-Skivdiffusionsmetod

antibiotikakänsligheten mot olika klasser av antibiotika testades med Kirby-Bauer-skivdiffusionsmetoden.17 Antibiotika skivor som användes var amoxicillin/clavulanic (AMC) (20/10 µg), ampicillin/sulbaktam (SAM) (20 µg), meropenem (MEM) (10 µg), imipenem (IPM) (10 µg), cefepime (FEB) (30 µg), cefoperazon (CEP) (75 µg), polymyxin B (PB) (300 mikrogram), ciprofloxacin (CIP) (5 µg), levofloxacin (LEV) (5 µg), gentamicin (KN) (10µg), ceftazidime (CAZ) (30 µg), tigecyklin (TGC) (15 µg), amikacin enligt (AK) (30 µg), tobramycin (CF) (10 µg), aztreonam (ATM) (30 µg), piperacillin (PRL) (30 µg), carbenicillin (BIL) (100 µg) (Oxoid; Basingstoke, UK). Isolat klassificerades som känsliga, mellanliggande och resistenta enligt hämningszonernas tolkningsstandarder för Clinical Laboratory standards Institute (CLSI) 2018.18

Mic-bestämning av Kolistinantibiotikum

Agar-utspädningsmetod på Muller-Hinton-agar användes för att bestämma kolistins minsta hämmande koncentration.19-resistens mot kolistin övervägdes om MIC är 4 0CG/mL enligt CLSI: s standardriktlinjer.18

enligt resultaten av antibiotikaresistens klassificerades isolat till MDR, XDR och PDR enligt de kriterier som tidigare rapporterats.20

Combined Disc Diffusion Test (CDT)

alla kolistinresistenta isolat (mic 6cb) testades med användning av 100 mm EDTA (Sigma-Aldrich; St.268 Louis, MO, USA) för att hämma mcr-1-aktiviteten eftersom denna koncentration inte visade någon antimikrobiell aktivitet. Bakteriestammarna odlades på Muller-Hinton agar (Lab M, Storbritannien) på vilka tre skivor användes. En skiva mättades med 10 oc 100 mm EDTA för att försäkra ingen hämning av bakterietillväxten genom den använda koncentrationen av EDTA. De andra två skivorna var 10 occurg Colistin skiva och 10 occurg colistin plus 10 occurl 100 mM EDTA skiva. Isolaten observerades för en ökning med 3 mm i inhiberingszonens diameter på kolistin / EDTA-skivan jämfört med kolistinskivan.21

förändring av Zetapotentialen

mcr-generna kodar fosfoetanolamin transferaser enzymer som enzymatiskt fäster en fosfoetanolamin (PEtN) – del till lipid A i det yttre membranet av gramnegativa bakterier vilket leder till minskning av dess netto negativa laddning som ger kolistinresistens.22

bakteriecellerna har tillåtits växa i närvaro och frånvaro av 80 occurg/mL EDTA. Därefter centrifugerades bakteriesuspensionen vid 5000 rpm i 5 min vid 5 kcal C sedan tvättades pellets två gånger, efter att pellets suspenderades i 2 mL steril 1 mM NaCl-lösning justerad till 0,5 McFarland standardlösning grumlighet. Proverna späddes till 1: 4 med användning av 1 mm NaCl. Zeta-potentialen bestämdes i 2 mL av det utspädda provet. Förändringar av Zeta-potential inducerad av EDTA beräknades från Zeta-potentialförhållandet (RZP=ZP+EDTA/ZP-EDTA), där ZP+EDTA och ZP-EDTA motsvarar Zeta-potentialvärden erhållna för bakteriella suspensioner odlade i närvaro eller frånvaro av 80 oc/mL EDTA. RZP av 2,5 värde av 2,5 värde betraktas som kriterier för identifiering av mcr-1-positiva stammar.21

DNA-extraktion

DNA-mallen extraherades från en nattkultur av P. aeruginosa som tidigare beskrivits.23 en suspension av bakteriell pellet kokades i 10 minuter och centrifugerades sedan. Supernatant användes direkt i PCR-analysen.

PCR-analys av de testade generna

Exotoxin A är en viktig virulensfaktor (ett cytotoxiskt medel) för P. aeruginosa vid kliniska infektioner. Denna faktor hämmar proteinbiosyntes som leder till stor vävnads-och organskada. Toxagenen, en inneboende genetisk sekvens belägen på P. aeruginosa-kromosomen, används för P. aeruginosa-bekräftelse med PCR.

PCR utfördes i en total volym av 25 oktyl innehållande 1x PCR-buffert, 1 oktyl/L av varje primer, 1 oktyl genomiskt DNA (ungefär150 ng), 200 oktyl/l dntps-blandning, 2 mmol/l MgCl2 och 0,05 U/oktyl Taq DNA-polymeras. PCR-förstärkningar utfördes för toxA FW:CTGCGCGGGTCTATGTGCC, RV:GATGCTGGACGGGTCGAG i en automatiserad termisk cycler (Eppendorf, Hamburg, Tyskland) under följande betingelser: 30 cykler av 1 min vid 94 kg C, 1,5 min vid 63 kg C och 1 min vid 72 kg C. 24

generna mcr-1 och mcr-2 analyserades med konventionell PCR-teknik med användning av följande primers: mcr-1 FW (5′-AGTCCGTTGTTGTTCTTGTGGC-3′), RV (5′-AGATCCTTGGTCTCGGCTTG-3′) och mcr-2 Fw (5 kg-ATGACATCACATCCTCTTGG-3 kg), Rv (5 kg-ttactggataaatgccgcgc-3 kg).25,26 teknikbetingelserna var 34 cykler av 95 CCB för 1 min, 58 CCB för mcr – 1 och 52 CCB för 30s, 72 CCB för 1min följt av slutlig förlängning av 72 CCB för 5 min.

bestämning av Effluxpumpar hämning genom MIC-reduktion med användning av Efflux Pump Inhibitor (CCCP)

agarutspädningsmetoden användes för bestämning av mikrofoner med användning av Katjonjusterad Mueller-Hinton buljong (Sigma-Aldrich, St Louis, USA). Mikrofonerna för CCCP (EPI) och kolistin bestämdes för de testade isolaten. Sub-MIC av CCCP användes för att bestämma dess effekt på colistin MIC; koncentrationen av CCCP (0,5 ml MIC) hölls ständigt vid de mic-koncentrationer som anges ovan medan antibiotikans ökades seriellt. Mic: erna för isolaten till kolistin i frånvaro och närvaro av CCCP bestämdes med användning av en sub-MIC av CCCP (slutlig koncentration av 10 mg/L) som redan beskrivits.27 Den resulterande mic-vikningen ändras efter tillsats av CCCP beräknades som förhållandet mellan det CCCP-fria antibiotikans MIC-nivå och det för det CCCP-tillsatta antibiotikumet. Som tidigare beskrivits av Osei Sekyere rapporterade Amoako28 who att det positiva kriteriet för förekomst av effluxpumpar i isolat var en 8-faldig minskning av kolistin MIC efter tillsats av CCCP.

yttre Membranproteinmönster

en enda koloni av de testade P. aeruginosa-isolaten odlades i 5 mL LB-buljong vid 37 kcal C i 2 dagar med skakning vid 200 rpm. Celler centrifugerades vid 8000 rpm i 5 minuter. Bakteriepellets suspenderades i 1 mL lysbuffert (0,05 m Tris HCL, 2% SDS, 10% glycerol), upphettades vid 95 kcal C i 10 minuter. Därefter centrifugerades proverna för 10.000 rpm för 30 min. Cirka 50 okyl extraherat protein blandades med provbuffert (4 mL avjoniserat vatten, 1 mL 0,5 m Tris HCL, 1,6 mL 10% SDS, 0,4 mL 2-merkaptoetanol, 0,2 mL 1% (w/v) Bromofenolblått) (1:1) och separerades med 12% natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgel (SDS-sida).29

lipopolysackarid SDS-Polyakrylamidgelprofil för Kolistinkänsliga och Kolistinresistenta isolat

LPS av de testade isolaten extraherades och renades med varm vattenhaltig fenolmetod med användning av Westphal, Jann30 och analyserade det renade materialet med användning av SDS-PAGE, följt av kolhydratspecifik silverfärgning.31

resultat

Pseudomonas aeruginosa-isolering och antibiotikaresistens

av 175 prover som samlats in från patienter som lider av olika infektioner var 75 prover (42, 8%) positiva fenotypiskt för P. aeruginosa och positivt för toxA-genen.

antimikrobiell känslighetstestning avslöjade att den isolerade P. aeruginosa var fullständigt resistenta mot amoxicillin/klavulansyra och hög resistens observerades mot ampicillin/sulbaktam (68%), ceftazidim (63%) och azetreonam (60%). Måttlig resistens observerades mot både tobramycin och tigecyklin (50% vardera). Dessutom visades låg resistens mot imipenem (6%) och meropenem (5,3%) (Figur 1). Enligt resultaten av antibiotikaresistensen klassificerades de resistenta isolaten till MDR (96%), XDR (87%) och inget isolat klassificerades som PDR. Dessutom visade det sig att av 75 isolat visade 16 isolat (21, 3%) resistens mot kolistinantibiotikum med mic 2BG/mL (varierade från 8 till 256 bg/mL).

Figur 1 Antibiotikaresistensmönster av alla isolerade P. aeruginosa-isolat.

bestämning av Mcr – 1-och Mcr-2-gener

Mcr-1-genen detekterades fenotypiskt i de kolistinresistenta isolaten med CDT där skillnaderna mellan diametrarna för inhiberingszoner för kolistin/EDTA-och kolistinskivor mättes till 3 mm. resultaten visade att 6 isolat (37,5%) visade en ökning av kolistin/EDTA-skivans diameter med 3 till 10 mm jämfört med kolistinskiva ensam (figur 2).

Figur 2 fenotypisk detektion för mcr-positiva isolat genom kombinerat skivdiffusionstest (CDT). (A): mcr-1-positiv stam visade en ökning av zondiametern hos skivor med kolistin och EDTA 3 mm i jämförelse med kolistin ensam. (B): mcr-1-negativt isolat visade liten förändring (1 mm) i inhiberingszondiametern för kolistin och EDTA-skiva jämfört med kolistin ensamt.

förändring av Zetapotential

å andra sidan hölls förändring av Zetapotentialanalys som en fenotypisk detektion till MCR-gener, men resultaten visade ingen signifikant förändring i zetapotentialen utom i 2 isolat.

detektion av resistensgener

den genetiska detektionen av mcr-gener med konventionell PCR-teknik avslöjade att 8 (50%) isolat var positiva för mcr-1, 6 av dem var positiva för CDT, medan 100% (16 isolat) var negativa för mcr-2.

antibiotikaresistens för Kolistinresistenta isolat

känsligheten för det kolistinresistenta isolatet mot andra antibiotika bestämdes med Kirby-Bauer skivdiffusionsmetod, resultaten visade att 100% av isolaten var resistenta mot Amoxicillin/klavulan, medan resistens mot Ampicillin/sulbactam, cefepim och Tobramycin var 78,12%, 71,87% respektive 68,75%. De mest effektiva drogerna var meropenem, imipenem och ciprofloxacin (Figur 3)

Figur 3 Antibiotikaresistensmönster av kolistinresistenta isolat.

.

bestämning av Effluxpumpar inhibering genom Mic-reduktion med användning av CCCP

genom att studera effekten av 0,5 MIC CCCP på MIC-kolistinet, fann man att endast 3/16 isolat (P6, P8 & P16) (18,75%) visade en minskning av Mic av colistin 8-faldigt (Tabell 1) i närvaro av CCCP. Från tidigare resultat, isolatet nr. 16 visade sig ha effluxmekanism och mcr-1-gen.

Tabell 1 Kolistinresistenta isolat, några möjliga mekanismer för resistens mot kolistin och deras mottaglighet för andra antibiotika

yttre membran SDS-sida profil

Tabell 2 och figur 4 visar att fem band med molekylvikter av 66,7, 56,06, 47,8, 40,18 och 23.6 KDa var stabila i känsliga och resistenta isolat medan ett band med en molekylvikt på 21 KDa hittades endast i kolistinresistenta stammar som var P1 (mcr-1-positiva) och P12 (mcr-1-negativa).

Tabell 2 molekylvikter och mängd % extraherade yttre membranproteiner av Kolistinresistenta och Kolistinkänsliga P. Aeruginosa

Figur 4 yttre membran SDS-sida av kolistinresistenta och känsliga stammar. Lane 1: Proteinmarkör, Körfält 2 och Körfält 3: kolistinresistenta stammar (P1 & P12), Körfält 4-6: kolistinkänsliga stammar.

lipopolysackarid (LPS) SDS-sida

lipopolysackarid silverfärgad SDS-sida visade att kolistinresistenta mcr-1 negativa isolat (P3, P6 och P10) visade inget LPS-bandmönster (O-antigenupprepningar eller LPS-kärna) som avslöjade möjligheten för deras förlust och motståndet hos dessa isolat mot kolistin. Å andra sidan visade Kolistinresistent mcr-1 positiv stam o-antigenupprepningar (Figur 5, körfält 5) som skiljer sig från O-antigenupprepningsmönster av Kolistinkänslig stam (Figur 5, körfält 4) medan båda visade LPS-kärna. Dessa resultat kan indikera närvaron av modifierade LPS i mcr-1-positiv stam.

Figur 5 LPS band mönster. Körfält 1, 2 & 3: kolistinresistenta mcr-1 negativa stammar (P3, P6 & P10, respektive), Körfält 4: Kolistinkänsliga stammar och Körfält 5: Kolistinresistent mcr-1 positiv stam (P1). O-antigenupprepningar är boxade och pilen hänvisar till LPS-kärnan.

diskussion

nyligen uppträder multidrugsresistenta patogena bakteriestammar där de flesta tillgängliga antibiotika inte är effektiva mot dem.6,32-36 polymyxinerna ansåg den sista utväg för behandling av multi-läkemedelsresistenta bakterieinfektioner, så att studera uppkomsten av kolistinresistent var ett måste. Polymyxiner visade sin aktivitet genom deras elektrostatiska interaktion mellan dem och de negativt laddade delarna på lipid A av gramnegativa bakterier vilket resulterade i destabilisering av det yttre membranet och läckage av cytoplasmiskt innehåll och LYS.37,38

det visade sig att den vanligaste orsaken till polymyxinresistens är LPS-modifiering genom tillsats av 4 – amino-4-deoxi-L-arabinos (Lara4N) och fosfoetanolamin (kodad av mcr-typgener) eller galaktosamin till lipid A av LPS-kärna. Som ett resultat påverkar en minskning av den netto-negativa laddningen av fosfatrester polymyxins affinitet till membranet eller på grund av effekten av tvåkomponentregleringssystem (TCSs) pmrA/pmrB och phoP/phoQ.39

i vår studie upptäckte vi kolistinresistens enligt resultaten av mikrofoner följt av deras testning för närvaron av mcr-1-fosfoetanolamintransferas med fenotypiska metoder och detektering av mcr-1gen. Fenotypiska metoder beror på att mcr-1 fosfoetanolamin är zinkmetalloprotein. Så, någon minskning av zink kommer att minska MICs av kolistin i isolat positiva för mcr-1. Att vara mcr – 1-kodande enzym tillåter ett zinkmetalloprotein att använda EDTA som en metallkelator för att minska zink i media och påverka kolistinmikrofoner och zeta-potentialerna hos mcr-1-positiva isolat.40

vår studie visade hög prevalens av P. aeruginosa (42,8%). MDR P. aeruginosa motsvarade 96% av de totala isolaten och 87% var XDR. Hög förekomst av kolistinresistent P. aeruginosa (21.3%) upptäcktes vilket kan vara ett resultat av otillräckliga infektionsbekämpningsåtgärder och missbruk av bakteriedödande antibiotika i intensivvårdsavdelningarna på våra landssjukhus. Dessutom används kolistin i stor utsträckning i våra länder för tillväxtfrämjande av livsmedelsproducerande djur, särskilt i fjäderfäindustrin medan karbapenemer används i nödfall.15 så visade karbapenem observerbar aktivitet mot de testade organismerna i jämförelse med kolistin. Å andra sidan observerades våra resultat vara högre än de som rapporterades av Liassine et al25 som rapporterade att ett isolat av 300 isolat av olika bakteriearter identifierades som P aeruginosa som visar resistens mot kolistin och hyser mcr-1-gen.

kombinerat skivdiffusionstest (CDT) och förändringen av zetapotential inducerad av EDTA användes som fenotypiska metoder41,42 för detektering av mcr-1-gen. Resultaten visade att inga isolat var positiva för mcr-2 och 8 (50%) isolat av kolistinresistenta isolat var mcr-1 positiva medan 2 isolat av dessa isolat visade RZP > 2,5. Av 8 mcr-1 positiva isolat var 6 isolat positiva för CDT medan två mcr-1 positiva (stam nr. P15 och P16) var negativa för CDT vilket kan bero på samproduktion av ytterligare mekanism för kolistinresistens som stör effekten av EDTA.21 som, det konstaterades att isolera nr. P16 (mcr-1-positiv och CDT-negativ) var positiv för utflöde.21,43-45 dessutom kan kolistinresistenta isolat som var negativa för mcr-1 ha mutationer på grund av långvarig användning av antimikrobiella medel.

dessutom testade vi kolistinresistenta isolat för förekomst av effluxmekanismer med hjälp av CCCP (en effluxpumpshämmare) och skillnaden i yttre membranprotein och LPS SDS-SIDPROFIL bland känsliga och resistenta isolat. Våra resultat avslöjade förekomsten av effluxmekanism bland 3 isolat medan en av dem var mcr-1 positiv. Yttre membranproteinprofil visade ett band med en molekylvikt på 21 KDa i de resistenta isolaten P1 (mcr-1-positiv) och P12 (kolistinresistent mcr-1-negativ). Dessutom fann man att kolistinresistenta mcr-1-negativa stammar visade inget LPS-bandmönster (O-antigenupprepningar eller LPS-kärna) men mcr-1-positiva (P1) och kolistinkänsliga isolat visade LPS-kärna men olika O-antigenupprepningar mönster. Machado et al20 studerade utflödespumpens roll i kolistinresistens i Acinetobacter baumanni och fann att utflödesaktivitet bidrar till heteroresistansen hos A. baumanni i frånvaro av mutation. Marjani et al43 visade att 22,5% av den isolerade P. aeruginosa var resistenta mot kolistin vilket ligger nära våra resultat och mer än 50% av kolistinresistenta isolat var positiva för utflödespumpar.

även om den exakta mekanismen för bakteriell dödande av kolistin eller polymyxiner inte är tydligt känd, är det känt att deras bindning till de positivt laddade peptiderna och den negativt laddade Lipid A är ett kritiskt steg. Så vi testade deras LPS SDS-PAGE-profil och en signifikant skillnad mellan de testade stammarna observerades. I en studie gjord av Moffatt et al, 46 rapporterades att förlusten av LPS resulterade i uppkomsten av A. baumanii kolistinresistent som uppstår på grund av inaktiveringen av lipid A-biosyntesgener (lpxA, lpxC eller lpxD). Yttre membranproteinmönster visade närvaron av ett band med molekylvikt som är 21 KDa i kolistinresistenta isolat som kan motsvara OprH enligt det som rapporterats av Nicas och hancock47 som rapporterade att OprH-uttryck spelar en roll i Pseudomonas resistens mot polymyxiner och EDTA eftersom OprH ersätter tvåvärda katjoner i det yttre membranet vilket resulterar i blockering av polykationiskt antibiotikaupptag. Den tidigare upptäckten kan förklara varför stam nr. P1 (mcr-1 positiv) var negativ för CDT.

slutsatser

den aktuella studien visade en hög prevalens av MDR och XDR P. aeruginosa som visade kolistinresistens bland patienter inlagda på ICU som lider av olika infektioner. Det visade också närvaron av olika mekanismer som kan resultera i kolistinresistens. Detta indikerar det akuta behovet av att ändra antibiotikabehandlingsstrategierna för både människor och djur.